| 研究課題/領域番号 |
14740465
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| 研究種目 |
若手研究(B)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 研究分野 |
動物生理・代謝
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| 研究機関 | 独立行政法人農業生物資源研究所 |
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研究代表者 |
霜田 政美 独立行政法人農業生物資源研究所, 昆虫生産工学研究グループ, 主任研究官 (80344000)
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| 研究期間 (年度) |
2002 – 2004
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| 研究課題ステータス |
完了 (2004年度)
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| 配分額 *注記 |
3,400千円 (直接経費: 3,400千円)
2004年度: 900千円 (直接経費: 900千円)
2003年度: 800千円 (直接経費: 800千円)
2002年度: 1,700千円 (直接経費: 1,700千円)
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| キーワード | ショウジョウバエ / 生物時計 / 活動リズム / GAL4 / スクリーニング / 生物リズム / 変異体 |
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| 研究概要 |
生物時計に関わる新規遺伝子を同定する目的で、遺伝子強制発現による活動リズム変異体のスクリーニングを実施した。脳の時計細胞で特異的に働くtimeless遺伝子エンハンサーを持つgal4系統とUASランダム挿入系統を交配し、子世代(F1)で遺伝子強制発現を誘導した。羽化した成虫の中から、両導入遺伝子tim-gal4-UAS-(X)をもつ個体を選抜し、赤外線センサーを組み込んだ活動測定装置を用いて、25℃、恒暗条件の下で10日間、ハエの活動の経時変化を記録した。得られたデータについてピリオドグラムやパターン解析を行い、異常表現型を示す系統を抽出した(一次スクリーニング)。UAS下流に生物時計機能障害を引き起こす原因遺伝子がある場合、活動リズム異常として検出することができる。一次スクリーニングで抽出したUAS系統について、生物時計遺伝子であるpdf遺伝子エンハンサーを持つgal4系統を用いて同様のスクリーニング実験を行い、候補遺伝子の絞り込みを行った(二次スクリーニング)。本年度は約3,000系統のスクリーニングを実施した。野生型のキイロショウジョウバエは23.5-24.0時間の周期性を持つが、これと比較して有意に周期性が変化している個体(短周期型・長周期型)や周期性を失う個体(無周期型)を約80系統選抜した。これらの系統の多くは、ゲノム上の遺伝子の翻訳開始点近傍に挿入点を持ち、責任遺伝子を推定することが可能であった。これら責任遺伝子については、ストックセンターの機能欠損変異体やRNAi系統を利用することにより、活動性や周期性を調節する作用を有するかどうか、機能同定を現在進めているところである。
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