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免疫標識法によるスギ心材ノルリグナンの分布の可視化

研究課題

研究課題/領域番号 14760111
研究種目

若手研究(B)

配分区分補助金
研究分野 林産学
研究機関名古屋大学

研究代表者

今井 貴規  名古屋大学, 大学院・生命農学研究科, 助教授 (20252281)

研究期間 (年度) 2002 – 2004
研究課題ステータス 完了 (2004年度)
配分額 *注記
3,300千円 (直接経費: 3,300千円)
2004年度: 700千円 (直接経費: 700千円)
2003年度: 1,100千円 (直接経費: 1,100千円)
2002年度: 1,500千円 (直接経費: 1,500千円)
キーワード免疫標識 / ノルリグナン / アガサレジノール / スギ / 免疫標品
研究概要

昨年度までに、アガサレジノールのような低分子化合物の免疫電子顕微鏡観察を目指すとき、その化合物が、試料調製(植物組織の固定・脱水・包埋、超薄切片の調製、および超薄切片の抗血清処理)において本来の存在場所から移動し、さらに組織外へ溶脱した可能性が示され、この問題の対策として、(1)低温下・短時間での試料調製、(2)試料の凍結乾燥、(3)試料のカフェイン溶液処理、を試みた。しかしながら、免疫標識の十分な改善は達成されなかった。本年度、「前固定免疫標識法(あらかじめ低分子量物質と抗体タンパクとを結合させる、タンパク質の固定は比較的容易である)」を試みた。この方法では、Fab断片の調製が必要となるため、その調製を行った。まず親和クロマトグラフ法によって抗アガサレジノール抗血清からIgG画分を分取し、続いてこの画分をパパインで酵素分解し、分解物から親和クロマトグラフ法によってFab断片を単離した。得られたIgG画分およびFab断片の抗体活性を免疫検定した。その結果、IgG画分は認識選択性は向上したものの、活性自体は低下し、Fab断片に関しては濃度が極めて薄く、活性も低下した。これらのIgG画分およびFab断片は、免疫組織化学的検討には不適当であり、血清の精製方法を検討する必要がある。

報告書

(3件)
  • 2004 実績報告書
  • 2003 実績報告書
  • 2002 実績報告書
  • 研究成果

    (10件)

すべて 2005 2004 その他

すべて 雑誌論文 (4件) 文献書誌 (6件)

  • [雑誌論文] Induction of the biosynthesis of agatharesinol, a norlignan, in sapwood sticks of Cryptomeria japonica under humidity-regulated circumstance2005

    • 著者名/発表者名
      T.Imai et al.
    • 雑誌名

      Journal of Wood Science (in press)

    • NAID

      10018275276

    • 関連する報告書
      2004 実績報告書
  • [雑誌論文] Localisation of ferruginol, a heartwood diterpene phenol, in Cryptomeria japonic by time-of-flight secondary ion mass spectrometry (TOF-SIMS)2005

    • 著者名/発表者名
      T.Imai et al.
    • 雑誌名

      Planta (in press)

    • 関連する報告書
      2004 実績報告書
  • [雑誌論文] Characterization of physiological functions of sapwood IV : Formation and accumulation of lignans in sapwood of Cryptomeria japonica in the withering process2005

    • 著者名/発表者名
      T.Imai et al.
    • 雑誌名

      Holzforschung (in press)

    • 関連する報告書
      2004 実績報告書
  • [雑誌論文] Detection in situ and characterization of lignin in the G-layer of tension wood fibers of Populus deltoides2004

    • 著者名/発表者名
      J.-P.Joseleau, et al.
    • 雑誌名

      Planta 219

      ページ: 338-345

    • 関連する報告書
      2004 実績報告書
  • [文献書誌] T.Nagasaki et al.: "Studies on the immunolabeling of heartwood extractives : characterization of anti-agatharesinol antiserum"J.Wood.Sci.. 50・1. 82-86 (2004)

    • 関連する報告書
      2003 実績報告書
  • [文献書誌] Y.Hosoo et al.: "Diurnal differences in the innermost surface of the S2 layer in differentiating tracheids of Cryptomeria japonica corresponding to a light-dark cycle"Holzforschung. 57. 567-573 (2003)

    • 関連する報告書
      2003 実績報告書
  • [文献書誌] T.Nagasaki: "Immunohistochemical localization of agatharesinol, a heartwood norlignan, in Cryptomeria japonica"Phytochemistry. 60. 461-466 (2002)

    • 関連する報告書
      2002 実績報告書
  • [文献書誌] Y.Hosoo: "Diurnal difference in the amount of immunogold-labeled glucomannans detected with field emission scanning electron microscopy at the innermost surface of developing secondary walls of differentiating conifer tracheids"Planta. 215. 1006-1012 (2002)

    • 関連する報告書
      2002 実績報告書
  • [文献書誌] Y.Matsushita: "Effect of chemical composition and wood properties on kraft pulping of eucalyptus"Emorging technologies of pulping and papermaking. 1. 67-73 (2002)

    • 関連する報告書
      2002 実績報告書
  • [文献書誌] 今井貴規(共著): "木質の形成-バイオマス科学への招待"海青社. 382 (2003)

    • 関連する報告書
      2002 実績報告書

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公開日: 2002-04-01   更新日: 2016-04-21  

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