精巣における内分泌攪乱物質の標的タンパク質の探索

• 研究課題/領域番号: 14572107
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 環境系薬学
• 研究機関: 富山医科薬科大学
• 研究代表者: 田渕 圭章 富山医科薬科大学, 生命科学実験センター, 助手 (20322109)
• 研究期間 (年度): 2002 – 2003
• 研究課題ステータス: 完了 (2003年度)
• 配分額: 3,300千円 (直接経費: 3,300千円); 2003年度: 1,500千円 (直接経費: 1,500千円); 2002年度: 1,800千円 (直接経費: 1,800千円)
• キーワード: トランスジェニック動物 / 不死化細胞株 / 温度感受性癌遺伝子 / simian virus 40 大型T抗原 / マイクロアレイ / 遺伝子発現解析 / 内分泌攪乱物質 / ビスフェノールA / 精巣セルトリ細胞 / cDNAマイクロアレイ / 小胞体ストレス / chop / GPR78 / セルトリ細胞 / DNAマイクロアレイ

研究概要

温度感受性simian virus 40(tsSV40)大型T抗原遺伝子導入トランスジェニック(TG)マウスは,特異的機能を保持した不死化細胞株樹立に非常に有用な動物で,これまでに多数の臓器から数々の機能を保持した有用な細胞株が樹立された.また,同遺伝子導入TGラットも特異的機能を保持した不死化細胞株樹立に有用であることが示されている.今回我々は,tsSV40大型T抗原遺伝子導入TGマウスとラットから機能を保持した精巣セルトリ細胞株TTE3,RTS3-3と精巣ライディッヒ細胞株TTE1,種々の胃粘膜上皮細胞株樹立に成功した.
cDNAマイクロアレイは,スライドガラス上に多数のcDNAを高密度にスポットしたもので,網羅的に遺伝子発現を解析できることからポストゲノムシーケンス時代における非常に重要な技術として注目されている.我々は,この技術を利用して,細胞の機能変化によって発現変動する遺伝子を数多く明らかにした.
ビスフェノールA(BPA)の精巣セルトリ細胞への暴露によりCa^<2+>-ATPase阻害作用に基づく細胞内カルシウム濃度の一過性の上昇に続いて小胞体ストレスが誘導され,時間依存的に細胞障害が惹起された.約2,000種類の遺伝子の発現を検討した結果,BPAにより1/2以下に発現量が減少する遺伝子が3種類,2倍以上に増加する遺伝子が39種類同定された.これらの遺伝子は,6,12または24時間に発現量がピークになる3グループに分けられ,各々c-mycとfra-2,オルニチンデカルボキシラーゼ(ODC)およびchopの発現変動が顕著であった.BPAはGRP78,HSP90,chop,酸化ストレス誘導タンパク質,ODC等のストレス関連遺伝子の発現量を顕著に増加させた.

研究成果

• [文献書誌] Tabuchi et al.(3 authors): "DNA microarray analysis of differentially expressed genes responsive to bisphenol A an alkylphenol derivative, in an in vitro mouse Sertoli cell model"Jpn.J.Pharmacol.. 89. 413-416 (2002)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Tabuchi et al.(7 authors): "Development of the conditionally immortalized testicular Sertoli cell line TTE3 expressing sertoli cell-specific genes from mice transgenic for temperature-sensitive simian virus 40 large T-antigen gene"J.Urol.. 167. 1538-1545 (2002)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Tabuchi et al.(5 authors): "Identification of genes responsive to sodium butyrate in mouse colonic cells"Biochem.Biophys.Res.Commun.. 293. 1287-1294 (2002)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Tabuchi Y.et al.(9 authors): "New gastric epithelial cell lines from mice transgenic for temperature-sensitive simian virus 40 large T-antigen gene exhibit distinct types of cell differentiation"Digestion. 67. 71-81 (2003)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Tabuchi, Y., Kondo, T.: "cDNA microarray analysis reveals chop-10 plays a key role in Sertoli cell death induced by bisphenol A"Biochem.Biophys.Res.Commun.. 305. 54-61 (2003)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Tabuchi Y.et al.(4 authors): "Establishment of the conditionally immortalized testicular Sertoli cell line RTS3-3 from transgenic rats harboring temperature-sensitive simian virus 40 large T-antigen gene"Cell Struct Funct.. 28. 87-95 (2003)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Tabuchi et al.(3 authors): "DNA microarray analysis of differentially expressed genes responsive to bisphenol A an alkylphenol derivative, in an in vitro mouse Sertoli cell model"Jpn.J.Pharmacol.. 89. 413-416 (2002)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Tabuchi et al.(7 authors): "Development of the conditionally immortalized testicular Sertoli cell line TTE3 expressing sertoli cell-specific genes from mice transgenic for temperature-sensitive simian virus 40 large T-antigen gene"J.Urol.. 167. 1538-1545 (2002)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Tabuchi et al.(5 authors): "Identification of genes responsive to sodium butyrate in mouse colonic cells"Biochem.Biophys.Res.Commun.. 293. 1287-1294 (2002)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Tabuchi Y.et al.(9 authors): "New gastric epithelial cell lines from mice transgenic for temperature-sensitive simian virus 40 large Tantigen gene exhibit distinct types of cell differentiation"Digestion. 67. 71-81 (2003)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Tabuchi, Y., Kondo, T.: "cDNA microarray analysis reveals chop-10 plays a key role in Sertoli cell death induced by bisphenol A"Biochem.Biophys.Res.Commun.. 305. 54-61 (2003)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Tabuchi Y.et al.(4 authors): "Establishment of the conditionally immortalized testicular Sertoli cell line RTS3-3 from transgenic rats harboring temperature-sensitive simian virus 40 large T-antigen gene"Cell Struct.Funct.. 28. 87-95 (2003)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Tabuchi Y.et al.(9 authors): "New gastric epithelial cell lines from mice tranagenic for temperature-sensitive simian virus 40 large T-antigen gene exhibit distinct types of cell differentiation"Digestion. 67. 71-81 (2003)
• [文献書誌] Tabuchi, Y., Kondo, T.: "cDNA microarray analysis reveals chop-10 plays a key role in Sertoli cell death induced by bisphenol A"Biochem.Biophys.Res.Commun.. 305. 54-61 (2003)
• [文献書誌] Tabuchi Y.et al.(4 authors): "Establishment of the conditionally immortalized testicular Sertoli cell line RTS3-3 from transgenic rats harboring temperature-sensitive simian virus 40 large T-antigen gene"Cell Struct.Funct.. 28. 87-95 (2003)
• [文献書誌] Tabuchi, Y.et al.(3 authors): "DNA microarray analysis of differentially expressed genes responsive to bisphenol A, an alkylphenol derivative, in an in vitro mouse Sertoli cell model"Jpn. J. Pharmacol.. 89. 413-416 (2002)
• [文献書誌] Tabuchi, Y.et al.(9 authors): "Development and characterization of conditionally immortalized gastric epithelial cell lines from transgenic rats harboring temperature-sensitive simian virus 40 large T-antigen gene"Cell Struct. Funct.. 27. 71-79 (2002)
• [文献書誌] Tabuchi, Y.et al.(5 authors): "Identification of genes responsive to sodium butyrate in mouse colonic cells"Biochem Biophys. Res. Commun.. 293. 1287-1294 (2002)