| 研究課題/領域番号 |
14571535
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
産婦人科学
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| 研究機関 | 秋田大学 |
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研究代表者 |
福田 淳 秋田大学, 医学部, 講師 (80250877)
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| 研究分担者 |
河村 和弘 秋田大学, 医学部, 助手 (10344756)
田中 俊誠 秋田大学, 医学部, 教授 (40002216)
熊谷 仁 秋田大学, 医学部, 医員(臨床) (60333936)
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| 研究期間 (年度) |
2002 – 2003
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| 研究課題ステータス |
完了 (2003年度)
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| 配分額 *注記 |
3,400千円 (直接経費: 3,400千円)
2003年度: 2,100千円 (直接経費: 2,100千円)
2002年度: 1,300千円 (直接経費: 1,300千円)
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| キーワード | 受精卵 / アポトーシス / サバイビン / カスペース / ラット / アンチセンス |
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| 研究概要 |
Survivinの受精卵におけるアポトーシス誘導について。
Survivin mRNAをアンチセンスオリゴにて抑制をおこなった系で、72時間体外培養胚の形態および核の変化を検討したところ、アンチセンス群では桑実胚から初期胚盤胞で発育が停止し、フラグメンテーションが認められた。マウスの2細胞期胚を72時間体外培養し、コントロール、アンチセンス、ミスセンスの各群のアポトーシス発生率をcaspase-3アッセイを用いて検討したところ、アンチセンス群において優位にアポトーシスが誘導された。このアポトーシスの発生は、caspase-1,6,8インヒビターでは抑制されなかったが、caspase-3,9インヒビターを添加した群では有意にアポトーシスが抑制された。従って、survivinは着床前期胚においてcaspase-3,9を抑制していることが示唆された。
Survivinの細胞周期における発現について
胚1個のsurvivin mRNAを定量するために、one step real time RT-PCR法を開発した。この方法によるsurvivin mRNA量の解析ではGVを有する卵子に最も発現量が高く、減数分裂、受精後に漸減し、2細胞期で最も低下した。その後、8細胞期まではその発現量は変化なく、桑実胚以降、漸増した。桑実胚に対して、微小管重合阻害をしめすnocodazoleを添加してG2/M期で停止させた群と、contol群を比較検討した。その結果有意に(2倍)nocodazole群で発現量が増加した。このことから、survivinは細胞分裂期に増加し、細胞分裂機構に重要な機能を持っているものと推察された。
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