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EBウイルスがコードするDNAポリメラーゼの機能ドメインの詳細な解析

研究課題

研究課題/領域番号 14J01982
研究種目

特別研究員奨励費

配分区分補助金
応募区分国内
研究分野 ウイルス学
研究機関名古屋大学

研究代表者

成田 洋平  名古屋大学, 医学系研究科, 特別研究員(PD)

研究期間 (年度) 2014-04-25 – 2017-03-31
研究課題ステータス 中途終了 (2016年度)
配分額 *注記
3,170千円 (直接経費: 2,900千円、間接経費: 270千円)
2016年度: 1,170千円 (直接経費: 900千円、間接経費: 270千円)
2015年度: 900千円 (直接経費: 900千円)
2014年度: 1,100千円 (直接経費: 1,100千円)
キーワードEpstein-Barr virus / ウイルスゲノム複製 / ヘルペスウイルス / EBウイルス / BAC
研究実績の概要

本研究ではBurkitt lymphomaを引き起こす原因ウイルスであるEpstein-Barr virus(EBV)がコードするDNAポリメラーゼ(Pol)に着目し、ウイルス産生感染時のウイルスゲノム複製を詳細に解析することを目的とした。特に、ヘルペスウイルス科のウイルスがPolに保存している特徴的なアミノ酸配列に着目し、このアミノ酸配列がEBVのウイルスゲノム複製においてどのように寄与しているのかを詳細に解析することを目指した。
平成27年度までに、このEBV Polのアミノ酸配列に変異を入れた組換えウイルスおよび感染細細胞(HEK293-EBV-BAC)を樹立し、アミノ酸配列を欠失あるいは変異させたウイルス感染細胞ではウイルスゲノム複製の効率が著しく低下することを明らかにした[Narita, Y. et al. Sci. Rep. 5, 11767; doi: 10.1038]。
平成28年度では、このアミノ酸配列がヘルペスウイルス特異的なものであるため、本研究課題が抗ウイルス薬開発等へ発展する可能性が高いと考え、アミノ酸配列のウイルス複製における作用メカニズムを明らかにすることを目指した。GST pulldown法や免疫沈降法にて得られた沈降物を質量分析装置で網羅的に解析することでEBV Polのアミノ酸配列と機能的に相互作用するタンパク質の同定を目指したが、適切な条件を見つけ出すことができなかった。これらは今後の検討課題であると考えている。

現在までの達成度 (段落)

28年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

28年度が最終年度であるため、記入しない。

報告書

(3件)
  • 2016 実績報告書
  • 2015 実績報告書
  • 2014 実績報告書
  • 研究成果

    (5件)

すべて 2016 2015 2014

すべて 雑誌論文 (1件) (うち査読あり 1件、 オープンアクセス 1件、 謝辞記載あり 1件) 学会発表 (4件)

  • [雑誌論文] A Herpesvirus Specific Motif of Epstein-Barr Virus DNA Polymerase Is Required for the Efficient Lytic Genome Synthesis2015

    • 著者名/発表者名
      Narita Y, Sugimoto A, Kawashima D, Watanabe T, Kanda T, Kimura H, Tsurumi T, Murata T
    • 雑誌名

      Sci Rep

      巻: 5 号: 1 ページ: 11767-11767

    • DOI

      10.1038/srep11767

    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
  • [学会発表] Cloning of type 2 EBV genomes from two Burkitt lymphoma cell lines, Jijoye and P3HR-12016

    • 著者名/発表者名
      Yohei Narita, Teru Kanda, Hiroshi Kimura, Takayuki Murata
    • 学会等名
      17th International Symposium on" "EBV and associated diseases
    • 発表場所
      チューリッヒ(スイス連邦)
    • 年月日
      2016-08-08
    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
  • [学会発表] ヘルペスウイルスDNAポリメラーゼに特異的なアミノ酸モチーフはEBウイルスのウイルスゲノム複製に必要である2015

    • 著者名/発表者名
      成田洋平、木村宏、村田貴之
    • 学会等名
      第38回日本分子生物学会年会・第88回日本生化学会大会 合同大会
    • 発表場所
      神戸ポートアイランド(兵庫県神戸市)
    • 年月日
      2015-12-01
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
  • [学会発表] EBウイルスDNAポリメラーゼのPre-NH2ドメインの機能解析2014

    • 著者名/発表者名
      成田洋平、村田貴之、神田輝、五島典、木村宏、鶴見達也
    • 学会等名
      第62回日本ウイルス学会学術集会
    • 発表場所
      パシフィコ横浜(神奈川県横浜市)
    • 年月日
      2014-11-10 – 2014-11-12
    • 関連する報告書
      2014 実績報告書
  • [学会発表] A conserved motif in the pre-N-terminal domain of Epstein-Barr virus DNA polymerase Catalytic subunit is required for the de novo EBV genome synthesis2014

    • 著者名/発表者名
      Yohei Narita, Takayuki Murata, Teru Kanda, Hiroshi Kimura and Tatsuya Tsurumi
    • 学会等名
      The 39th annual international herpesvirus workshop
    • 発表場所
      神戸国際展示場(兵庫県神戸市)
    • 年月日
      2014-07-19 – 2014-07-23
    • 関連する報告書
      2014 実績報告書

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公開日: 2015-01-22   更新日: 2024-03-26  

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