冠動脈および大動脈の血管内皮に発現する新規接着分子の解析

• 研究課題/領域番号: 14657240
• 研究種目: 萌芽研究
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 血液内科学
• 研究機関: 東京大学
• 研究代表者: 北村 俊雄 東京大学, 医科学研究所, 教授 (20282527)
• 研究期間 (年度): 2002 – 2003
• 研究課題ステータス: 完了 (2003年度)
• 配分額: 3,200千円 (直接経費: 3,200千円); 2003年度: 1,600千円 (直接経費: 1,600千円); 2002年度: 1,600千円 (直接経費: 1,600千円)
• キーワード: シグナルシークエンストラップ / 膜蛋白質 / 血管平滑筋 / TGF-β / シグナル伝達 / TGFβ / 大動脈 / 心臓 / レセプター / シグナル

研究概要

我々のグループが開発したレトロウイルスベクターを利用したシグナルシークエンストラップ法SST-REXによりヒト心臓に発現している膜蛋白質および分泌蛋白質をスクリーニングした。
スクリーニングの結果いくつかの新規分子が得られ、そのうち特徴的なロイシンリッチリピートを有して分子に着目し遺伝子全長を単離後、機能解析を行った。バゾリンと名付けたこの分子はロイシンリッチリピートドメインを細胞外に有する典型的な1型膜タンパク質で、in situ hybridization analysisによりその発現は血管平滑筋細胞特異的であることが判明した。またバゾリンの発現は血管平滑筋細胞の分化とともに増加し、脱分化とともに減少した。細胞外ドメインに存在するロイシンリッチリピートドメインは蛋白質相互作用に関与することがよく知られており当初バゾリンが接着分子としてインテグリンなど接着分子に結合する可能性を調べたが、特異的な結合は検出されなかった。その後、バゾリンとTGF-βの相互作用を調べ、両者が直接結合することを見いだした。また下流のシグナル伝達系を調べたところ、TGF-βシグナルはバゾリンにより負に制御されることが示された。また逆にTGF-β刺激によりバゾリンの発現がラット培養血管平滑筋細胞において有意に増強されることも判明した。以上より、バゾリンは血管平滑筋細胞特異的なTGF-βシグナルの負のフィードバック調節因子であることがわかった。
現在、以下の論文を投稿中
・論文標題:Vasorin, a novel TGF- -binding protein expressed in vascular smooth muscle cells, modulates the arterial response to injury in vivo
・著者名:Y.Ikeda, Y.Imai, H.Kumagai, T.Nosaka, Y.Morikawa, T.Hisaoka, I.Manabe, K.Maemura, T.Nakaoka, T.Imamura, K.Miyazono, I.Komuro, R.Nagai, and T.Kitamura

研究成果

• [文献書誌] Tulin, E.E.: "Genetic approach and phenotype-based complementation screening for identification of stromal cell-derived proteins involved in cell proliferation"Exp.Cell Res.. 272. 23-31 (2002)
• [文献書誌] Tulin, E.E.: "Inhibition of human endothelial cell proliferation by ShIF, a vacuolar H+-ATPAse-like protein"Oncogene. 21. 844-848 (2002)
• [文献書誌] Nosaka, T.: "Pim-1 expression is sufficient to induce cytokine independence in murin hematopoietic cells but is dispensable for BCR-ABI-mediated transformation"Exp.Hematol.. 30. 697-702 (2002)
• [文献書誌] Perez, O.D.: "Acitivation of the PKB/AKT pathway by ICAM-2"Immunity. 16. 51-65 (2002)
• [文献書誌] Nagai, Y.: "Essential role of MD-2 in LPS responsiveness and TLR4 distribution"Nat.Immunol.. 3. 667-672 (2002)
• [文献書誌] Gugasyan, R.: "Dok-related protein negatively regulates T cell development ts RasGTPase activating protein and Nck docking sites"J.Cell Biol.. 158. 115-125 (2002)
• [文献書誌] Stoeclin, G.: "Functional cloning of BRF-1, a regulator of ARE-dependent mRNA turnover"EMBO J.. 21. 4709-4718 (2002)
• [文献書誌] Komano, H.: "A new functional screening system for the identification of DNA encoding a regulator of γ-cleavage"J.Biol.Chem.. 277. 39627-39633 (2002)
• [文献書誌] Ezoe, S.: "GATA-2 affects cytokine-dependent growth of hematopoietic cells through accumulation of p21^<WAF1> and p27^<Kip1> proteins"Blood. 100. 3512-3520 (2002)
• [文献書誌] Yujiri, T.: "MEK kinase 1 interacts with focal adhesion kinase and regulates insulin receptor substrate-1 expression"J.Biol.Chem.. (in press). (2003)
• [文献書誌] Minoshima, Y.: "Aurora B Phosphorylates MgcRacGAP and Induces RhoGAP Activity during M Phase : Identification of a RhoGAP Indispensable for Cytokinesis"Developmental Cell. (in press). (2003)
• [文献書誌] Nosaka, T.: "Dwarfism and lymphoid deficiency in mice lacking twisted gastrulation"Mol.Cell.Biol.. (in press). (2003)
• [文献書誌] Kitamura, T.: "Retrovirus-mediated gene transfer and expression cloning, powerful tools in functional genomics"Exp.Hematol.. (in press). (2003)