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単離細胞解析に基づくニチニチソウ葉組織二次代謝機構の解明とその再構築

研究課題

研究課題/領域番号 14J03616
研究種目

特別研究員奨励費

配分区分補助金
応募区分国内
研究分野 植物分子・生理科学
研究機関神戸大学

研究代表者

山本 浩太郎  神戸大学, 理学研究科, 特別研究員(DC1)

研究期間 (年度) 2014-04-25 – 2017-03-31
研究課題ステータス 完了 (2016年度)
配分額 *注記
3,200千円 (直接経費: 3,200千円)
2016年度: 1,000千円 (直接経費: 1,000千円)
2015年度: 1,000千円 (直接経費: 1,000千円)
2014年度: 1,200千円 (直接経費: 1,200千円)
キーワード二次代謝 / アルカロイド / メタボロミクス / トランスクリプトミクス / 薬用植物 / 異形細胞 / 乳管細胞
研究実績の概要

ニチニチソウはVinblastineやVincristineなどの抗がん剤となるTerpenoid indole alkaloid(TIA)をはじめとして、様々な二次代謝産物を生産することで著名な薬用植物である。ニチニチソウのTIA合成は、一連の合成過程が一つの細胞内で完結せず、茎組織や葉組織において葉肉細胞、表皮細胞など様々な細胞を経由して進むことが報告されている。特に異形細胞(Idioblast cell)や乳管細胞(Laticifer cell)で重要なTIA代謝過程が進み、合成された最終産物が異形細胞や乳管細胞の液胞に蓄積されると考えられているが、これらの細胞内や細胞間における二次代謝の分子機構は十分に理解されていない。
本研究では、ニチニチソウ葉組織と茎組織における細胞レベルでのTIA分布を解明するために、一細胞質量分析技術や質量顕微鏡を用いたメタボローム解析を試みた。その結果、CatharanthineやStrictosidineなど、これまで想定されていなかったTIAが異形細胞や乳管細胞に局在していることが明らかになった。また、一細胞質量分析技術を用いて葉原基の乳管細胞に局在する代謝物の解析を進めたところ、展開した葉組織や茎組織の異形細胞や乳管細胞と異なるTIAの蓄積が見られた。この結果は、これまで同種の細胞と考えられてきた異形細胞や乳管細胞でも、組織もしくは発生ステージによってTIA代謝分化が変化している可能性を示唆している。さらに、TIA代謝で重要な役割を果たしていると考えられる異形細胞を中心に、皮層細胞、異形細胞、茎組織全体のそれぞれでRNA-seq解析を行った。これまで報告されているTIA合成酵素遺伝子の検出と共に異形細胞特異的に発現している遺伝子の候補を複数挙げることにも成功した。現在、これらの一連の成果をまとめた論文原稿を作成している。

現在までの達成度 (段落)

28年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

28年度が最終年度であるため、記入しない。

報告書

(3件)
  • 2016 実績報告書
  • 2015 実績報告書
  • 2014 実績報告書
  • 研究成果

    (18件)

すべて 2017 2016 2015 2014 その他

すべて 国際共同研究 (1件) 雑誌論文 (3件) (うち国際共著 2件、 査読あり 3件、 オープンアクセス 2件、 謝辞記載あり 1件) 学会発表 (14件) (うち招待講演 1件)

  • [国際共同研究] チューリッヒ大学(スイス)

    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
  • [雑誌論文] Cadmium-induced changes in vacuolar aspects of Arabidopsis thaliana.2017

    • 著者名/発表者名
      Shanti S. Sharma, Kotaro Yamamoto, Kohei Hamaji, Miwa Ohnishi, Aya Anegawa, Shashi Sharma, Sveta Thakur, Vijay Kumar, Tomohiro Uemura, Akihiko Nakano, Tetsuro Mimura
    • 雑誌名

      Plant Physiol Biochem.

