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ABCAサブファミリータンパク質(ABCA1,ABCA7)の機能解析

研究課題

研究課題/領域番号 14780489
研究種目

若手研究(B)

配分区分補助金
研究分野 機能生物化学
研究機関京都大学

研究代表者

松尾 道憲  京都大学, 農学研究科, 助手 (00335308)

研究期間 (年度) 2002 – 2003
研究課題ステータス 完了 (2003年度)
配分額 *注記
2,600千円 (直接経費: 2,600千円)
2003年度: 1,300千円 (直接経費: 1,300千円)
2002年度: 1,300千円 (直接経費: 1,300千円)
キーワードABCタンパク質 / ABCA1 / ABCA7 / コレステロール / 脂質 / 動脈硬化 / アポリポタンパク質 / ECD / タンジール病 / NBF
研究概要

アポリポタンパク質AIとの相互作用に関与すると考えられる、ABCA1タンパク質の2つの細胞外領域(ECD-1,ECD-2)の機能を詳細に調べるため、ECDを大腸菌で発現させ、精製した。ECD-2は単独では発現しないが、ECD-1との融合タンパク質として発現させることに成功した。これを親和性クロマトグラフィーで精製することができた。ABCA1のN末領域が翻訳後切断を受ける可能性を検討するため、N末端領域とECD1を動物培養細胞(HEK293細胞)で発現させ、膜画分に局在することを示した。N末端領域が切断を受ける可能性を示し、さらにECD1がジスルフィド結合によって他のタンパク質と相互作用して、膜画分に留まる可能性を示唆した。
ABCA1とABCA7の機能を調べるため、全長タンパク質をそれぞれ動物培養細胞で発現させ、相互作用する分子、コレステロール、リン脂質の細胞外への排出活性を検討した。PDZタンパク質の1つα1-syntrophinがABCA1のC末端と相互作用することを見いだし、α1-syntrophinがABCA1の分解を抑制することで、apoAI依存的なコレステロール排出を促進することを明らかにした。また、ABCA7をHEK293細胞で発現させると、ABCA1と同様に細胞膜上に局在し、細胞からのapoAI依存的なコレステロール、リン脂質の排出が観察されることを明らかにした。さらに、ABCA7のスプライシングバリアントを単離し、バリアントが小胞体に局在してコレステロール、リン脂質排出には働かないことを示した。このことから、選択的スプライシングがABCA7の翻訳後制御に関わる可能性を示唆した。

報告書

(2件)
  • 2003 実績報告書
  • 2002 実績報告書
  • 研究成果

    (7件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (7件)

  • [文献書誌] Ikeda, Y. et al.: "Post-transcriptional regulation of human ABCA7 and its function for the apoA-I-dependent lipid release."Biochem.Biophys.Res.Com.. 311. 313-318 (2003)

    • 関連する報告書
      2003 実績報告書
  • [文献書誌] Kimura, Y. et al.: "ATP hydrolysis-dependent multidrug efflux transporter, MDR1/P-glycoprotein."Curr.Drug Metab.. 5. 1-10 (2004)

    • 関連する報告書
      2003 実績報告書
  • [文献書誌] Kimura, Y. et al.: "Microanalysis for MDR1 ATPase by high-performance liquid chromatography with a titanium dioxide column."Analyt.Biochem.. 326. 262-266 (2004)

    • 関連する報告書
      2003 実績報告書
  • [文献書誌] Abe-Dohmae, S. et al.: "Human ABCA7 supports apoliporotein-mediated release of cellular cholesterol and phospholipids to generate HDL."J.Biol.Chem.. 279. 604-611 (2004)

    • 関連する報告書
      2003 実績報告書
  • [文献書誌] Edited by Holland, I.B., Cole, S.P.C., Kuchler, K., Higgins, C.: "ABC PROTEINS 〜From Bacteria to Man"ACADEMIC PRESS. 647 (2003)

    • 関連する報告書
      2003 実績報告書
  • [文献書誌] Tanaka, A.R. et al.: "ATP binding/hydrolysis by and phosphorylation of peroxisomal ABC proteins PMP70 (ABCD3) and ALDP (ABCD1)"J. Biol. Chem.. 277. 40142-40147 (2002)

    • 関連する報告書
      2002 実績報告書
  • [文献書誌] Tanaka, A.R. et al.: "Effects of mutations of ABCA1 in the first extracellular domain on subcellular trafficking and ATP binding/hydrolysis"J. Biol. Chem.. 278. 8815-8819 (2003)

    • 関連する報告書
      2002 実績報告書

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公開日: 2002-04-01   更新日: 2016-04-21  

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