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ミトコンドリアDNA・呼吸鎖関連領域の多型と発現解析による低酸素性急死事例の研究

研究課題

研究課題/領域番号 14570381
研究種目

基盤研究(C)

配分区分補助金
応募区分一般
研究分野 法医学
研究機関筑波大学

研究代表者

本田 克也  筑波大学, 社会医学系, 教授 (00240789)

研究分担者 田中 榮之介 (田中 栄之介)  筑波大学, 社会医学系, 助教授 (30138416)
研究期間 (年度) 2002 – 2003
研究課題ステータス 完了 (2003年度)
配分額 *注記
3,500千円 (直接経費: 3,500千円)
2003年度: 900千円 (直接経費: 900千円)
2002年度: 2,600千円 (直接経費: 2,600千円)
キーワードマイクロダイセクション / ミトコンドリアDNA / 偽遺伝子 / 窒息 / 急死 / 法医解剖 / DNA定量 / 酸素欠乏 / 呼吸 / 窒息死 / 内因性急死 / 病死 / 脳 / 法医学 / マイクロダイゼクション / 解剖
研究概要

本研究は、法医解剖された遺体のうち、窒息死、あるいは呼吸器系疾患、あるいは急性心臓死や循環器系疾患による低酸素状態が誘発される突然死例を対象にした。その死因を明確にする目的で、遺族の承諾を得て採取後、病理組織標本作成用の脳と心筋の一部を凍結標本とした。凍結標本の薄切を行った後、マイクロダイゼクション(エッペンドルフ社製)により同種細胞を切り出し、目的とする領域をPCR増幅した。以上の方法については、適切な実験手技が確立できた。
領域としては、呼吸鎖関連領域のダイレクト・シークエンスと核内DNAのミトコンドリアDNA偽遺伝子のダイレクトシークエンスを行い塩基変異について検索している。なお、呼吸鎖関連領域と急死例との関連性について事例を集めつつ検索中である。
窒息状態の経過が長い事例においては、比較的良好な結果が得られたが、臓器別では心臓や腎臓にて良好な結果が得られた。また脳は酸欠に弱いため、試料としての有用性が期待されたが、細胞の崩壊が早く、データにはバラつきが見られた。
また解剖により採取された血液から白血球を分離し、ゲノムDNAを抽出した後、リアルタイムPCRにて、ミトコンドリアDNAの定量を行ったが、方法としては2段階PCR法が目的とする領域を効率良く増幅できることが明らかになった。具体的には1回目のPCRにて約1000bpを増幅し、2回目のPCRにて126bpを増幅することがもっとも検出が容易であることが判明し、その実験プロトコールを確定し、データ解析中である。

報告書

(3件)
  • 2003 実績報告書   研究成果報告書概要
  • 2002 実績報告書
  • 研究成果

    (15件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (15件)

  • [文献書誌] Myo-Thaik-Oo, et al.: "Estimation of Postmortem Interval from Hypoxic Inducible Levels of Vascular Endothelial Growth Factor."J Forensic Sci.. 47. 186-189 (2002)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Myo-Thaik-Oo, et al.: "No significant differences in the postmortem interval in Myanmar and Japanese using vitreous potassium levels."J Clin Forensic Med.. 9. 115-118 (2002)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Oikawa H, et al.: "The specific mitochondrial DNA polymorphism found in Klinefelter's syndrome."Biochem Biophys Res Commun.. 297. 341-345 (2002)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Honda, K, et al.: "DNA analysis of sex chromosomal aberration : curious mutation found in Turner syndrome."Proress in Forensic Genetics 10. 468-470

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Honda, K, et al.: "Graphic SSCP analysis of ABO genotypes for forensic application."Proress in Forensic Genetics 10. 586-588

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Myo-Thaik-Oo: "Estimation of Postmortem Interval from Hypoxic Inducible Levels of Vascular Endothelial Growth Factor."J Forensic Sci.. 47. 186-189 (2002)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Myo-Thaik-Oo: "No significant differences in the postmortem interval in Myanmar and Japanese using vitreous potassium levels."J Clin Forensic Med.. 9. 115-118 (2002)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Oikawa H: "The specific mitochondrial DNA polymorphism found in Klinefelter's syndrome."Biochem Biophys Res Commun.. 297. 341-345 (2002)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Honda, K: "DNA analysis of sex chromosomal aberration : curious mutation found in Turner syndrome."Proress in Forensic Genetic. 10. 468-470

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Honda, K: "Graphic SSCP analysis of ABO genotypes for forensic application."Proress in Forensic Genetic. 10. 586-588

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] 本田克也, 中村貴子他: "ターナー症候群におけるDNA多型"DNA多型. Vol.11. 201-204 (2003)

    • 関連する報告書
      2003 実績報告書
  • [文献書誌] 中村貴子, 本田克也他: "ラグメント解析による高精度ABO式遺伝子型多型"DNA多型. Vol.11. 150-156 (2003)

    • 関連する報告書
      2003 実績報告書
  • [文献書誌] K.Honda, et al.: "DNA analysis of sex chromosomal aberration : curious mutation found in Turner syndrome"Progress in Forensic Genetics. Vol.10(in press). (2004)

    • 関連する報告書
      2003 実績報告書
  • [文献書誌] K.Honda, et al.: "Graphic SSCP analysis of ABO genotypes for forensic application"Progress in Forensic Genetics. Vol.10(in press). (2004)

    • 関連する報告書
      2003 実績報告書
  • [文献書誌] Oikawa H, Honda K. et al.: "The specific mitochondrial DNA polymorphism found in Kline felter's syndrome"Biochemical Biophysical Research Communication. 297.(2). 341-345 (2002)

    • 関連する報告書
      2002 実績報告書

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公開日: 2002-04-01   更新日: 2016-04-21  

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