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シグナル伝達系ネットワークのプロテオミクスとインフォマティクス

研究課題

研究課題/領域番号 15014225
研究種目

特定領域研究

配分区分補助金
審査区分 生物系
研究機関徳島大学

研究代表者

谷口 寿章  徳島大学, 分子酵素学研究センター, 教授 (10257636)

研究分担者 藤原 和子  徳島大学, 分子酵素学研究センター, 助教授 (20108880)
小西 博昭  徳島大学, 分子酵素学研究センター, 助教授 (40252811)
池田 和子  徳島大学, 分子酵素学研究センター, 助手 (10108863)
山内 英美子  徳島大学, 分子酵素学研究センター, 助手 (50332292)
松崎 英樹  理化学研究所, 翻訳後修飾による動的調節機構研究チーム, 連携研究員 (30392129)
岡田 ひとみ  理化学研究所, 翻訳後修飾による動的調節機構研究チーム, 連携研究員
研究期間 (年度) 2003 – 2004
研究課題ステータス 完了 (2004年度)
配分額 *注記
50,600千円 (直接経費: 50,600千円)
2004年度: 25,600千円 (直接経費: 25,600千円)
2003年度: 25,000千円 (直接経費: 25,000千円)
キーワードプロテオミクス / 質量分析 / シグナル伝達 / インフォマティクス / プロテオーム / タンパク質間相互作用 / 蛋白質間相互作用
研究概要

本研究においては、1)プロテオミクス・ファシリティの整備を行い、2)枯草菌や出芽酵母、分裂酵母、ブフネラなどの微生物、高等真核生物の神経細胞、内皮細胞などについて、プロテオーム解析を行った。また、3)質量分析法を用いたプロテオームのディファレンシャル解析を開発し、ちん藻Synecocystis sp.PCC 6803の光強度により発現量の変化が見られるタンパク質を明らかにした。また4)細胞内小器官(オルガネラ)の単離精製法を検討しペルオキシソームを単離する方法を確立した。その中で数個の新規タンパク質を見出したが、このうちひとつは分子シャペロンとしての機能を持つLonプロテアーゼのペルオキシソーム特異的アイソザイムであることを発見した。また、5)三連四重極型質量分析計のペアレント・スキャン法を用いた、リン酸化ペプチドの特異的検出法を確立した。プロテインキナーゼCのδアイソフォーム(以下PKC・)の細胞内における(in vivo)リン酸化部位を解析し、少なくとも6カ所のリン酸化部位が同定され、酸化的ストレスにより3カ所のチロシンが、刺激依存的にリン酸化されることを明らかにした。EGF受容体下流のシグナル伝達に注目し、抗ホスホチロシン抗体を結合したカラムによりチロシンリン酸化されたタンパク質とそれらに結合するタンパク質を同定した。その結果およそ150種類のタンパク質が同定されたが、その多くは未知のタンパク質であった。6)プロテオーム解析により得られた大規模なタンパク質データをゲノム配列にマップし、新規遺伝子や従来のアノテーションの誤りなどを見出した。7)シグナル伝達系関連のタンパク質について複合体の立体構造を明らかにすることで、翻訳後修飾が関与するタンパク質間相互作用の調節機構を明らかにした。

報告書

(3件)
  • 2004 実績報告書   研究成果報告書概要
  • 2003 実績報告書
  • 研究成果

    (23件)

すべて 2005 2004 2003 2002 その他

すべて 雑誌論文 (20件) 文献書誌 (3件)

  • [雑誌論文] Proteomic analysis revealed a novel synaptic proline-rich membrane protein (PRR7) associated with PSD-95 and NMDA receptor.2005

    • 著者名/発表者名
      Murata, Y.
    • 雑誌名

      Biochem. Biophys. Res. Commun. 327

      ページ: 183-191

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2004 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Rab18 localizes to lipid droplets and induces their close apposition to the endoplasmic reticulum-derived membrane.2005

    • 著者名/発表者名
      Ozeki, S.
    • 雑誌名

      J. Cell Sci. 118

      ページ: 2601-2611

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2004 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Crystal Structure of Human T-protein of Glycine Cleavage System at 2.0 A° Resolution and its Implication for Understanding Non-ketotic Hyperglycinemia.2005

    • 著者名/発表者名
      Okamura-Ikeda, K.
    • 雑誌名

      J. Mol. Biol. 351

      ページ: 1146-1159

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2004 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Proteomic analysis of sera from hepatocellular carcinoma patients after radiofrequency ablation treatment.2005

    • 著者名/発表者名
      Kawakami, T.
    • 雑誌名

      Proteomics. 5

      ページ: 4287-4295

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2004 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Proteomic analysis revealed a novel synaptic proline-rich membrane protein (PRR7) associated with PSD-95 and NMDA receptor.2005

    • 著者名/発表者名
      Murata, Y.
    • 雑誌名

      Biochem.Biophys.Res.Commun. 327

      ページ: 183-191

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2004 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Rab 18 localizes to lipid droplets and induces their close apposition to the endoplasmic reticulum-derived membrane.2005

