| 研究課題/領域番号 |
14571938
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
矯正・小児・社会系歯学
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| 研究機関 | 秋田大学 |
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研究代表者 |
三好 康太郎 秋田大学, 医学部, 助手 (40312714)
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| 研究分担者 |
宮本 洋二 秋田大学, 医学部, 教授 (20200214)
福田 雅幸 秋田大学, 医学部, 講師 (20272049)
永井 宏和 秋田大学, 医学部, 助手 (50282190)
五十嵐 薫 東北大学, 大学院・歯学研究科, 教授 (70202851)
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| 研究期間 (年度) |
2002 – 2004
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| 研究課題ステータス |
完了 (2004年度)
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| 配分額 *注記 |
3,500千円 (直接経費: 3,500千円)
2004年度: 900千円 (直接経費: 900千円)
2003年度: 1,100千円 (直接経費: 1,100千円)
2002年度: 1,500千円 (直接経費: 1,500千円)
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| キーワード | 末分化間葉系細胞 / 骨芽細胞 / 機械的刺激 / DNAマイクロアレイ法 / 遺伝子発現 / 未分化間葉系細胞 / マイクロアレイ法 / 未分化間葉系幹細胞 / cDNAマイクロアレイ / 骨髄細胞 / メカニカルストレス / マイクロアレイ |
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| 研究概要 |
未分化間葉系細胞から骨芽細胞に分化・成熟する過程には、様々な遺伝子が関与している。特にCbfa1は、骨芽細胞分化のマスター遺伝子として下流のマーカー遺伝子の発現を調整していることが報告されている。われわれは、ヒト未分化間葉系細胞の骨芽細胞への分化に機械的伸展刺激がおよぼす影響を調べるため、骨芽細胞分化のマーカー遺伝子の発現について検討した。未分化間葉系細胞から骨芽細胞への分化誘導過程で、機械的刺激を負荷する時期・時間により、骨芽細胞のマーカーであるALP活性・Type I Collagen・Osteocalcin・Osteonectin・Cbfa1・BMP-2等のmRNAの発現の変化を比較検討した。骨芽細胞への分化誘導開始24時間後に、伸展刺激を1、3、6、12、24時間負荷した後、Total RNAを回収し、RT-PCR法により骨芽細胞分化マーカーのmRNA発現について検討した。機械的刺激の時間に依存して、ALP活性・Type I Collagen・Cbfa1のmRNA発現が上昇することを明らかにした。
また、
未分化間葉系幹細胞から骨芽細胞に分化誘導を行った細胞、分化誘導中に機械的刺激を負荷した細胞、分化誘導を行わずに機械的刺激のみを負荷した細胞からRNAを抽出し、cDNAマイクロアレイ法を用いて遺伝子の発現の変化を検討し、アップレギュレーション、ダウンレギュレーションする遺伝子を確認した。機械的刺激に反応して発現がダウンレギュレーションする4遺伝子と機械的刺激により骨芽細胞への分化を促進していると考えられる6遺伝子を同定した。今後、変化のみられた遺伝子について、未分化間葉系幹細胞への遺伝子導入実験を行い、その機能と役割を解明する予定である。
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