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担子菌の植物分解に関わる新規糖質酸化酵素の生理的役割の解明

研究課題

研究課題/領域番号 14J08518
研究種目

特別研究員奨励費

配分区分補助金
応募区分国内
研究分野 木質科学
研究機関東京農工大学

研究代表者

梅澤 究  東京農工大学, 連合農学研究科, 特別研究員(DC1)

研究期間 (年度) 2014-04-25 – 2017-03-31
研究課題ステータス 完了 (2016年度)
配分額 *注記
2,800千円 (直接経費: 2,800千円)
2016年度: 900千円 (直接経費: 900千円)
2015年度: 900千円 (直接経費: 900千円)
2014年度: 1,000千円 (直接経費: 1,000千円)
キーワードセルロース / 糸状菌 / 酵素糖化 / 酸化還元酵素 / PQQ / ピラノース脱水素酵素 / 糖質酸化還元酵素 / シトクロムb / CBM1 / バイオマス / 糖化 / セルロース分解
研究実績の概要

本研究では、未利用セルロース系バイオマスの高効率糖化システムの構築に向けて、セルロース分解効率を高める機能を持つと予想される、担子菌Coprinopsis cinerea由来ピロロキノリンキノン(PQQ)依存性ピラノース脱水素酵素(CcPDHA)の機能解析を行った。機能解析の結果、本酵素はセロビオース脱水素酵素(CDH)様シトクロムドメイン、PQQ依存性脱水素ドメイン、セルロース結合ドメイン(CBM1)の3ドメインで構成される新規ピラノース脱水素酵素であることが明らかになった。セルロースを酸化的に分解する酵素として近年その活性が明らかにされた、溶解性多糖モノオキシゲナーゼ(LPMO)は、CDHを生理的な電子供与体とすることが有力視されている。CcPDHAはCDHと非常に類似したシトクロムドメインを有していることから、CDHと同様にLPMOの電子供与体として働くことが予想された。そこで、CcPDHAのLPMOへの電子伝達能の評価を行った結果、CcPDHAとその基質の存在下で、LPMOのセルロース分解活性が検出され、CcPDHAがLPMOへの電子供給能を有することが明らかになった。また、CcPDHAのシトクロムドメイン欠損体を用いると、LPMOの活性が著しく低下することが示され、CcPDHAがシトクロムドメインを通じてLPMOに電子を供給していることが示唆された。これらの結果から、CcPDHAはCDHと同様にLPMOの電子供与体としてセルロース分解に関わる酵素であることが示唆された。また、C. cinereaにおけるCcPDHAのホモログであるCcPDHBの機能解析の結果、本酵素はCcPDHAと同様の基質特異性を示すが、その活性は低く、CBM1は糖質への吸着能を示さないことが明らかになり、本酵素が変異の蓄積により活性の失われた酵素であることが推測された。

現在までの達成度 (段落)

28年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

28年度が最終年度であるため、記入しない。

報告書

(3件)
  • 2016 実績報告書
  • 2015 実績報告書
  • 2014 実績報告書
  • 研究成果

    (12件)

すべて 2017 2016 2015 2014 その他

すべて 国際共同研究 (3件) 雑誌論文 (2件) (うち査読あり 2件、 オープンアクセス 1件) 学会発表 (7件) (うち国際学会 1件)

  • [国際共同研究] Norwegian University of Life Sciences(ノルウェー)

    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
  • [国際共同研究] Clark University(米国)

    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
  • [国際共同研究] Norwegian University of Life Sciences(ノルウェー)

    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
  • [雑誌論文] A novel pyrroloquinoline quinone-dependent 2-keto-D-glucose dehydrogenase from Pseudomonas aureofaciens2015

    • 著者名/発表者名
      Kiwamu Umezawa, Kouta Takeda, Takuya Ishida, Naoki Sunagawa, Akiko Makave, Kazuo Isobe, Keisuke Koba, Hiroyuki Ohno, Masahiro Samejima, Nobuhumi Nakamura, Kiyohiko Igarashi, Makoto Yoshida
    • 雑誌名

      Journal of Bacteriology

      巻: 197(8) 号: 8 ページ: 1322-1329

    • DOI

      10.1128/jb.02376-14

    • 関連する報告書
      2014 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Discovery of a eukaryotic pyrroloquinoline quinone-dependent oxidoreductase belonging to a new auxiliary activity family in the database of carbohydrate-active enzymes2014

