研究概要 |
乳癌切除検体の癌部と非癌部から全ゲノムを抽出し、二次元電気泳動法を施行した。癌部と非癌部のスポット変化に着目し、特徴的な変化を示す十数個のスポットについてクローニングを行った。その結果、2つのスポットがGrowth factor receptor binding protein 7(Grb7)遺伝子、ならびにvoltage-dependent calcium channel遺伝子に一致した。二次元電気泳動法におけるスポット変化は、ゲノムの点突然変異、あるいはメチル化などを反映するものであり、遺伝子領域にそのような変化が起きた場合、遺伝子の発現、欠失に直接関与する可能性がある。このうち前者は文献的にも細胞内のtyrosine kinaseとの関与が知られており、上皮増殖因子に1つであるerbB2との関連も示唆されている。そこで、これらの遺伝子の発現について、乳癌細胞株MCF-7,MDA-MB231,MDA-MB435,T47D, BT20,SKBR3を対象に、RNAを抽出し、RT-PCR法で検討した。この結果、Grb7については、MCF-7,MDA-MB231,MDA-MB435では発現を認めたものの、T47D, BT20,SKBR3では発現を認めなかった。ErbB2陰性のMDA-MB-231でもGrb7の発現が認められたことから、erbB2とGrb7は必ずしも同時発現するとは限らないということが判明した。次に、voltage-dependent calcium channelについては、MCF-7,MDA-MB-435で発現を認めたものの、MDA-MB-231,T47D, BT20,SKBR3では発現を認めなかった。
|