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ヌンチャク型人工蛋白質を利用した自己組織化ナノブロックの開発とナノ構造空間の創製

研究課題

研究課題/領域番号 14J10185
研究種目

特別研究員奨励費

配分区分補助金
応募区分国内
研究分野 ナノ構造化学
研究機関信州大学

研究代表者

小林 直也  信州大学, 総合工学系研究科, 特別研究員(DC2)

研究期間 (年度) 2014-04-25 – 2016-03-31
研究課題ステータス 完了 (2015年度)
配分額 *注記
2,200千円 (直接経費: 2,200千円)
2015年度: 1,000千円 (直接経費: 1,000千円)
2014年度: 1,200千円 (直接経費: 1,200千円)
キーワード自己組織化 / 人工蛋白質 / 蛋白質ナノブロック / 超分子 / ナノテクノロジー / 合成生物学 / 立体構造解析 / 蛋白質複合体 / 蛋白質デザイン
研究実績の概要

交付申請書に記載した①「頂点と3辺をつくるナノブロック」としてWA20-foldonを創出し、このタンパク質を大腸菌で発現させたところ、可溶性タンパク質として複数のタンパク質複合体の創出に成功した。さらにそれらのタンパク質複合体について交付申請書に記載した②「ナノ構造空間の創製および構造解析」として、ゲルろ過クロマトグラフィー-多角度光散乱(SEC-MALS)、超遠心分析、小角X線散乱(SAXS)等の実験を行い、6の倍数量体の複合体を規則的に形成することを明らかにした。さらに、複合体の溶液中での形状を評価するためにSAXSデータに基づいて剛体モデリング解析を行ったところ、6量体と12量体は、樽型構造と正四面体型構造をそれぞれ形成していることが強く示唆された。この成果は2015年にJournal of the American Chemical Society誌に発表し、表紙掲載及びJACS Spotlightsに選定・紹介記事が掲載された。
さらに、交付申請書に記載した③ 「辺を延長するナノブロック」として人工タンパク質WA20を直列に2個連結した「タンデムWA20ナノブロック」を開発した。ゲルろ過クロマトグラフィー-多角度光散乱(SEC-MALS)、小角X線散乱(SAXS)、分子モデリング解析を行い、このタンデムWA20ナノブロックが環状の自己組織化多量体構造を形成することや、複数種類の人工タンパク質ナノブロックの再構成により環状から直鎖状構造へのフォーム変換が可能であることを明らかにした。さらに、この直鎖状構造体を雲母基板上で巨大超分子ナノ構造体へと自己組織化させ、原子間力顕微鏡による観察に成功した。この成果は、現在、論文投稿準備中である。

現在までの達成度 (段落)

27年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

27年度が最終年度であるため、記入しない。

報告書

(2件)
  • 2015 実績報告書
  • 2014 実績報告書
  • 研究成果

    (30件)

すべて 2016 2015 2014 その他

すべて 国際共同研究 (1件) 雑誌論文 (3件) (うち国際共著 1件、 査読あり 1件) 学会発表 (23件) (うち招待講演 7件) 備考 (2件) 産業財産権 (1件)

  • [国際共同研究] プリンストン大学(米国)

    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
  • [雑誌論文] 二量体形成新規人工タンパク質を用いたタンパク質ナノブロック開発による自己組織化ナノ構造複合体の創製2016

    • 著者名/発表者名
      小林直也,新井亮一
    • 雑誌名

      分子研レターズ

      巻: 73 ページ: 30-31

    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
  • [雑誌論文] 人工タンパク質で「かたち」をつくろう―ブロック遊びしようよ!―2016

    • 著者名/発表者名
      小林直也,新井亮一
    • 雑誌名

      日本生物工学会誌

      巻: 94

    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
  • [雑誌論文] Self-Assembling Nano-Architectures Created from a Protein Nano-Building Block Using an Intermolecularly Folded Dimeric de Novo Protein.2015

    • 著者名/発表者名
      Kobayashi N, Yanase K, Sato T, Unzai S, Hecht MH, Arai R.
    • 雑誌名

      J Am Chem Soc.

