研究課題
基盤研究(C)
肝腫瘍の(偽)被膜の由来と被膜形成の要因(宿主側か腫瘍側か)、およびその形成のメカニズムについて、解明することを目的として、大腸癌肝転移巣を対象とし病理組織学的情報と遺伝子学的解析をあわせて行った。【材料と方法】1.組織RNAの回収とマイクロアレイ解析大腸癌肝転移外科切除例を対象に新鮮切除標本から腫瘍と非腫瘍組織を採取した。2.解析ソフトはGeneSpringとd-Chipを使用した。3.病理組織学的検索切除標本は、遺伝子解析に提出されたものと近接する部位をパラフィン包埋し、hematoxylin and eosin染色したものを病理形態学的に検討した。検討項目は、1)組織学的分化度、2)壊死の割合、3)肝内脈管および神経(門脈、胆管、神経)に対する侵襲の有無、4)癌部と非癌部間の線維組織(偽被膜)の発達の程度である。線維組織の発達の程度は癌部と非癌部間にあるコラーゲン束の数を顕微鏡で計測して以下のように階層化した;0=まったく発達していない、1=軽度発達;コラーゲン束が10列以内、2=高度発達;コラーゲン束が11列以上。4.2002年9月から2004年11月までに40例(結腸癌肝転移26例、直腸癌肝転移14例)のうち33例について上記材料を集積した。組織学的検査のための標本は切除後すぐに作製し病理学的な検討を行った。組織RNAの回収は2005年4月に組織学的検索の結果から被膜発達程度により3つに分けたグループから今回は被膜なし群、高度発達群から5例ずつを抜き出して、total RNAの品質チェックを行った後にマイクロアレイ解析を行った。total RNAの品質はいずれも解析に十分なものと判定された。d-Chipを用いた解析では腫瘍部と非腫瘍部で2通りずつのフィルタリング、クラスタリングをおこなったところ、腫瘍部では、被膜の厚い群となし群で47個の遺伝子が抽出された。一方、非癌部組織で同様の解析を行うと、いずれの方法でも5個の遺伝子が抽出された。
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