| 研究課題/領域番号 |
14380301
|
|---|
| 研究種目 |
基盤研究(B)
|
| 配分区分 | 補助金 |
|---|
| 応募区分 | 一般 |
|---|
| 研究分野 |
機能生物化学
|
|---|
| 研究機関 | 群馬大学 |
|---|
研究代表者 |
的崎 尚 群馬大学, 生体調節研究所, 教授 (80252782)
|
|---|
| 研究分担者 |
大江 良秀 群馬大学, 生体調節研究所, 教務員 (80125830)
金子 和光 群馬大学, 医学部, 助手 (00334095)
岡澤 秀樹 群馬大学, 生体調節研究所, 助手 (80334126)
小林 久江 群馬大学, 生体調節研究所, 教務員 (80234839)
|
|---|
| 研究期間 (年度) |
2002 – 2003
|
| 研究課題ステータス |
完了 (2003年度)
|
| 配分額 *注記 |
17,100千円 (直接経費: 17,100千円)
2003年度: 6,600千円 (直接経費: 6,600千円)
2002年度: 10,500千円 (直接経費: 10,500千円)
|
|---|
| キーワード | 細胞間シグナル伝達 / 細胞運動 / 細胞接着 / Ectodomain shedding / マクロファージ機能 / SHPS-1 / CD47 / SIRPβ / 細胞内シグナル伝達 / 血小板 / 神経シナプス機能 |
|---|
| 研究概要 |
私共は、これまで蛋白質チロシンリン酸化を介する細胞内シグナル伝達系に関する研究を継続してきているが、その過程において、全く新たな細胞間シグナル伝達システムであるCD47-SHPS-1系を見い出している。本研究では、このCD47-SHPS-1系の生理機能と作用機構に関し検討を行った。その成果を以下に列記する。
(1)CD47-SHPS-1系による細胞運動の制御機構を詳細に解析するために、SHPS-1を発現する種々の培養細胞の運動能を解析できるシステムを構築した。この系を用い、CD47とSHPS-1の相互作用により活性化されるSHPS-1の下流シグナルにつき検討した。SHPS-1を発現する細胞にSHPS-1抗体あるいはCD47-Fcを作用させると、SHPS-1の脱リン酸化とアクチン細胞骨格系再編成の障害が認められ細胞運動の抑制が観察された。従って、CD47-SHPS-1系はSHP-2の制御を介して細胞運動を負に調節していると考えられた。
(2)SHPS-1を発現する培養細胞において、SHPS-1が膜貫通領域の直上で切断され細胞外領域が培地中に放出されること(Ectodomain shedding)を見い出している。このSHPS-1のEctodomain sheddingは少なくともRasあるいはProtein kinase Cの活性化により刺激され、SHPS-1の細胞外領域の切断にはある種のメタロプロテアーゼが関与していることを見い出している。さらに、Ectodomain sheddingを受けないタイプの変異型SHPS-1を発現させると、細胞運動の抑制や細胞伸展の異常が観察された。従って、適切なSHPS-1のEctodomain sheddingがSHPS-1による細胞運動制御に重要であることが示唆された。
(3)SHPS-1のファミリー分子であると考えられるSIRPβのマウス遺伝子を単離し、その特異的抗体を作成した。SIRPβはSHPS-1と同様にマクロファージに発現していることを確認した。さらに、腹腔内マクロファージをSIRPβの特異的抗体で架橋刺激すると、MAPキナーゼの活性化を介しマクロファージによるオプソニン化赤血球の貪食を亢進させることを見い出した。従って、Fcγ受容体を介したマクロファージによる貪食作用をSIRPβの架橋刺激は正に制御していることが示唆された。
このように、私共は、本研究の予定をほぼ達成することができた。
|