      巻: 137 号: 35 ページ: 11285-11293

    • DOI

      10.1021/jacs.5b03593

    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
    • 査読あり / 国際共著
  • [学会発表] 人工蛋白質ナノブロックの設計開発による自己組織化超分子ナノ構造複合体の創出2016

    • 著者名/発表者名
      小林直也
    • 学会等名
      第16回日本蛋白質科学会年会
    • 発表場所
      福岡国際会議場(福岡県・福岡市)
    • 年月日
      2016-06-07
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] 人工蛋白質ナノブロック(PN-Block)による自己組織化ナノ構造創製:“ネオバイオ分子”創出へ向けて2016

    • 著者名/発表者名
      小林直也, 木村尚弥, 新井亮一
    • 学会等名
      第16回日本蛋白質科学会年会
    • 発表場所
      福岡国際会議場(福岡県・福岡市)
    • 年月日
      2016-06-07
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] 超安定化二量 体人工蛋白質Super WA20 (SUWA)の安定化機構解析と蛋白質ナノブロックへの応用2016

    • 著者名/発表者名
      木村尚弥, 小林直也, 新井亮一
    • 学会等名
      第16回日本蛋白質科学会年会
    • 発表場所
      福岡国際会議場(福岡県・福岡市)
    • 年月日
      2016-06-07
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
  • [学会発表] 二量体形成新規人工タンパク質を用いた蛋白質ナノブロック(PN-Block)による自己組織化ナノ構造複合体の創製2016

    • 著者名/発表者名
      小林直也
    • 学会等名
      PF研究会「徹底討論!小角散乱の魅力~基礎・応用・産業利用」
    • 発表場所
      高エネルギー加速器研究機構(茨城県・つくば市)
    • 年月日
      2016-03-30
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] 人工蛋白質ナノブロックによる自己組織化ナノ構造複合体の創製2016

    • 著者名/発表者名
      小林直也
    • 学会等名
      蛋白研セミナー 構造を基盤とする蛋白質科学における未解決問題
    • 発表場所
      東京大学先端科学技術研究センター(東京都・目黒区)
    • 年月日
      2016-03-01
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] 分子間フォールディング二量体超安定化人工タンパク質Super WA20 (SUWA)の創製2015

    • 著者名/発表者名
      木村尚弥, 小林直也, 新井亮一
    • 学会等名
      第38回日本分子生物学会年会 第88回日本生化学会大会合同大会(BMB2015)
    • 発表場所
      神戸ポートアイランド(兵庫県・神戸市)
    • 年月日
      2015-12-01
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
  • [学会発表] 人工蛋白質ナノブロック(PN-Block)による自己組織化ナノ構造複合体の創出2015

    • 著者名/発表者名
      小林直也, 木村尚弥, 新井亮一
    • 学会等名
      第38回日本分子生物学会年会 第88回日本生化学会大会合同大会(BMB2015)
    • 発表場所
      神戸ポートアイランド(兵庫県・神戸市)
    • 年月日
      2015-12-01
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] ナノ構造複合体のスマートプロテインデザイン:人工設計蛋白質を用いた蛋白質ナノブロックの開発及び超安定化2015

    • 著者名/発表者名
      小林直也, 木村尚弥, 新井亮一
    • 学会等名
      第67回日本生物工学会大会
    • 発表場所
      城山観光ホテル(鹿児島県・鹿児島市)
    • 年月日
      2015-10-26
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] 人工蛋白質ナノブロック(PN-Block)による自己組織化ナノ構造複合体の創出2015

