| 研究課題/領域番号 |
14571594
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
産婦人科学
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| 研究機関 | 兵庫医科大学 |
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研究代表者 |
霞 弘之 兵庫医科大学, 医学部, 助手 (00289068)
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| 研究分担者 |
小森 慎二 兵庫医科大学, 医学部, 助教授 (60195865)
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| 研究期間 (年度) |
2002 – 2003
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| 研究課題ステータス |
完了 (2003年度)
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| 配分額 *注記 |
3,400千円 (直接経費: 3,400千円)
2003年度: 1,300千円 (直接経費: 1,300千円)
2002年度: 2,100千円 (直接経費: 2,100千円)
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| キーワード | アンドロゲン / アンドロゲンレセプター / transition protein / CAG repeat / homeodomain / 精子形成 / 造精機能 / Transition protein / 染色体構造蛋白 / androgen receptor / transition protein 1 / glutamine repeat |
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| 研究概要 |
アンドロゲン(A)は精巣内に多量に存在し、性分化、男性機能の保持、造精機能に深く関与している。一般にAは、アンドロゲンレセプター(AR)を介して標的遺伝子に作用する。Aは、精巣では一般に精細管に存在するSertoli cellに作用すると言われているが、ヒトの精巣のgerm cellでは、ARが発現するという報告もあり、Aの精巣での作用機序については未だ明らかでない。本研究では、主としてARを介したAの精子形成過程への影響について検討した。
まず、無精子症及び乏精子症の患者136名のAR遣伝子の点突然変異とExon AのCAG repeat数について検討した。その結果、造精機能障害患者ではARの点突然変異は同定されなかった。また、乏精子症の患者117名においてはCAG repeat数が15以下の症例を9例認めたが、正常男性では認められなかった。
次にAのgerm cellでの作用をみるために、精子のpackingに関係するtransition protein(TP)の発現への影響について検討した。その結果、TP1及びTP2の5'上流領域を用いた発現実験にて、ARのCAG repeat数が22(wild type)の場合は、DHT添加によりluciferase活性の上昇が認められた。一方、ARのCAG repeat数が43,15,12の場合は、DHT添加してもluciferase活性の上昇が認められなかった。さらにそれらの発現に関与する領域をGel mobility shift assayにて検討したところ、TP1では-754--471bpの領域がTP2では-1218--858bpの領域が関与していることが明らかになった。TP1に関しては、抗ヒトAR抗体によりsupershiftは認められなかったのでA-AR complexが直接作用しないことが判明したが、TP2ではsupershiftが認められたので、直接作用することが判明した。さらに、この領域をfootprinting法にて詳細に検討したところ、TP1ではhomeodomainであるdeformed(Dfd)が結合するDfd motifが存在することが明らかとなった。一方、TP2では3つの結合領域が明らかとなり、それらの中にandrogen responsive elementに類似した配列が認められた。
以上のことより、造精機能障害患者におけるARの突然変異は稀であると考えられたが、ARのCAG repeat数の減少と造精機能障害には関連があることが示唆された。Aは精巣において、germ cellではTP1とTP2の発現に関与し造精機能障害には関連があることが示唆された。結果としてAは精巣にてgerm cellに作用して精子形成過程に関与していることが判明した。
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