    • 著者名/発表者名
      Hirotoshi Matsumura, Kiwamu Umezawa, Kouta Takeda, Naohisa Sugimoto, Takuya Ishida, Masahiro Samejima, Hiroyuku Ohno, Makoto Yoshida, Kiyohiko Igarashi, Nobuhumi Nakamura
    • 雑誌名

      PLoS One

      巻: 9(8) 号: 8 ページ: e104851-e104851

    • DOI

      10.1371/journal.pone.0104851

    • 関連する報告書
      2014 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [学会発表] ピロロキノリンキノン依存性ピラノース脱水素酵素と溶解性多糖モノオキシゲナーゼの相互作用に関する研究2017

    • 著者名/発表者名
      梅澤 究,吉田 誠,武田康太,中村暢文,大野弘幸,Aniko Varnai,Vincent Eijsink
    • 学会等名
      第67回日本木材学会
    • 発表場所
      九州大学箱崎キャンパス,アクロス福岡(福岡県福岡市)
    • 年月日
      2017-03-17
    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
  • [学会発表] Coprinopsis cinerea由来PQQ依存性ピラノース脱水素酵素が植物細胞壁分解に 果たす役割2016

    • 著者名/発表者名
      梅澤 究,武田康太,石田卓也,中村暢文,大野弘幸,五十嵐圭日子,鮫島正浩,吉田 誠
    • 学会等名
      日本菌学会60記念大会
    • 発表場所
      京都大学(京都府京都市)
    • 年月日
      2016-09-16
    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
  • [学会発表] ユニークなCBM1を有する担子菌Coprinopsis cinerea由来AA12ピラノース脱水素酵素アイソザイムの機能解析2016

    • 著者名/発表者名
      梅澤 究、吉田 誠、武田康太、中村暢文、大野弘幸、石田卓也、五十嵐圭日子、鮫島正浩
    • 学会等名
      第66回日本木材学会
    • 発表場所
      名古屋大学(愛知県、名古屋市)
    • 年月日
      2016-03-27
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
  • [学会発表] Comparison of Enzymatic Properties between AA12 Pyranose Dehydrogenases from Coprinopsis cinerea2015

    • 著者名/発表者名
      Kiwamu Umezawa, Kouta Takeda, Takuya Ishida, Kiyohiko Igarashi, Nobuhumi Nakamura, Masahiro Samejima, Hiroyuki Ohno, Makoto Yoshida
    • 学会等名
      Gordon Research Conference: Cellulosomes, Cellulases & Other Carbohydrate Modifying Enzymes
    • 発表場所
      New Hampshire, USA
    • 年月日
      2015-08-02
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
    • 国際学会
  • [学会発表] Characterization of a pyrroloquinoline quinone-dependent sugar dehydrogenase homologue from the basidiomycete Coprinopsis cinerea2015

    • 著者名/発表者名
      Kiwamu Umezawa, Kouta Takeda, Takuya Ishida, Kiyohiko Igarashi, Nobuhumi Nakamura, Masahiro Samejima, Hiroyuki Ohno, Makoto Yoshida
    • 学会等名
      International Symposium on Wood Science and Technology 2015
    • 発表場所
      Tower Hall Funabori, Tokyo, Japan
    • 年月日
      2015-03-15 – 2015-03-17
    • 関連する報告書
      2014 実績報告書
  • [学会発表] Characterization of 2-keto-D-glucose dehydrogenase that is homolog to AA12 enzyme from Pseudomonas aureofaciens2014

    • 著者名/発表者名
      Kiwamu Umezawa, Kouta Takeda, Takuya Ishida, Kiyohiko Igarashi, Nobuhumi Nakamura, Masahiro Samejima, Hiroyuki Ohno, Makoto Yoshida
    • 学会等名
      MIE BIOFORUM 2014
    • 発表場所
      Nemuno Sato, Ise-Shima, Japan
    • 年月日
      2014-11-18 – 2014-11-21
    • 関連する報告書
      2014 実績報告書
  • [学会発表] 担子菌Coprinopsis cinerea由来新規PQQ依存性糖質脱水素酵素の機能解析2014

    • 著者名/発表者名
      梅澤 究、吉田 誠、石田卓也、五十嵐圭日子、鮫島正浩、武田康太、中村暢文、大野弘幸
    • 学会等名
      第28回セルラーゼ研究会
    • 発表場所
      幕張セミナーハウス
    • 年月日
      2014-07-11
    • 関連する報告書
      2014 実績報告書

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公開日: 2015-01-22   更新日: 2024-03-26  

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