    • 著者名/発表者名
      小林直也, 新井亮一
    • 学会等名
      2015年度 日本生物工学会中部支部例会
    • 発表場所
      名古屋大学(愛知県・名古屋市)
    • 年月日
      2015-09-04
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
  • [学会発表] ドメインスワップ二量体人工蛋白質を用いた蛋白質ナノブロックによる人工蛋白質複合体の創出2015

    • 著者名/発表者名
      小林直也,新井亮一
    • 学会等名
      第15回日本蛋白質科学会年会
    • 発表場所
      あわぎんホール(徳島県・徳島市)
    • 年月日
      2015-06-24
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] ドメインスワップ人工蛋白質タンデムWA20による自己組織的ナノ構造複合体の創製と解析2015

    • 著者名/発表者名
      稲野紘一, 小林直也, 古賀(巽)理恵, 古賀信康, Michael. H. Hecht, 佐藤高彰, 新井亮一
    • 学会等名
      第15回日本蛋白質科学会年会
    • 発表場所
      あわぎんホール(徳島県・徳島市)
    • 年月日
      2015-06-24
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
  • [学会発表] 超安定化ドメインスワップ二量体人工タンパク質Super WA20 (SUWA)の創製2015

    • 著者名/発表者名
      木村尚弥, 小林直也, 古賀(巽)理恵, 古賀信康, 新井亮一
    • 学会等名
      第15回日本蛋白質科学会年会
    • 発表場所
      あわぎんホール(徳島県・徳島市)
    • 年月日
      2015-06-24
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
  • [学会発表] 小角X線溶液散乱法によるユビキチン分子の静的構造及び重合過程の解析2015

    • 著者名/発表者名
      稲野紘一, 小林直也, 新井亮一, 佐藤高彰
    • 学会等名
      第15回日本蛋白質科学会年会
    • 発表場所
      あわぎんホール(徳島県・徳島市)
    • 年月日
      2015-06-24
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
  • [学会発表] ドメインスワップ二量体人工蛋白質WA20を利用した蛋白質ナノブロックによる人工蛋白質複合体構造の創製2015

    • 著者名/発表者名
      小林直也, 柳瀬慶一,佐藤高彰, Michael H. Hecht, 新井亮一
    • 学会等名
      第79回日本生化学会中部支部例会・シンポジウム
    • 発表場所
      信州大学旭総合研究棟(長野県・松本市)
    • 年月日
      2015-05-23
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
  • [学会発表] ドメインスワップ人工蛋白質タンデムWA20による自己組織的ナノ構造複合体の創製と解析2015

    • 著者名/発表者名
      稲野紘一, 小林直也, 古賀(巽)理恵, 古賀信康, Michael. H. Hecht, 佐藤高彰, 新井亮一
    • 学会等名
      第79回日本生化学会中部支部例会・シンポジウム
    • 発表場所
      信州大学旭総合研究棟(長野県・松本市)
    • 年月日
      2015-05-23
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
  • [学会発表] 超安定化ドメインスワップ二量体人工タンパク質Super WA20(SUWA)の創製2015

    • 著者名/発表者名
      木村尚弥, 小林直也, 古賀(巽)理恵, 古賀信康, 新井亮一
    • 学会等名
      第79回日本生化学会中部支部例会・シンポジウム
    • 発表場所
      信州大学旭総合研究棟(長野県・松本市)
    • 年月日
      2015-05-23
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
  • [学会発表] ドメインスワップ二量体人工タンパク質を利用した蛋白質ナノブロックによる自 己組織化ナノ構造の創製2014

    • 著者名/発表者名
      小林直也,柳瀬慶一,佐藤高彰,Michael H. Hecht,新井亮一
    • 学会等名
      信州大学農学部バイオサイエンス若手研究会第4回シンポジウム
    • 発表場所
      信州大学農学部(長野県上伊那郡南箕輪)
    • 年月日
      2014-12-17
    • 関連する報告書
      2014 実績報告書
  • [学会発表] デノボタンパク質WA20を利用したナノブロックによる自己組織化ナノ構造の創製2014

