頭頸部癌細胞への正常P53遺伝子導入によるテロメラーゼ活性抑制の治療学的意義

• 研究課題/領域番号: 14571920
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 外科系歯学
• 研究機関: 神奈川歯科大学
• 研究代表者: 笹倉 裕一 神奈川歯科大学, 歯学部, 助教授 (80121002)
• 研究分担者: 三好 代志子 神奈川歯科大学, 歯学部, 講師 (70288075) ; 李 宇錫 神奈川歯科大学, 歯学部, 助手 (90288085) ; 大見 寧 神奈川歯科大学, 歯学部, 助手 (10318892)
• 研究期間 (年度): 2002 – 2004
• 研究課題ステータス: 完了 (2004年度)
• 配分額: 3,500千円 (直接経費: 3,500千円); 2004年度: 900千円 (直接経費: 900千円); 2003年度: 1,200千円 (直接経費: 1,200千円); 2002年度: 1,400千円 (直接経費: 1,400千円)
• キーワード: テロメラーゼ / hTERT / p53 / 頭頸部扁平上皮癌

研究概要

テトラサイクリン刺激による導入遺伝子プロモーターの活性化システムを用いた正常p53遺伝子の頭頸部扁平上皮癌(HNSCC)細胞のテロメラーゼに関する評価
1.テロメラーゼ活性の変化
リポフェクチン法により正常p53遺伝子導入をした細胞群のうちTCで24時間処理した細胞群はHNSCC-2pならびにTc処理しなかったHNSCC-2wtに比べ,テロメラーゼ活性の低下を示した.正常p53遺伝子導入処理後,TC処理をしなかった細胞群はHNSCC-2pと同程度のテロメラーゼ活性を示し,活性の低下を認めなかった.TC処理のHNSCC-2nwtはTC処理のHNSCC-2pにくらべテロメラーゼ活性の低下を示さなかった.
2.RT-PCRによるhTERT mRNAの発現の分析
正常p53遺伝子導入をした細胞群のうちTC処理細胞群は,HNSCC-2pならびにTC処理しなかったHNSCC-2wtにくらべ著明にhTERT mRNAの発現が低下した.
3.Western blottingによるhTERT蛋白の発現の分析
リポフェクチン法により正常p53遺伝子導入をした細胞群のうちTC処理群は,HNSCC-2pならびにTc処理しなかったHNSCC-2wtに比べ,hTERT蛋白の発現は低下した.一方,正常p53遺伝子導入し,TC処理をしなかった群はHNSCC-2pに比べほとんどhTERT蛋白の発現の低下を示さなかった.同様にTC処理をしてもHNSCC-2nwtはHNSCC-2pにくらべhTERT蛋白の発現の低下を示さなかった.

研究成果

• [雑誌論文] Telomere length, telomerase activity and expression of human telomerase reverse transcriptase (hTERT) mRNA in head and neck squamous cellcarcinoma (2004)
  • 著者名/発表者名: Yuuichi SASAKURA, Yoshiko MIYOSHI, Yoshihisa WATANABE
  • 雑誌名: The bulletin of Kanagawa Dental College 32 ページ: 69-73
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Determination of therapeutic direction due to identification of telomerase activity (TA) and hTERT MRNA expression in a case suspected malignant tumour (2004)
  • 著者名/発表者名: Yuuichi SASAKURA, Shinobu TAKAGI, Ushyaku LEE, Satoshi SHIMIZU, Eiro KUBOTA, Nobuhisa KUBOTA
  • 雑誌名: Journal of Cranio-Maxillofacial Surgery 32 ページ: 270-271
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] p53遺伝子導入による癌細胞telomerase活性の変化 (2004)
  • 著者名/発表者名: 笹倉裕一, 堀眞由美, 三好代志子, 渡邊是久
  • 雑誌名: 日本口腔外科学会雑誌 50 ページ: 899-900
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Telomere length, telomerase activity and expression of human telomerase reverse transcriptase (hTERT) mRNA in head and neck squamous cell carcinoma (2004)
  • 著者名/発表者名: Yuuichi SASAKURA, Yoshiko MIYOSHI, Yoshihisa WATANABE
  • 雑誌名: The bulletin of Kanagawa Dental College 32 ページ: 69-73
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Telomere length, telomerase activity and expression of human telomerase reverse transcriptase (hTERT) mRNA in head and neck squamous cell carcinoma (2004)
  • 著者名/発表者名: Sasakura, Y., Miyoshi, Y., Watanabe, Y.
  • 雑誌名: The Bulletin of Kanagawa Dental College 32・1 ページ: 69-73
• [雑誌論文] Determination of therapeutic direction due to identification of telomerase activity (TA) and hTERT mRNA expression in a case suspected malignant tumour (2004)
  • 著者名/発表者名: Sasakura, Y., Takagi, S., Lee, U., Shimizu, S., Kubota, E., Kubota, N.
  • 雑誌名: Journal of cranio-maxillofacial surgery 32・Suppl.1 ページ: 270-271
• [文献書誌] Sasakura, Y., Miyoshi, Y., Watanabe, Y.: "Telomerase length, telomerase activity and expression of human telomerase reverse transcriptase (hTERT) mRNA in head and neck squamouse cell carcinoma"The Bulletin of Kanagawa Dental College. 32・1(未定). (2004)