フィロウイルスの生態および病原性に関わる分子メカニズムの解明

• 研究課題/領域番号: 14J00026
• 研究種目: 特別研究員奨励費
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 国内
• 研究分野: 獣医学
• 研究機関: 北海道大学
• 研究代表者: 丸山 隼輝 北海道大学, 獣医学研究科, 特別研究員(DC2)
• 研究期間 (年度): 2014-04-25 – 2016-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2015年度)
• 配分額: 2,200千円 (直接経費: 2,200千円); 2015年度: 1,000千円 (直接経費: 1,000千円); 2014年度: 1,200千円 (直接経費: 1,200千円)
• キーワード: フィロウイルス / レセプター / 疫学調査 / レセプター検索 / 抗体調査 / 国際研究者交流 / インドネシア / ザンビア / アメリカ合衆国

研究実績の概要

エボラウイルスは感染するがマールブルグウイルスは感染しないヤエヤマオオコウモリ由来の細胞株であるFBKT1細胞のフィロウイルスの感染性の差を規定している宿主因子の同定することを目的として実験を行った。FBKT1細胞を免疫原としたモノクローナル抗体を作出した。作出したモノクローナル抗体、約2000株のうち、FBTK1細胞へのフィロウイルスの感染を阻害すると考えられる抗体をスクリーニングした結果、4株のモノクローナル抗体が得られた。これら4株のモノクローナル抗体を用いて、Expression Cloningを行うことでFBKT1細胞上に発現する、フィロウイルスの感染性の差を生み出す分子を特定することができると考えられる。
またFBKT1細胞にフィロウイルスに感受性を持つVero E6細胞由来のFusion factorであるNPC1を発現させたところ、エボラウイルスのGPのを持つ水胞性口炎ウイルス (VSV) シュードタイプは感染性が増強し、マールブルグウイルスのGPを持つVSVシュードタイプは感染性を獲得した。現在はFBKT1細胞からNPC1の相同遺伝子のクローニングを実施している。
フィロウイルスの疫学調査のため、ザンビア、フィリピンで採取したコウモリおよびブタのサンプルを用いて抗体保有状況の調査およびウイルス遺伝子の検出を行った。フィロウイルスのGPに対して特異的な抗体を検出することができたが、ウイルス遺伝子の検出には至らなかった。今後も疫学調査を継続して実施していく必要があると考える。

現在までの達成度 (段落)