    • 著者名/発表者名
      小林直也,柳瀬慶一,佐藤高彰,Michael H. Hecht,新井亮一
    • 学会等名
      第37回日本分子生物学会年会
    • 発表場所
      パシフィコ横浜(神奈川県横浜市)
    • 年月日
      2014-11-25 – 2014-11-27
    • 関連する報告書
      2014 実績報告書
  • [学会発表] 小角X線散乱法による溶液中におけるユビキチンの静的構造解析2014

    • 著者名/発表者名
      稲野 紘一、柳瀬 慶一、小林 直也、新井 亮一、佐藤高彰
    • 学会等名
      第37回日本分子生物学会年会
    • 発表場所
      パシフィコ横浜(神奈川県横浜市)
    • 年月日
      2014-11-25 – 2014-11-27
    • 関連する報告書
      2014 実績報告書
  • [学会発表] ドメインスワップ二量体人工蛋白質 WA20 を利用したタンパク質ナノブロックによる自己組織化ナノ構造の創製2014

    • 著者名/発表者名
      小林直也,柳瀬慶一,佐藤高彰,Michael H. Hecht,新井亮一
    • 学会等名
      「細胞を創る」研究会 7.0
    • 発表場所
      東京大学弥生キャンパス 弥生講堂 一条ホール/アネックス(東京都文京区)
    • 年月日
      2014-11-13 – 2014-11-14
    • 関連する報告書
      2014 実績報告書
  • [学会発表] Self-assembling nano-architectures created from a building block using de novo protein WA202014

    • 著者名/発表者名
      Naoya Kobayashi, Keiichi Yasase, Takaaki Sato, Michael H. Hecht and Ryoichi Arai
    • 学会等名
      The International Symposium on Fiber Science and Technology 2014
    • 発表場所
      Big Sight Tokyo Fashion Town Hall(東京都江東区)
    • 年月日
      2014-09-28 – 2014-10-01
    • 関連する報告書
      2014 実績報告書
  • [学会発表] Self-Assembling Nano-Architectures Created from a Building Block Using De Novo Protein WA202014

    • 著者名/発表者名
      Naoya Kobayashi, Keiichi Yasase, Takaaki Sato, Michael H. Hecht and Ryoichi Arai
    • 学会等名
      第8回バイオ関連化学シンポジウム
    • 発表場所
      岡山大学 津島キャンパス(岡山県岡山市)
    • 年月日
      2014-09-11 – 2014-09-13
    • 関連する報告書
      2014 実績報告書
  • [学会発表] Self-assembling nano-architectures created from building blocks using de novo protein WA202014

    • 著者名/発表者名
      Naoya Kobayashi, Keiichi Yasase, Takaaki Sato, Michael H. Hecht and Ryoichi Arai
    • 学会等名
      第14回日本蛋白質科学会年会
    • 発表場所
      ワークピア横浜/横浜産貿ホール マリネリア(神奈川県横浜市)
    • 年月日
      2014-06-25 – 2014-06-27
    • 関連する報告書
      2014 実績報告書
  • [備考] 人工タンパク質ナノブロックにより自己組織化ナノ構造創出に成功

    • URL

      http://www.shinshu-u.ac.jp/institution/iccer/topics/iccer/post-21.html

    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
  • [備考] ナノブロック「分子技術」を開発

    • URL

      http://www.shinshu-u.ac.jp/faculty/textiles//news/2015/09/68838.html

    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
  • [産業財産権] ドメインスワップ二量体人工タンパク質2015

    • 発明者名
      新井亮一,木村尚弥,小林直也
    • 権利者名
      信州大学
    • 産業財産権種類
      特許
    • 産業財産権番号
      2015-103357
    • 出願年月日
      2015-05-21
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書

URL: 

公開日: 2015-01-22   更新日: 2024-03-26  

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