| 研究課題/領域番号 |
14370798
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| 研究種目 |
基盤研究(B)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
病態検査学
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| 研究機関 | 東京慈恵会医科大学 |
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研究代表者 |
保科 定頼 (2004) 東京慈恵会医科大学, 医学部, 助教授 (30119846)
町田 勝彦 (2002-2003) 東京慈恵会医科大学, 医学部, 教授 (70056886)
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| 研究分担者 |
上出 良一 東京慈恵会医科大学, 医学部, 教授 (40119780)
河野 緑 東京慈恵会医科大学, 医学部, 助手 (00225385)
桜井 進 (財)河野臨床医学研究所, 室長 (20056542)
保科 定頼 東京慈恵会医科大学, 医学部, 講師 (30119846)
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| 研究期間 (年度) |
2002 – 2004
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| 研究課題ステータス |
完了 (2004年度)
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| 配分額 *注記 |
10,400千円 (直接経費: 10,400千円)
2004年度: 2,100千円 (直接経費: 2,100千円)
2003年度: 4,900千円 (直接経費: 4,900千円)
2002年度: 3,400千円 (直接経費: 3,400千円)
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| キーワード | 黄色ブドウ球菌性表皮剥脱毒素 / ETA, ETB / Fibronectin / Plakoglobin / β-catenin / staphylococcal exfoliative toxin / ETA / desmosomal cadherin / ganglioside / ブドウ球菌性表皮剥奪素 / beta-catenin / plakoglobin / desmocollin 1 / plectin / desmoyokin / desmocalmin |
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| 研究概要 |
黄色ブドウ球菌性表皮剥脱毒素はヒト以外には新産マウス、新産ハムスターのdesmosomeをhalf-desmosomeに切断する毒性を発現する。胎生期17日目、新産ならびに生後8日目のマウス皮膚組織からmRNAを抽出し、R-PCRによってdesmosome構成蛋白をコードする遺伝子の発現を解析した。その結果、新産マウスではplakoglobinが強く発現し、生後8日目ではほとんど検出できないまでに低下した。他のdesmosome構成蛋白をコードするdesmogleins (Dsg;Dsg-1,-2,-3),desmocollins (Dsc;Dsc-1,-2,-3),Plectin, desmoyokin, desmoplakin各遺伝子発現はdevelopmental stageに関係なく、ほぼ同程度であった。この結果からplakoglobinがETの標的物質であると推定された。ETを背部に皮下接種し、表皮が剥脱した新産マウスから水不溶性画分を調製し、mouse monoclonal抗plakoqlobin IgG-Biotin標識抗体を用いてwestern blotを行った結果、対照マウスと比較してplakoglobinのシグナルの低下がみられた。しかし同様な方法によりDsg-1のシグナルには変化が認められなかった。今回desmosomal proteinを検出するためのELISA systemを開発し、2.4ng/200ulのDsg-1/Fc chimeraを検出できた。このELISA systemによる水可溶性画分中のplakoglobin量は生後8日目のマウスと比較して新産マウスでは高く、RT-PCRと一致する結果が得られた。Chemiluminescent HRP ELISA Substrate Kitを用いて検出感度を高め、SSSS患者由来材料についてplakoglobin量と本疾患感受性との相関をさらに検討したい。
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