27年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

27年度が最終年度であるため、記入しない。

研究成果

• [雑誌論文] Discovery of an antibody for pan-ebolavirus therapy (2016)
  • 著者名/発表者名: Furuyama D, Marzi A, Nanbo A, Haddock E, Maruyama J, Miyamoto H, Igarashi M, Yoshida R, Dr. Noyori O, Feldmann H, Takada A
  • 雑誌名: Sci Rep 巻: 6 号: 1 ページ: 20514-20514
  • DOI: 10.1038/srep20514
  • NAID: 120005906783
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] Characterization of the glycoproteins of bat-derived influenza viruses. (2016)
  • 著者名/発表者名: Maruyama J, Nao N, Miyamoto H, Maeda K, Ogawa H, Yoshida R, Igarashi M, Takada A
  • 雑誌名: Virology 巻: 488 ページ: 43-50
  • DOI: 10.1016/j.virol.2015.11.002
  • NAID: 120005906991
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] A Single Amino Acid in the M1 Protein Responsible for the Different Pathogenic Potentials of H5N1 Highly Pathogenic Avian Influenza Virus Strains (2015)
  • 著者名/発表者名: Nao N, Kajihara M, Manzoor R, Maruyama J, Yoshida R, Muramatsu M, Miyamoto H, Igarashi M, Eguchi N, Sato M, Kondoh T, Okamatsu M, Sakoda Y, Kida H, Takada A
  • 雑誌名: PLoS One 巻: 10(9) 号: 9 ページ: e0137989-e0137989
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0137989
  • NAID: 120005672370
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Seroepidemiological prevalence of multiple species of filoviruses in fruit bats (Eidolon helvum) migrating in Africa. (2015)
  • 著者名/発表者名: Hirohito Ogawa, Hiroko Miyamoto, Eri Nakayama, Reiko Yoshida, Ichiro Nakamura, Hirofumi Sawa, Akihiro Ishii, Yuka Thomas, Emiko Nakagawa, Keita Matsuno, Masahiro Kajihara, Junki Maruyama, Manabu Igarashi, Kimihito Ito, Ayato Takada et al
  • 雑誌名: Journal of Infectious Diseases 巻: jiv063 号: suppl 2 ページ: S101-S108
  • DOI: 10.1093/infdis/jiv063
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] A polymorphism of the TIM-1 IgV domain: Implications for the susceptibility to filovirus infection. (2014)
  • 著者名/発表者名: Makoto Kuroda, Daisuke Fujikura, Osamu Noyori, Masahiro Kajihara, Junki Maruyama, Hiroko Miyamoto, Reiko Yoshida, Ayato Takada.
  • 雑誌名: Biochemical and biophysical research communications 巻: 455 号: 3-4 ページ: 223-228
  • DOI: 10.1016/j.bbrc.2014.10.144
  • 査読あり / オープンアクセス
• [学会発表] コウモリ由来インフルエンザウイルスの糖タンパク質の解析 (2016)
  • 著者名/発表者名: 丸山隼輝
  • 学会等名: 5th Negative Strand Virus-Japan
  • 発表場所: 沖縄 ホテルモントレ沖縄
  • 年月日: 2016-01-25
• [学会発表] Characterization of the glycoproteins of bat-derived influenza viruses (2015)
  • 著者名/発表者名: Junki Maruyama, Nao Naganori, Hiroko Miyamoto, Ken Maeda, Hirohito Ogawa, Reiko Yoshida, Ayato Takada
  • 学会等名: 第63 回日本ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: 福岡 福岡国際会議場
  • 年月日: 2015-11-22
• [学会発表] Characterization of the hemagglutinin of bat-derived influenza viruses (2015)
  • 著者名/発表者名: Junki Maruyama, Nao Naganori, Hiroko Miyamoto, Ken Maeda, Hirohito Ogawa, Reiko Yoshida, Ayato Takada
  • 学会等名: The 3rd Sapporo Summer Seminar for One Health
  • 発表場所: 札幌 北海道大学
  • 年月日: 2015-09-16
  • 国際学会
• [学会発表] Characterization of the Hemagglutinin of Bat-derived Influenza Viruses. (2015)
  • 著者名/発表者名: Junki Maruyama, Nao Naganori, Hiroko Miyamoto, Ken Maeda, Hirohito Ogawa, Reiko Yoshida, Ayato Takada
  • 学会等名: Negative Strand Virus Meeting
  • 発表場所: Siena, Italy
  • 年月日: 2015-06-14
  • 国際学会
• [学会発表] Characterization of the envelope glycoprotein of a novel filovirus, Lloviu virus. (2014)
  • 著者名/発表者名: Junki Maruyama, Hiroko Miyamoto, Masahiro Kajihara, Hirohito Ogawa, Ken Maeda, Yoshihiro Sakoda, Reiko Yoshida, and Ayato Takada
  • 学会等名: International Union of Microbiological Societies 2014
  • 発表場所: Montreal, Canada
  • 年月日: 2014-07-27 – 2014-08-02
• [学会発表] 新規フィロウイルスLloviu virusの性状解析 (2014)
  • 著者名/発表者名: 丸山隼輝, 宮本洋子, 前田健, 小川寛人, 迫田義博, 高田礼人
  • 学会等名: 日本ウイルス学会北海道支部会第47回夏季シンポジウム
  • 発表場所: 北海道、日本
  • 年月日: 2014-07-12 – 2014-07-13
• [産業財産権] 全てのエボラウイルス種の感染性を中和するモノクローナル抗体 (2015)
  • 発明者名: 高田礼人、吉田玲子、古山若呼、宮本洋子、丸山隼輝
  • 権利者名: 高田礼人、吉田玲子、古山若呼、宮本洋子、丸山隼輝
  • 産業財産権種類: 特許
  • 出願年月日: 2015-08-19