| 研究概要 |
脊髄前角細胞で外来遺伝子であるβ-ガラクトシダーゼを長期的に発現できる弱毒単純ヘルペスウイルス(HSV)ベクター(βH)を用いて、神経保護作用のあるBDNF(神経栄養因子)、NGF(神経成長因子)遺伝子を外来遺伝子として本ベクターに挿入し、運動神経機能修飾に関して検討してきた。
これまで脊髄前角細胞への遺伝子導入報として解析してきたラットの腓腹筋接種モデルを用いて、中枢神経系に導入されたβHベクターのウイルス抗原の分布と感染性ウイルス粒子形成の可能性を脊髄と脊髄後根神経節で比較検討した。BHをラットの右腓腹筋に接種後10ヶ月後でも両側脊髄前角神経細胞にβ-gal活性、β-gal mRNA,ウイルス蛋白質gC, TKとそれらのmRNAが検出できた。しかし、脊髄には感染性ウイルスが認められなかった。長期での脊髄後根神経節でのウイルス遺伝子発現が認められないことから、脊髄後根神経節とは異なる脊髄での発現様相が明らかになった。一方、接種後3ヶ月では両足腓腹筋にb-gal活性が認められたが、10ヶ月後では検出できなかった。いずれの場合にも組織学的に異常な所見は認められなかった。さらに、接種後7日、3ヶ月目の両側のラット坐骨神経線維の電気刺激閾値、坐骨神経刺激による腓腹筋の刺激閾値にβH1接種の影響が認められなかった。したがって、脊髄でβ-gal活性,βgal mRNAあるいはウイルスmRNA,抗原が、腓腹筋でβ-gal活性が長期に渡って認められたにもかかわらず、神経、筋での電気生理学的機能に影響が認められなかったことよりβHの神経、筋での発現により、脊髄前角細胞での機能の修飾していないことが確認できた。以上のように、HSVは、神経節などと異なった潜伏感染様式を取ることと遺伝子発現の特徴を明らかにした。
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