条件的不死化細胞株を用いた血液―胎盤関門の胎児解毒機構と薬物間相互作用の解析

• 研究課題/領域番号: 14771343
• 研究種目: 若手研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 応用薬理学・医療系薬学
• 研究機関: 共立薬科大学
• 研究代表者: 飯笹 久 共立薬科大学, 薬学部, 助手 (80306662)
• 研究期間 (年度): 2002 – 2003
• 研究課題ステータス: 完了 (2003年度)
• 配分額: 3,900千円 (直接経費: 3,900千円); 2003年度: 1,500千円 (直接経費: 1,500千円); 2002年度: 2,400千円 (直接経費: 2,400千円)
• キーワード: 血液-胎盤関門 / DHEA-S / 条件的不死化細胞株 / P-glycoprotein / oatp2 / TR-TBT / OAT4 / RST / ABCP

研究概要

温度感受性SV40T抗原遺伝子導入ラットに由来する合胞体栄養細胞株TR-TBTを用いて、血液-胎盤関門における胎児老廃物の輸送活性を調べた。その結果、TR-TBTには胎児副腎から産生されるDehydroepiandrosteron-3-sulfate(DHEA-S)のbasal側からの取込み活性があり、その活性は、organic anion transporter(OAT)の基質とorganic anion transporting polypeptide(OATP)の基質により抑制された。更に、TR-TBTには、DHEA-Sを基質とするoatp2,3,4ならびにOAT-K2が発現し、oatp2特異的阻害剤であるdigoxinによりDHEA-Sの取込みは部分的に抑制されたことから、胎児側からのDHEA-Sの取込みには、oatp2,3,4とOAT-K2が使われていることが、予想された。
次に、TR-TBTからのDHEA-Sならびにその代謝産物の排出を調べるために、P-glycoprotein特異的阻害剤とABCP特異的阻害剤を用いて、TR-TBTからのDHEA-Sの排出活性を調べた。その結果、これら阻害剤はそれぞれ排出活性を抑制したことから、血液-胎盤関門による胎盤からのDHEA-Sもしくはその代謝産物の排出には、P-glycoproteinならびにABCPが使われていることが、予想された。現在、より詳細な解析を行っている。

研究成果

• [文献書誌] Kitano T, Iizasa H et al.: "Conditionally immortalized syncytiotrophoblast cell lines as new tools for study of the blood-placenta barrier."Biological & Pharmaceutical Bulletin. (in press).
• [文献書誌] Kondo T, Hosoya K, Hori S, Tomi M, Ohtsuki, S, Tanakaga H, Nakashima E, Iizasa H et al.: "Establishment of conditionally immortalized rat retinal pericyte cell lines (TR-rPCT) and their application in a co-culture system using retinal capillary endothelial cell line (TR-iBRB2)."Cell Structure & Function. 28(3). 145-153 (2003)
• [文献書誌] Asashima T, Iizasa H et al.: "Rat brain pericyte cell lines expressing beta2-adrenergic receptor, angiotensin II receptor type1A, Klotho, and CXCR4 mRNA despite having endothelial cell markers."Journal of Cellular Physiology. 197(1). 69-76 (2003)
• [文献書誌] Iizasa H et al.: "Altered expression and function of P-glycoprotein in dextran sodium sulfate-induced colitis in mice."Journal of Pharmaceutical Science. 92(3). 569-576 (2003)
• [文献書誌] Kitano T, Iizasa H et al.: "Polarized glucose transporters and mRNA expression properties in newly developed rat syncytiotrophoblast cell lines, TR-TBTs"Journal of Cellular Physiology. 193(2). 208-218 (2002)