| 研究課題/領域番号 |
14580742
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
神経化学・神経薬理学
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| 研究機関 | 大阪大学 |
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研究代表者 |
船越 洋 大阪大学, 医学系研究科, 助教授 (40273685)
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| 研究分担者 |
中村 敏一 大阪大学, 医学系研究科, 教授 (00049397)
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| 研究期間 (年度) |
2002 – 2003
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| 研究課題ステータス |
完了 (2003年度)
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| 配分額 *注記 |
4,100千円 (直接経費: 4,100千円)
2003年度: 1,600千円 (直接経費: 1,600千円)
2002年度: 2,500千円 (直接経費: 2,500千円)
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| キーワード | HGF / c-Met / 神経変性疾患 / 筋萎縮性側索硬化症 / パーキンソン病 / トランスジェニックマウス / 遺伝子治療 / 筋萎縮性側索硬化症(ALS) / 肝細胞増殖因子(HGF) / HGF-like protein(HLP) / Ron / ミクログリア / 神経栄養因子 |
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| 研究概要 |
本研究では、私達が神経栄養活性をもつことを初めて明らかにしたHGFおよびHLPの神経系における機能解析を行った。また、HGF受容体(c-Met)のファミリー分子のスクリーニング過程でクローニングされt新規LIMキナーゼ蛋白質(LIMKinases)のノックアウトマウスを作成し、LIMK2の神経系における機能の一部を明らかとした。
(a)ALSにおける機能解析とその適用研究:HGFはこれまでの治療実験報告に比べ発症時期を遅延させ寿命を大幅に延長することを報告したが、durationに対する効果は不明であった。ALSを発症するモデルトランスジェニックマウス(ALS-Tg)と神経特異的HGF発現トランスジェニックマウス(HGF-Tg)を交配しダブルトランスジェニックマウスを作成することで、HGFのALSに対する機能解析を行った結果、発症から死亡までの時間(duration)決定に最も密接に関連するとされるactive caspase-9の運動ニューロンへの誘導をHGFが抑制できることが明らかとなった。今回の結果からHGFを発症後も効率良く発現させ続けられれば、durationをも延長し寿命をさらに延長できる可能性が示唆された。現在この効果についてはHGF蛋白質および長期HGF遺伝子発現ウイルスベクターを用いて解析中である。
(b)薬剤誘導性パーキンソン病におけるHGF/c-Metの解析:HGFおよびc-Metがパーキンソン病で重要な細胞群で発現制御を受けることを明ちかとした。
(c)他の神経変性疾患に対するHGFの機能解析:神経変性疾患モデルマウスとHGF-Tgとのダブルトランスジェニックマウスの作成と、HGF蛋白質もしくはHGF発現ウィルスベクターを用いてHGFの機能解析およびその作用分子機構の解析を進めている。
(d)HGFとprostacyclin synthaseの遺伝子を導入することで糖尿病性neuropathyモデルにおける血管新生を促進し、neuropathyを改善すること、また、カナマイシンによる聴覚障害を抑制することを明らかとした。
(e)HLPの機能解析:HLPのグリア細胞における各種サイトカイン発現制御におよぼす効果をin vitroで解析した。その結果、HGFは従来報告した神経細胞に対する直接神経栄養作用や細胞遊送促進作用に加え、グリアにおけるサイトカイ発現調節を介し神経系のリモデリングに寄与すると示唆された。
LIMKinase2 KO miceを作成し解析を進めた結果、LIMK2の内のLINK2bが神経系に主に存在し、細胞内でERに局在することで神経系に対するストレスに応答し神経細胞死を制御する機能をもつことを明らかとした。
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