| 研究課題/領域番号 |
14570793
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
小児科学
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| 研究機関 | 大阪府立母子保健総合医療センター(研究所) |
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研究代表者 |
道上 敏美 大阪府立母子保健総合医療センター研究所, 環境影響部門, 部長 (00301804)
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| 研究分担者 |
大薗 恵一 大阪大学, 大学院・医学研究科・生体統合医学・小児発達医学, 教授 (20270770)
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| 研究期間 (年度) |
2002 – 2003
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| 研究課題ステータス |
完了 (2003年度)
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| 配分額 *注記 |
2,900千円 (直接経費: 2,900千円)
2003年度: 800千円 (直接経費: 800千円)
2002年度: 2,100千円 (直接経費: 2,100千円)
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| キーワード | 神経芽細胞腫 / 骨転移 / RANKL / 遺伝子治療 / osteoprotegerin / 破骨細胞 / 筋肉内遺伝子導入 |
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| 研究概要 |
神経芽細胞腫はしばしば骨に転移する。我々は、ヒト神経芽細胞腫細胞株とマウス骨髄細胞との共存培養下で破骨細胞形成因子RANKLの発現が上昇し、破骨細胞形成が促進することを見い出し、報告した。前立腺癌や多発性骨髄腫等の骨転移においても、RANKLシグナルの関与が示唆されている。そこで、骨転移に対する臓器特異的治療法の開発を目的として、動物モデルを用いてRANKLに対するデコイ受容体であるosteoprotegerin(OPG)の発現プラスミドを用いた遺伝子治療を試みた。発現ベクターとしては種々の臓器で高い発現が得られるpCAGGSを用い、検出のためにFLAGタグをC端側に融合させた(pCAGGS-OPG-FLAG)。OPG-FLAGの活性については、COS7にpCAGGS-OPG-FLAGを導入し、培養上清をin vitro破骨細胞形成系に添加することにより確認した。動物への遺伝子導入にはnaked DNA筋注法に電気穿孔法を併用した。まず、正常ラットの筋肉内にpCAGGS-OPG-FLAGを導入し、経時的に採血を行い、OPG-FLAGの発現、分泌を確認した。神経芽細胞腫骨転移と同様に融解性骨病変を有する腫瘍随伴性高カルシウム血症の動物モデルにpCAGGS-OPG-FLAGの筋肉内遺伝子導入を行ったところ、高カルシウム血症が是正された。また、骨粗鬆症のモデルであるOPGノックアウトマウスにpCAGGS-OPG-FLAGの筋肉内遺伝子導入を行ったところ、骨量の増加を認めた。これらの結果から、神経芽細胞腫骨転移などにおける融解性骨病変に対して、OPGを用いた遺伝子治療の可能性が示唆された。
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