歯周組織幹細胞(Periodontal Stem Cell)は存在するか?

• 研究課題/領域番号: 14657487
• 研究種目: 萌芽研究
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 病態科学系歯学(含放射線系歯学)
• 研究機関: 長崎大学
• 研究代表者: 山口 朗 長崎大学, 大学院・医歯薬学総合研究科, 教授 (00142430)
• 研究分担者: 柴田 恭明 長崎大学, 大学院・医歯薬学総合研究科, 助手 (80253673) ; 塚崎 智雄 長崎大学, 大学院・医歯薬学総合研究科, 助教授 (50315230)
• 研究期間 (年度): 2002 – 2003
• 研究課題ステータス: 完了 (2003年度)
• 配分額: 3,200千円 (直接経費: 3,200千円); 2003年度: 1,600千円 (直接経費: 1,600千円); 2002年度: 1,600千円 (直接経費: 1,600千円)
• キーワード: 歯周組織 / 幹細胞 / GFP / 細胞分化 / 歯根膜細胞

研究概要

1.GFPトランスジェニックマウスの歯根膜細胞の分離と培養
GFPトランスジェニックマウスの臼歯を無菌的に抜歯し,歯根膜を有する歯根部をコラーゲンゲル内に包埋し,歯根膜細胞をコラーゲンゲル内に遊走させた。細胞が遊走後,コラゲナーゼで細胞を回収し,プラスチックディッシュ上で培養した。これらの細胞はアルカリフォスファターゼ活性陽性で,歯根膜細胞と考えられた。
現在,これらの細胞を野生型骨再生部へ移植すると、これらの細胞が骨芽細胞へ分化していることが確認でき、本研究における当初の実験系を確立することができた。
2.GFPトランスジェニックマウスの骨髄細胞の分離と歯根膜部への移植
GFPトランスジェニックマウスの骨髄細胞を採取し,プラスチックディッシュ上で培養した。ディッシュに付着した骨髄間質細胞を回収し,野生型マウスの歯根膜部へ移植したが、歯根膜部にGFP陽性細胞は確認出来なかった。これは、歯根膜部への細胞の移植法に問題があると考えられたので、現在移植法を検討中である。
3.現在までの研究で歯根膜細胞がin vivoでも骨芽細胞に分化できることを実証する実験系を確立できたが、歯根膜部以外の間葉系幹細胞の歯根膜細胞への分化能の解析を効率良く推進する実験系の確立が不十分だったので、現在、その手法をさらに検討中である。
4.ヒト歯根膜細胞を利用した実験を十分に推進することができなかった。

研究成果

• [文献書誌] Ochi K, Chen G, Ushida T, Gojo S, Segawa K, Tai H, Ueno K, Ohkawa H, Mori T, Yamaguchi A, Toyama Y, Hata J, Umezawa A: "Use of mature osteoblasts in abundance act as desired -shaped bone regeneration in combination with a modified poly DL-Lactic-co-glycolic acid (PLGA)-collagen sponge."J Cell Physiol. 194. 45-53 (2003)
• [文献書誌] Shirota T, Tashiro M, Ohno K, Yamaguchi A: "Effect of intermittent parathyroid hormone (1-34) treatment on the bone response after placement of titanium implants into the tibia of ovariectomized rats."J Oral Maxillofac Surg. 61. 471-480 (2003)
• [文献書誌] Hirata K, Tsukazaki T, Kadowaki A, Furukawa K, Shibata Y, Moriishi T, Okubo Y, Bessho K, Komori T, Mizuno A, Yamaguchi A: "Transplantation of skin fibroblasts expressing BMP-2 promotes bone repair more effectively than those expressing Runx2."BONE. 32. 502-512 (2003)
• [文献書誌] Iioka T, Furukawa K, Yamaguchi A, Shindo H, Yamashirta S, Tsukazaki T: "p300/CBP acts as a coactivator to cartilage homeoprotein-1 (Cart1), paired-like homeoprotein, through acetylation of the con served lysine residue adjacent to the homeodomain."J.Bone Miner.Res.. 18. 1419-1429 (2003)
• [文献書誌] Shindo K, Kawashima N, Sakamoto K, Yamaguchi A, Umezawa A, Takagi M, Katsube K, Suda H.: "Osteogenic differentiation, of the mesenchymal progenitor cells, Kusa is suppressed by Notch signaling."Exp Cell Res. 290. 370-380 (2003)
• [文献書誌] A.Kadowaki, T.Tsukazaki, K.Hirata, Y.Shihata, Y.Okubo, K.Bessho, T.Komori, N.Yoshida, A.Yamaguchi: "Isolation and characterization of a mesenchymal cell line that differentiates into osteoblasts in response to BMP-2 from calvariae of GFP transgenic mice"BONE. (In press). (2004)
• [文献書誌] Hirata K, Tsukazaki T, Yamaguchi A, et al.: "Transplantation of skin fibroblasts expressing BMP-2 promotes bone repair more effectively than those expressing Runx2"BONE. (In press). (2003)
• [文献書誌] Ochi K, Chen G, Yamaguchi A, Umezawa A, et al.: "Use of mature osteoblasts in abundance act as desired -shaped bone regeneration in combination with a modified poly DL-Lactic-co-glycolic acid (PLGA)-collagen sponge"J. Cell. Physiol.. (In press). (2003)
• [文献書誌] Yuasa T, Kataoka H, Kinto N, Shibata Y, Yamaguchi A, et al.: "Sonic hedgehog is involved in osteoblast differentiation by cooperating with BMP-2"J. Cell. Physiol.. 193. 225-232 (2002)
• [文献書誌] Furukawa K, Yamaguchi A, Tsukazaki T, et al.: "Functional domains of paired-like homeoprotein Cart1 and the relationship between dimerization and transcription activity"Genes Cells. 11. 1135-1147 (2002)
• [文献書誌] Shibata Y, Yamaguchi A, Koji T, et al.: "Inhibition apoptosis and possible involvement of Fas/Fas ligand to avoid apoptosis of minor salivary gland in Sjogren's syndrome"Hum. Cell. 15. 52-60 (2002)
• [文献書誌] Merida LM, Yamaguchi A, Kawai S, et al.: "Effects of vitamin D analog, 22-oxa-1,25 dihydroxyvitamin D3, on bone reconstruction by vascularized bone allograft"BONE. 30. 422-427 (2002)