      巻: 114 ページ: 29-37

    • DOI

      10.1016/j.plaphy.2017.02.017

    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
  • [雑誌論文] 2)Cell-specific localization of alkaloids in Catharantus roseus stem tissue measured with Imaging MS and Single cell MS2016

    • 著者名/発表者名
      K.Yamamoto, K.Takahashi, H.Mizuno, A.Anegawa, K.Ishizaki, H.Fukaki, M.Ohnishi, M.Yamazaki, T.Masujima, T.Mimura
    • 雑誌名

      Proceeding of the National Academy of Sciences of the United States of America

      巻: 113 号: 14 ページ: 3891-3896

    • DOI

      10.1073/pnas.1521959113

    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著 / 謝辞記載あり
  • [雑誌論文] Localization of small molecules in plant tissues visualized by an imaging mass spectrometer. (in Japanese)2016

    • 著者名/発表者名
      Katsutoshi Takahashi, Aya Anegawa, Miwa Ohnishi, Kotaro Yamamoto, Kimitsune Ishizaki, Hidehiro Fukaki and Tetsuro Mimura
    • 雑誌名

      Plant Morphology.

      巻: 印刷中

    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
    • 査読あり
  • [学会発表] Terpenoid indole alkaloid metabolism in Catharanthus roseus idioblast and laticifer cells2017

    • 著者名/発表者名
      Kotaro Yamamoto, Miwa Ohnishi, Katsutoshi Takahashi, Hajime Mizuno, Kimitsune Ishizaki, Mami Yamazaki, Hidehiro Fukaki, Tsutomu Masujima, Tetsuro Mimura
    • 学会等名
      第58回日本植物生理学会年会
    • 発表場所
      鹿児島大学
    • 年月日
      2017-03-16
    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
  • [学会発表] Molecular components of vacuoles and their possible functions in plant cells2017

    • 著者名/発表者名
      Tetsuro Mimura, Miwa Ohnishi, Aya Anegawa, Kotaro Yamamoto, Yuko Kurita, Katsuhisa Yoshida
    • 学会等名
      第58回日本植物生理学会年会
    • 発表場所
      鹿児島大学
    • 年月日
      2017-03-16
    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
  • [学会発表] 細胞別メタボローム解析が明らかにしたニチニチソウTIA代謝2016

    • 著者名/発表者名
      山本浩太郎, 高橋勝利, 水野初, 大西美輪, 姉川彩, 石崎公庸, 山崎真巳, 深城英弘, 升島努, 三村徹郎
    • 学会等名
      第10回メタボロームシンポジウム
    • 発表場所
      鶴岡メタボロームキャンパス
    • 年月日
      2016-10-19
    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] シロイヌナズナ培養細胞のメタボロミクス・メタロミクス解析2016

    • 著者名/発表者名
      姉川彩, 大西美輪, 山本浩太郎, 溝渕勝男, Shanti S. Sharma, 三村徹郎
    • 学会等名
      第10回メタボロームシンポジウム
    • 発表場所
      鶴岡メタボロームキャンパス
    • 年月日
      2016-10-19
    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
  • [学会発表] ニチニチソウ異形細胞におけるTIA代謝分化機構の解析2016

    • 著者名/発表者名
      山本浩太郎, 高橋勝利, 水野初, 大西美輪, 江崎剛史, 石崎公庸, 深城英弘, 山崎真巳, 升島努, 三村徹郎
    • 学会等名
      日本植物学会第80回大会
    • 発表場所
      沖縄コンベンションセンター
    • 年月日
      2016-09-16
    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
  • [学会発表] ニチニチソウ異形細胞におけるTIA代謝機構の解析2016

    • 著者名/発表者名
      山本浩太郎, 大西美輪, 高橋勝利, 水野初, 江崎剛史, 石崎公庸, 山崎真巳, 深城英弘, 升島努, 三村徹郎
    • 学会等名
      第57回日本植物生理学会年会
    • 発表場所
      岩手大学(岩手県盛岡市)
    • 年月日
      2016-03-18
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
  • [学会発表] 木本植物の心材形成時における栄養塩回収機構の解析2016

    • 著者名/発表者名
      真鍋瞬, 栗田悠子, 馬場啓一, 山本浩太郎, 高橋勝利, 大西美輪, 小菅桂子, 石崎公庸, 深城英弘, 三村徹郎
    • 学会等名
      第57回日本植物生理学会年会
    • 発表場所
      岩手大学(岩手県盛岡市)
    • 年月日
      2016-03-18
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
  • [学会発表] 木本植物の心材形成時における栄養塩回収機構の解析2015

