| 研究課題/領域番号 |
14572093
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
医薬分子機能学
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| 研究機関 | 岡山大学 |
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研究代表者 |
根岸 和雄 岡山大学, 自然生命科学研究支援センター, 助教授 (70116490)
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| 研究分担者 |
大塚 智恵 岡山大学, 自然生命科学研究支援センター, 助手 (60253001)
豊田 哲也 久留米大学, 医学部, 教授 (00197972)
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| 研究期間 (年度) |
2002 – 2003
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| 研究課題ステータス |
完了 (2003年度)
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| 配分額 *注記 |
4,000千円 (直接経費: 4,000千円)
2003年度: 1,400千円 (直接経費: 1,400千円)
2002年度: 2,600千円 (直接経費: 2,600千円)
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| キーワード | ヌクレオチドアナログ / エラーカタストロフィ / 複製エラー / 両義的塩基対形成 / RNAウイルス / レトロウイルス / RNAポリメラーゼ / HPLC / PTP / KTP / エラーカタストロフィー / ポリオウイルス / C型肝炎ウイルス / supF / 両義的な取組み |
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| 研究概要 |
1.ヌクレオシドアナログ、リボヌクレオチド(rNTP)アナログの合成。N^4-ヒドロキシシチジントリリン酸、N^4-メトキシシチジントリリン酸、並びにN^4-メチルシチジントリリン酸の合成法を確立し、信頼できる標品を得た。これを用いて、T3ファージポリメラーゼを用いた取り込みを調べた。その結果、ヒドロキシシチジンとメトキシシチジンはウリジンの代わりにRNA合成系に加えた時にRNA合成が起こることがわかった。一方、メチルシチジンはグアノシンの相手としてのみRNA鎖の伸長を促進する。生成したRNAを酵素分解してHPLCで分析し、確かにこれらアナログが取り込まれていることを証明した。
2.ヒトRNAポリメラーゼとHIV逆転写酵素と用いたモデル系の研究。N^4-ヒドロキシシチジントリリン酸、N^4-メトキシシチジントリリン酸、並びにN^4-メチルシチジントリリン酸が取り込まれたRNAを調製し、HIV逆転写酵素のモデルとして、AMV逆転写酵素を用いて逆転写されたDNAを調製し、PCR後DNAシークエンサーにより解析した。その結果、N^4-ヒドロキシシチジンが逆転写の際高い頻度でエラーを起こすことを見いだした。
3.種々のアナログの抗エイズウイルス効果。有望な新規アナログを見いだしたが、現在さらに検討中である。
4.RNAウイルス、およびそのRNAポリメラーゼに対する作用。ポリオウイルスとB型肝炎ウイルス由来ポリメラーゼによるトリリン酸体の取り込みを解析した。
5.NTP-キトサン複合体の調製法の研究。トリリン酸体を固定化した場合の安定性を高めるための更なる方策が必要であることが分かった。
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