| 研究課題/領域番号 |
14571796
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
病態科学系歯学(含放射線系歯学)
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| 研究機関 | 鹿児島大学 |
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研究代表者 |
末永 重明 鹿児島大学, 医学部・歯学部附属病院, 講師 (00136889)
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| 研究分担者 |
犬童 寛子 鹿児島大学, 大学院・歯学総合研究科, 助手 (00301391)
富田 和男 鹿児島大学, 大学院・歯学総合研究科, 助手 (60347094)
川床 正剛 鹿児島大学, 大学院・歯学総合研究科, 助手 (40343363)
馬嶋 秀行 鹿児島大学, 大学院・歯学総合研究科, 教授 (60165701)
川畑 義裕 鹿児島大学, 医学部・歯学部附属病院, 助手 (70274842)
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| 研究期間 (年度) |
2002 – 2003
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| 研究課題ステータス |
完了 (2003年度)
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| 配分額 *注記 |
3,000千円 (直接経費: 3,000千円)
2003年度: 700千円 (直接経費: 700千円)
2002年度: 2,300千円 (直接経費: 2,300千円)
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| キーワード | 慢性関節リウマチ / エストロゲン / エストロゲンレセプター / 活性酸素 / NO / 過酸化脂質 / アポトーシス / iNOS mRNA / NOS mRNA / 慢性リウマチ性関節炎 / 蛍光バイオイメージング法 |
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| 研究概要 |
慢性関節リウマチの滑膜細胞におけるエストロゲンレセプターの発現量を定量的に評価し、細胞内の活性酸素(ROS)産生、NO産生、過酸化脂質反応およびアポトーシスに対するエストロゲンの効果について検討した。RA患者の膝関節から摘出した新鮮滑膜組織8症例を用い、蛍光免疫組織染色およびウェスタンブロット法にてエストロゲンレセプターαの発現の多い2症例と発現の少ない2症例を選択した。これらの滑膜細胞にエストロゲンによる処理を行い、サイトカイン(IL-1β,IFN-γ,TNF-α)刺激ならびに無刺激下で培養した。細胞内のROS産生はHPF蛍光試薬を用い、NO産生はDAF蛍光試薬を用いてレーザー顕微鏡で観察を行った。過酸化脂質はHNE染色法にて、またアポトーシスはHoechst 33342染色法にて検出した。3個以上の核断片化をアポトーシスと判定した。NOS mRNAの発現量は、定量PCR法で解析を行った。
エストロゲンレセプター発現の多い滑膜細胞では、エストロゲン処理とサイトカイン刺激により、ROS産生、NO産生および過酸化脂質の発現は有意に抑制され(P<.01)、またアポトーシスの割合も有意に減少した(P<.05)定量PCR法の解析結果から、NO産生が抑制されたのは、iNOS mRNA発現が抑制されたためであることが確認された。エストロゲンレセプター発現の少ない滑膜細胞では、エストロゲンによる効果は本質的に認められなかった。
結論として、エストロゲンはROSやNO産生および過酸化脂質の発現を抑制することにより、細胞死に対する予防効果に重要な役割を果たしていることが示唆された。
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