    • 著者名/発表者名
      真鍋瞬, 栗田悠子, 馬場啓一, 山本浩太郎, 高橋勝利, 大西美輪, 小菅桂子, 七條千津子, 石崎公庸, 深城英弘, 三村徹郎
    • 学会等名
      若手フロンティア研究発表会2015
    • 発表場所
      神戸大学(兵庫県神戸市)
    • 年月日
      2015-12-25
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
  • [学会発表] ニチニチソウ組織におけるTerpenoid indole alkaloidの合成と蓄積機構の解明2015

    • 著者名/発表者名
      山本浩太郎, 大西美輪, 姉川彩, 高橋勝利, 水野初, 村上明男, 石崎公庸, 山崎真巳, 深城英弘, 升島努, 三村徹郎
    • 学会等名
      日本植物学会第79回大会
    • 発表場所
      朱鷺メッセ:新潟コンベンションセンター(新潟県新潟市)
    • 年月日
      2015-09-06
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
  • [学会発表] 植物組織における低分子量物質分布の質量顕微鏡による可視化2015

    • 著者名/発表者名
      三村徹郎, 姉川彩, 大西美輪, 山本浩太郎, 石崎公庸, 深城英弘, 高橋勝利
    • 学会等名
      日本植物学会第79回大会
    • 発表場所
      朱鷺メッセ:新潟コンベンションセンター(新潟県新潟市)
    • 年月日
      2015-09-06
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
  • [学会発表] ランタナの花色変化における生理課程解析2015

    • 著者名/発表者名
      桑原大季, 山本浩太郎, 大西美輪, 七條千津子, 水野初, 石崎公庸, 深城英弘, 升島努, 三村徹郎
    • 学会等名
      日本植物学会第79回大会
    • 発表場所
      朱鷺メッセ:新潟コンベンションセンター(新潟県新潟市)
    • 年月日
      2015-09-06
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
  • [学会発表] ニチニチソウ茎組織におけるTerpenoid indole alkaloidの分布解析2015

    • 著者名/発表者名
      山本浩太郎、大西美輪、姉川彩、高橋勝利、水野初、七條千津子、石崎公庸、山崎真巳、深城英弘、升島努、三村徹郎
    • 学会等名
      第56回日本植物生理学会年会
    • 発表場所
      東京農業大学 世田谷キャンパス
    • 年月日
      2015-03-16 – 2015-03-18
    • 関連する報告書
      2014 実績報告書
  • [学会発表] Cell-specific localization of terpenoid indole alkaloids revealed by new metabolome analyses2015

    • 著者名/発表者名
      Kotaro YAMAMOTO, Miwa OHNISHI, Aya ANEGAWA, Katsutoshi TAKAHASHI, Hajime MIZUNO, Chizuko SHICHIJO, Kimitsune ISHIZAKI, Mami YAMAZAKI, Hidehiro FUKAKI, Tsutomu MASUJIMA, Tetsuro MIMURA
    • 学会等名
      The 2nd International Symposium on Plant Environmental Sensing
    • 発表場所
      AIST Tokyo Waterfront, Tokyo, Japan
    • 年月日
      2015-03-13 – 2015-03-15
    • 関連する報告書
      2014 実績報告書
  • [学会発表] Novel metabolome analyses of terpenoid indole alkaloids in Catharanthus roseus2014

    • 著者名/発表者名
      Kotaro YAMAMOTO, Miwa Ohnishi, Aya Anegawa, Katsutoshi Takahashi, Tetsushi Iwasaki, Hajime Mizuno, Mami Yamazaki, Tsutomu Masujima, Tetsuro Mimura
    • 学会等名
      THE 38th NAITO CONFERENCE ON Molecule-based biological systems
    • 発表場所
      Chateraise Gateaux Kingdom Sapporo, Hokkaido, Japan
    • 年月日
      2014-10-07 – 2014-10-10
    • 関連する報告書
      2014 実績報告書

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公開日: 2015-01-22   更新日: 2024-03-26  

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