    • 著者名/発表者名
      Ozeki, S.
    • 雑誌名

      J.Cell Sci. 118

      ページ: 2601-2611

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2004 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Crystal Structure of Human T-protein of Glycine Cleavage System at 2.0 A° Resolution and its Implication for Understanding Non-ketotic Hyperglycinemia.2005

    • 著者名/発表者名
      Okamura-Ikeda, K.
    • 雑誌名

      J.Mol.Biol. 351

      ページ: 1146-1159

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2004 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Proteomic analysis of sera from hepatocellular carcinoma patients after radiofrequency ablation treatment.2005

    • 著者名/発表者名
      Kawakami, T.
    • 雑誌名

      Proteomics 5

      ページ: 4287-4295

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2004 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Proteomic analysis revealed a novel synaptic proline-rich membrane protein (PRR7) associated with PSD-95 and NMDA receptor.2005

    • 著者名/発表者名
      Murata Y
    • 雑誌名

      B.B.R.C 327

      ページ: 183-183

    • 関連する報告書
      2004 実績報告書
  • [雑誌論文] Crystal structure of a myristoylated CAP-23/NAP-22 N-terminal domain complexed with Ca(2+)/calmodulin.2004

    • 著者名/発表者名
      Matsubara, M.
    • 雑誌名

      EMBO J. 23

      ページ: 712-718

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2004 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Proteomic Analysis of Rat Liver Peroxisome.2004

    • 著者名/発表者名
      Kikuchi, M.
    • 雑誌名

      J. Biol. Chem. 279

      ページ: 1-428

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2004 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Direct association with inner centromere protein (INCENP) activates the novel chromosomal passenger protein, Aurora-C.2004

    • 著者名/発表者名
      Li, X
    • 雑誌名

      J. Biol. Chem. 279

      ページ: 47201-47211

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2004 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Crystal structure of a myristoylatedCAP-23/NAP-22 N-terminal domain complexed with Ca(2+)/calmodulin.2004

    • 著者名/発表者名
      Matsubara, M.
    • 雑誌名

      EMBO J. 23

      ページ: 712-718

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2004 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Proteomic Analysis of Rat Liver Peroxisome.2004

    • 著者名/発表者名
      Kikuchi, M.
    • 雑誌名

      J.Biol.Chem 279

      ページ: 1-428

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2004 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Direct association with inner centromere protein (INCENP) activates the novel chromosomal passenger protein, Aurora-c.2004

    • 著者名/発表者名
      Li, X.
    • 雑誌名

      J.Biol.Chem. 279

      ページ: 47201-47211

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2004 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Direct association with inner centromere protein (INCENP) activates the novel chromosomal passenger protein, Aurora-C.2004

    • 著者名/発表者名
      Li X
    • 雑誌名

      J.Bio.Chem 279

      ページ: 47201-47201

    • 関連する報告書
      2004 実績報告書
  • [雑誌論文] Crystal structure of MARCKS calmodulin-binding domain peptide complexed with Ca2+/Calmodulin.2003

    • 著者名/発表者名
      Yamauchi, E.
    • 雑誌名

      Nature Struct. Biol. 10

      ページ: 226-231

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2004 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Crystal structure of MARCKS calmodulin-binding domain peptide complexed with Ca2+/Calmodulin.2003

    • 著者名/発表者名
      Yamauchi, E.
    • 雑誌名

      Nature Struct.Biol. 10

      ページ: 226-231

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2004 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Phosphorylation of microtubule- associated protein tau by Ca2+/Calmodulin-activated protein kinase II in its tubulin binding sites.2002

    • 著者名/発表者名
      Yamamoto, H.
    • 雑誌名

      Archiv. Biochem. Biophys. 408

      ページ: 255-262

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2004 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Phosphorylation of microtubule-associated protein tau by Ca2+/Calmodulin-activated protein kinase II in its tubulin binding sites.2002

    • 著者名/発表者名
      Yamamoto, H.
    • 雑誌名

      Archiv.Biochem.Biophys. 408

      ページ: 255-262

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2004 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Matsubara M: "Crystal structure of a myristoylated CAP-23/NAP-22 N-terminal domain complexed with Ca(2+)/calmodulin"EMBO J. 23. 712-718 (2004)

    • 関連する報告書
      2003 実績報告書
  • [文献書誌] Miki Kikuch: "Proteomic Analysis of Rat Liver Peroxisome : PRESENCE OF PEROXISOME-SPECIFIC ISOZYME OF LON PROTEASE"J.Biol.Chem. 279. 421-428 (2004)

    • 関連する報告書
      2003 実績報告書
  • [文献書誌] 谷口 寿章: "最新 プロテオミクス実験プロトコール"秀潤社. 190 (2004)

    • 関連する報告書
      2003 実績報告書

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公開日: 2003-04-01   更新日: 2018-03-28  

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