アポトーシス誘導能を指標にした口腔癌の放射線治療感受性判定法の開発

• 研究課題/領域番号: 14771044
• 研究種目: 若手研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 病態科学系歯学(含放射線系歯学)
• 研究機関: 九州歯科大学
• 研究代表者: 森本 泰宏 九州歯科大学, 歯学部, 助教授 (00275447)
• 研究期間 (年度): 2002 – 2004
• 研究課題ステータス: 完了 (2004年度)
• 配分額: 3,000千円 (直接経費: 3,000千円); 2004年度: 1,000千円 (直接経費: 1,000千円); 2003年度: 1,000千円 (直接経費: 1,000千円); 2002年度: 1,000千円 (直接経費: 1,000千円)
• キーワード: アポトーシス / 核内蛋白 / AgNOR蛋白 / ニュークレオリン / 蛋白質脱リン酸化 / ニュークレオフォスミン / 口腔癌 / 口腔癌細胞 / PP1γ / 放射線

研究概要

アポトーシス系のシグナル伝達機構を調べる中で、オカダ酸により誘導された口腔癌アポトーシス細胞では、鍍銀染色に陽性反応を示す核小体形成帯が消失すること、アポトーシス誘導の際に、鍍銀染色に陽性反応を示す110kDa核内蛋白が消失し、80kDaの鍍銀染色に陽性反応を示す蛋白が出現することを発見した。更に、cell-free systemにおける解析の結果、110kDaの蛋白の変化はアポトーシスの実行機構であるDNA fragmentaionと密接な関係があることも発見した。しかも、ニュークレオリンモノクローナル抗体を用いたWestern blotting法及び免疫組織化学の結果から110kDa及び80kDaの蛋白は両者ともニュークレオリンであることが証明した。しかも、その経過はDNA fragmentationが惹起する時間と極めて連動性を示すものだった。上記したオカダ酸誘発アポトーシス細胞におけるニュークレオリンの分解は、抗癌剤及び紫外線照射によっても惹起されることが確認され、アポトーシス細胞における普遍的変化としてその指標となりうるものである。つまり、ニュークレオリン含む細胞内核内蛋白の変化がアポトーシス実効機構において、極めて重要な役割を示すことを意味するものである。一方、in vivoにおける実験モデルの作成を目的に、ヒト舌癌由来の細胞株(VX2)を兎の下顎歯肉に移植し下顎歯肉癌を惹起させる実験系を作成した。同腫瘍に放射線照射した際、癌組織は縮小しその一部はTUNEL法を用いた組織学的所見からアポトーシスによるものであることが判明した。また、in vitro上で生じたニュークレオリンの分解が、in vivoにおける照射後アポトーシスを誘導が認められた実験モデルから得た組織抽出液からも確認された。以上の結果は更にニュークレオリンの分解がアポトーシス誘導を簡易に表す指標になりうることを意味する。同時に放射性感受性を示す指標となりうる可能性を示唆するものである。更に、僅か6症例ではあるが患者からの口腔癌細胞株を用いた研究から培養株細胞でニュークレオリンの分解が生じやすいものは、放射線感受性が高いという結果も得ている。

研究成果

• [雑誌論文] Instability of background fat intensity suppression using fat-saturated (FS) MR imaging techniques according to region and reconstruction procedure in patients with oral cancer. (2004)
  • 著者名/発表者名: Morimoto Y. et al.
  • 雑誌名: Oral Oncol 40 ページ: 332-340
• [雑誌論文] Detection and significance of the characteristic MR signals of mandibular condyles in children. (2004)
  • 著者名/発表者名: Morimoto Y. et al.
  • 雑誌名: Oral Surg Oral Med Oral Pathol Oral Radiol Endod 97 ページ: 269-275
• [雑誌論文] Inflammatory paradental cyst (IPC) in the mandibular premolar region in children. (2004)
  • 著者名/発表者名: Morimoto Y. et al.
  • 雑誌名: Oral Surg Oral Med Oral Pathol Oral Radiol Endod 97 ページ: 286-293
• [雑誌論文] Significance of frequency-selective fat saturation T2-weighted MR images for the detection of bone marrow edema in the mandibular condyle. (2004)
  • 著者名/発表者名: Morimoto Y. et al.
  • 雑誌名: CRANIO 22 ページ: 115-123
• [雑誌論文] Clinical application of MR sialographic 3D-reconstruction imaging and MR virtual endoscopy for salivary gland duct analysis. (2004)
  • 著者名/発表者名: Morimoto Y. et al.
  • 雑誌名: J Oral Maxillofac Surg 62 ページ: 1236-1244
• [雑誌論文] Alternation of the magnetic resonance signals characteristic of mandibular condyles during growth. (2004)
  • 著者名/発表者名: Morimoto Y. et al.
  • 雑誌名: Oral Surg Oral Med Oral Pathol Oral Radiol Endod 98 ページ: 348-354
• [図書] 歯科医療現場における感染制御のためのCDCガイドライン (2004)
  • 著者名/発表者名: 小林寛伊 監訳
  • 総ページ数: 182
  • 出版者: MCメディカル出版
• [文献書誌] Kito S et al.: "Cleavage of nucleolin and argyrophilic organizer region associated proteins in apoptosis-induced cells."Biochem Biophys Res Commun. 300. 950-956 (2003)
• [文献書誌] Ohba T et al.: "Evaluation of calcified carotid artery atheromas detected by panoramic radiograph among octogenarians."Oral Surg Oral Med Oral Pathol Oral Radio. 96. 647-650 (2003)
• [文献書誌] Tanaka T et al.: "Evaluation of coronal CT findings of rare cases of isolated medial orbital wall blow-out fracture."Dentomavillofac Radiol. 32. 300-303 (2003)
• [文献書誌] Morimoto Y et al.: "Instability of backsground fat intensity suppression using FS MR imaing techniques according to region and reconstruction procedure in patients with oral caucer"Oral Oncology. (in press).
• [文献書誌] Aiko K.: "Involvement of cytochrome c and caspases in apoptotic cell death of human submandibular gland ductal cells induced by concanamycin A"Cellular Signalling. 14. 717-722 (2002)
• [文献書誌] Tanaka T.: "Utility of frequency-selective fat saturation T2-weighted MR images for the detection of joint effusion in the temporomandibular joint"Dentomaxillofacial Radiology. 31. 305-312 (2002)
• [文献書誌] Morimoto Y.: "Virtual endoscopic view of salivary gland ducts using MR sialography data from three dimension fast asymmetric spin-echo (3D-FASE) sequences : a preliminary study"Oral Diseases. 8. 268-274 (2002)
• [文献書誌] Uematsu H.: "MRI and radiographic analysis of temporomandibular-joints in growing and grown-up patients with activator treatment"J. Craniomandibular Practice. 20. 254-263 (2002)
• [文献書誌] Kito S.: "Cleavage of nucleolin and argyrophilic nucleolar organizer region associated proteins in apoptosis-induced cells"Biochem. Biophys. Res. Commun.. (in press).