新規遺伝子変異標的ＳＦ３Ｂ１などによる骨髄異形成症候群の発症メカニズムの解明

• 研究課題/領域番号: 14J03784
• 研究種目: 特別研究員奨励費
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 国内
• 研究分野: 血液内科学
• 研究機関: 京都大学 (2015); 東京大学 (2014)
• 特別研究員: 昆 彩奈 京都大学, 大学院医学系研究科・医学部, 特別研究員(PD)
• 研究期間 (年度): 2014-04-25 – 2016-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2015年度)
• 配分額: 1,900千円 (直接経費: 1,900千円); 2015年度: 900千円 (直接経費: 900千円); 2014年度: 1,000千円 (直接経費: 1,000千円)
• キーワード: 骨髄異形成症候群 / 遺伝子変異 / スプライシング因子 / マウスモデル / 遺伝子改変マウス

研究実績の概要

本研究では、骨髄異形成症候群(MDS)で高頻度に変異していることが近年報告された新規遺伝子標的SRSF2が、MDSの病態において果たす分子メカニズムの解明を行った。近年、MDSの全エクソン解析により、スプライシング関連遺伝子が高頻度に変異していることが同定されたが、その機能は未知であった。そこで、スプライシング因子であるSRSF2の遺伝子変異がin vivoでもたらす生物学的効果を検討するために、造血系組織に特異的に変異アレルを発現したコンディショナルノックインマウスを作成した。まず、致死量の放射線を照射したレシピエントマウスに、変異マウス由来の骨髄細胞を経静脈的に移植し、造血系の表現系の観察をおこなった。変異マウスでは、野生型マウスと比較して、貧血および白血球減少を認めたほか、骨髄細胞表面マーカー解析により、造血幹／前駆細胞分画、およびより分化した細胞分画の減少を認めた。形態学的には骨髄細胞の異形成を認めた。競合的骨髄移植実験では、SRSF2変異マウスでは造血幹細胞の長期骨髄再構築能の低下を認めた。SRSF2変異マウスの造血・前駆細胞分画をFACSソーティングにより採取し、RNAシーケンスを行うことにより、変異マウスの表現系の原因となる標的遺伝子を複数同定した。以上の結果より、SRSF2変異を有する造血幹細胞は、骨髄再構築能の低下および分化異常をもたらすことが明らかになった。
多数症例のMDSを対象とした網羅的な変異解析の結果からは、MDSの発症には平均して数個のドライバー変異が必要であることが示唆されており、SRSF2遺伝子変異のコンディショナルノックインマウスを、MDSにおいて共存頻度の高い遺伝子変異アレルを有するマウス (TET2)に関するコンディショナルノックアウトマウスを交配させることでMDS疾患モデルマウスの構築を進めている。

現在までの達成度 (段落)

