| 研究課題/領域番号 |
14572044
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
物理系薬学
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| 研究機関 | 独立行政法人放射線医学総合研究所 |
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研究代表者 |
上田 順市 放射線医学総合研究所, 放射線安全研究センター・レドックス制御研究グループ, チームリーダー (90160168)
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| 研究分担者 |
竹下 啓蔵 放射線医学総合研究所, 放射線安全研究センター・レドックス制御研究グループ, 主任研究員 (70175438)
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| 研究期間 (年度) |
2002 – 2003
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| 研究課題ステータス |
完了 (2003年度)
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| 配分額 *注記 |
3,500千円 (直接経費: 3,500千円)
2003年度: 1,000千円 (直接経費: 1,000千円)
2002年度: 2,500千円 (直接経費: 2,500千円)
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| キーワード | 過酸化水素 / フリーラジカル / in vivo ESR / in vitro ESR / サーフェイスコイル型共振器 / 活性酸素 / ESR |
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| 研究概要 |
生体内の過酸化水素(H_2O_2)の定量を目的として磁気共鳴法を応用した非侵襲的な新しいH_2O_2の定量法を開発することを目的に実験を行い、以下の結果を得た。
初めに、ABTSカチオンラジカルの生成量が最大となる[ABTS]:[HRP]の比を求めた。その濃度比で種々の濃度のH_2O_2を混合して得られるABTSカチオンラジカルのシグナルをESR装置を用いて測定し、H_2O_2の濃度に対してESRシグナル強度をプロットして検量線を作成した。次に、ABTSとHRPを包含したコレステロール-ジミリストイルレシチン-ステアリルアミン(1:1:0.1)のリポソームを調整した。さらに、生体内で予想される過酸化水素発生系で本方法を用いてH_2O_2を定量できるか否かを調べた。マウスにLPSを投与して好中球を遊走させた後に、SODやアスコルビン酸オキシダーゼ含有の"ABTS-HRP"液を腹腔内投与してマウス体内にABTSカチオンラジカルを生成させ、これをサーフェイスコイル型共振器を用いたL-バンドESR装置により測定を試みたが、シグナルを検出することは出来なかった。In vitroで種々の濃度のASBTSカチオンラジカル(種々の濃度のH_2O_2とABTS-HRP液を混ぜることにより調整したもの)をマウス体内に投与して、上記の方法でシグナル強度を測定し、測定方法での検出限界濃度を求めた。
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