| 研究課題/領域番号 |
14J08165
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| 研究種目 |
特別研究員奨励費
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 国内 |
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| 研究分野 |
応用分子細胞生物学
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| 研究機関 | 千葉大学 |
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研究代表者 |
池 紘平 千葉大学, 工学研究科, 特別研究員(DC1)
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| 研究期間 (年度) |
2014-04-25 – 2017-03-31
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| 研究課題ステータス |
完了 (2016年度)
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| 配分額 *注記 |
3,200千円 (直接経費: 3,200千円)
2016年度: 1,000千円 (直接経費: 1,000千円)
2015年度: 1,000千円 (直接経費: 1,000千円)
2014年度: 1,200千円 (直接経費: 1,200千円)
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| キーワード | genetic selection / genetic switch / quorum-sensing / directed evolution / synthetic biology |
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| 研究実績の概要 |
グラム陰性菌のQuorum-sensingシステムは，膜透過性の高い分子(HSLs)をシグナルとして利用する非常に扱いやすいExpression system (遺伝子スイッチ)である。HSLsは種によって異なるacyl基構造をもっているが，QSレギュレータのシグナル特異性が低く，さらには標的とするDNA(Box)配列が似通っている。このため，QSシステムは相互に強く干渉しあい，これらをひとつの細胞内で独立に働かせること/複数遺伝子の発現を精緻にコントロールすることが困難であった。昨年度には，Agrobacterium tumefaciens由来のQSアクティベータTraRに我々の進化工学(機能選抜)手法を適用することで，天然QSシステムと，シグナル認識・標的配列の両面で直交性の高いTraシステムをそれぞれ取得した。本年度は，これらシステムを一つの細胞内へと導入し，直交的に実利用可能であることを示した。これまでにも，multi-cellular systemとしてDNA(Box)結合におけるクロストークを避け複数のQuorum-sensingシステムを直交的に使用する工夫がなされてきた。しかしながら，細胞ポピュレーションが外的環境(誘導条件etc…)に左右されるためシステムの堅牢性に大きな課題があった。本研究により得たQSシステムは，単一細胞内でも直交的に利用可能であるため，原理的にポピュレーションバランスの問題から解放され，非常に高い堅牢性を達成することができた。この成果は，29年度に論文として発表する予定である。
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| 現在までの達成度 (段落) |
28年度が最終年度であるため、記入しない。
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| 今後の研究の推進方策 |
28年度が最終年度であるため、記入しない。
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