27年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

27年度が最終年度であるため、記入しない。

研究成果

• [雑誌論文] Variegated RHOA mutations in adult T-cell leukemia/lymphoma. (2016)
  • 著者名/発表者名: Nagata Y, Kontani K, Enami T, Kataoka K, Ishii R, Totoki Y, Kataoka TR, Hirata M, Aoki K, Nakano K, Kitanaka A, Sakata-Yanagimoto M, Egami S, Shiraishi Y, Chiba K, Tanaka H, Shiozawa Y, Yoshizato T, (9名), Miyano S, Nureki O, Shibata T, Haga H, Shimoda K, Katada T, Chiba S, Watanabe T, Ogawa S
  • 雑誌名: Blood. 巻: 127 ページ: 596-604
  • DOI: 10.1182/blood-2015-06-644948
  • 査読あり / 国際共著/国際学会である / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] GATA2 and secondary mutations in familial myelodysplastic syndromes and pediatric myeloid malignancies. (2015)
  • 著者名/発表者名: Huang D, Nagata Y, Grossmann V, Radivoyevitch T, Okuno Y, Nagae G, et al.
  • 雑誌名: Haematologica 巻: 100(8) ページ: 1051-1057
  • DOI: 10.3324/haematol.2014.111989
  • 査読あり / オープンアクセスとしている / 国際共著/国際学会である
• [雑誌論文] Somatic Mutations and Clonal Hematopoiesis in Aplastic Anemia. (2015)
  • 著者名/発表者名: Yoshizato T, Dumitriu B, Hosokawa K, Makishima H, Yoshida K, Townsley D, Sato-Otsubo A, Sato Y, Liu D, Suzuki H, Wu CO, Shiraishi Y, Clemente MJ, Kataoka K, Shiozawa Y, Okuno Y, Chiba K, Tanaka H, Nagata Y, Katagiri T, Kon A, Sanada M, Scheinberg P, Miyano S, Maciejewski JP, Nakao S, Young NS, Ogawa S.
  • 雑誌名: New England Journal of Medicine 巻: 373 ページ: 35-35
  • DOI: 10.1056/nejmoa1414799
  • NAID: 120005623244
  • 査読あり / オープンアクセスとしている / 国際共著/国際学会である / 謝辞記載あり
• [学会発表] Srsf2 P95H mutation causes impaired stem cell repopulation and hematopoietic differentiation in mice (2015)
  • 著者名/発表者名: Ayana Kon, Satoshi Yamazaki, Yusuke Shiozawa, Yasunori Ota, Keisuke Kataoka, Tetsuichi Yoshizato, Masashi Sanada, Kenichi Yoshida, Manabu Nakayama, Haruhiko Koseki, Hiromitsu Nakauchi, Seishi Ogawa
  • 学会等名: 57th ASH annual meeting
  • 発表場所: Orlando FL, US
  • 年月日: 2015-12-05
  • 国際共著/国際学会である
• [学会発表] Biological and genetic characterization of SRSF2 mutations in the pathogenesis of MDS. (2015)
  • 著者名/発表者名: Ayana Kon, Satoshi Yamazaki, Yusuke Shiozawa, Yasunori Ota, Keisuke Kataoka, Tetsuichi Yoshizato, Masashi Sanada, Kenichi Yoshida, Manabu Nakayama, Haruhiko Koseki, Hiromitsu Nakauchi, Seishi Ogawa
  • 学会等名: 第77回日本血液学会学術総会
  • 発表場所: 金沢
  • 年月日: 2015-10-17
• [学会発表] Srsf2 P95H mutation causes impaired stem cell repopulation and hematopoietic differentiation in mice (2015)
  • 著者名/発表者名: Ayana Kon, Satoshi Yamazaki, Yusuke Shiozawa, Yasunori Ota, Keisuke Kataoka, Tetsuichi Yoshizato, Masashi Sanada, Kenichi Yoshida, Manabu Nakayama, Haruhiko Koseki, Hiromitsu Nakauchi, Seishi Ogawa
  • 学会等名: 第74回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: 名古屋
  • 年月日: 2015-10-09
• [学会発表] Biological and genetic characterization of SRSF2 mutations in the pathogenesis of MDS. (2015)
  • 著者名/発表者名: Ayana Kon, Satoshi Yamazaki, Yusuke Shiozawa, Yasunori Ota, Keisuke Kataoka, Tetsuichi Yoshizato, Masashi Sanada, Kenichi Yoshida, Manabu Nakayama, Haruhiko Koseki, Hiromitsu Nakauchi, Seishi Ogawa
  • 学会等名: 44th annual meeting of International Society of Experimental Hematology
  • 発表場所: Kyoto, Japan
  • 年月日: 2015-09-18
  • 国際共著/国際学会である
• [学会発表] Srsf2 P95H mutation results in impaired stem cell repolupation and compromised hematopoietic differentiation in mice. (2015)
  • 著者名/発表者名: Ayana Kon, Satoshi Yamazaki, Yusuke Shiozawa, Yasunori Ota, Keisuke Kataoka, Tetsuichi Yoshizato, Masashi Sanada, Kenichi Yoshida, Manabu Nakayama, Haruhiko Koseki, Hiromitsu Nakauchi, Seishi Ogawa
  • 学会等名: 20th Congress of European Hematology Association
  • 発表場所: Viena, Austria
  • 年月日: 2015-06-13
  • 国際共著/国際学会である
• [学会発表] Srsf2 P95H mutation results in impaired stem cell functions and compromised hematopoietic differentiation in mice (2015)
  • 著者名/発表者名: Ayana Kon
  • 学会等名: 20th Congress of European Hematology Association
  • 発表場所: ウィーン(オーストリア)
  • 年月日: 2015-06-11 – 2015-06-14
• [学会発表] The biological and prognostic significance of pathway mutations of cohesin complex in MDS (2014)
  • 著者名/発表者名: Ayana Kon
  • 学会等名: 日本血液学会学術集会
  • 発表場所: 大阪府立国際会議場 （大阪府大阪市）
  • 年月日: 2014-11-01
• [学会発表] The biological and prognostic significance of pathway mutations of cohesin complex in MDS (2014)
  • 著者名/発表者名: Ayana Kon
  • 学会等名: 日本癌学会学術総会
  • 発表場所: パシフィコ横浜 （神奈川県横浜市）
  • 年月日: 2014-09-26