| 研究課題/領域番号 |
14571519
|
|---|
| 研究種目 |
基盤研究(C)
|
| 配分区分 | 補助金 |
|---|
| 応募区分 | 一般 |
|---|
| 研究分野 |
泌尿器科学
|
|---|
| 研究機関 | 北里大学 |
|---|
研究代表者 |
入江 啓 北里大学, 医学部, 講師 (50193694)
|
|---|
| 研究分担者 |
岩村 正嗣 北里大学, 医学部, 講師 (20176564)
宋 成浩 北里大学, 医学部, 助手 (30206669)
佐藤 威文 北里大学, 医学部, 助手 (50286332)
志村 哲 北里大学, 医学部, 助手 (40216114)
丸 典夫 北里大学, 医学部, 助手 (00245432)
奥野 紀彦 北里大学, 医学部, 助手 (80317031)
|
|---|
| 研究期間 (年度) |
2002 – 2004
|
| 研究課題ステータス |
完了 (2004年度)
|
| 配分額 *注記 |
3,200千円 (直接経費: 3,200千円)
2004年度: 1,100千円 (直接経費: 1,100千円)
2003年度: 1,000千円 (直接経費: 1,000千円)
2002年度: 1,100千円 (直接経費: 1,100千円)
|
|---|
| キーワード | 遺伝子治療 / 膀胱癌 / アデノウイルス / アデノウイルスレセプター / 癌遺伝子 / リボザイム / 癌抑制遺伝子 |
|---|
| 研究概要 |
膀胱癌遺伝子治療における、治療効果増強を目的とした研究を行ってきた.まず2個の治療的遺伝子をアデノウイルスベクター(Ad5)に組み込み、これら遺伝子が治療後良好に腫瘍細胞内で発現し、標的遺伝子およびその標識蛋白の発現量を変化させる事を確認.さらにこのベクターの治療効果が、単一治療的遺伝子導入時より優れており、非特異的細胞障害性を減弱させることを確認した.続いて、このアデノウイルスベクターの膀胱癌細胞への感染効率の向上を目的とした研究を行った.前年度までに、アデノウイルスの感染効率が、そのレセプターであるCAR(Coxsackie-Adenovirus Receptor)の標的細胞内での発現量に依存し、感染効率が異なる傾向を確認した.高悪性度膀胱癌細胞で、CAR発現が低下しているとの報告もあり、複数の膀胱癌細胞株を含めた継代ヒト癌細胞(前立腺、腎、結腸)におけるCAR発現量を、RT-PCRおよびFACSにより定量化し、さらにアデノウイルスの感染効率とこれらの相関につき検討した.CAR発現量およびアデノウイルス感染効率ともに、細胞の培養状況の影響を受け、安定した相関傾向は確認されなかった.つまり、培養細胞密度、継代数などの条件の差に依存して、CAR発現量、ウイルス感染効率が異なることが確認された.そこで、CARの発現に依存しないアデノウイルスベクター(Ad5/F35)による、膀胱癌細胞への感染効率増強に関する検討を行った.Ad5/F35のレセプターであるCD46の発現を、複数のヒト膀胱癌細胞株で検討したところ、CARと異なり高悪性度膀胱癌細胞で高発現していることが確認された.Ad5/F35の膀胱癌細胞の感染効率は、CAR発現減弱を認める細胞においても良好な感染性を示し、CAR発現を認めていないと報告されている膀胱癌細胞T-24においても極めて良好な感染性を認めた.
|
