| 研究課題/領域番号 |
15032207
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| 研究種目 |
特定領域研究
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 審査区分 |
生物系
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| 研究機関 | 東京大学 |
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研究代表者 |
南 康文 東京大学, 大学院・理学系研究科, 科学技術振興特任教員(特任教授) (40181953)
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| 研究分担者 |
篠崎 文夏 東京大学, 大学院・理学系研究科, 科学技術振興特任研究員 (00359647)
寺澤 和也 東京大学, 大学院・理学系研究科, 科学技術振興特任教員 (00361569)
吉松 勝彦 東京大学, 大学院・理学系研究科, 科学技術振興特任教員 (70376531)
田角 聡志 東京大学, 大学院・理学系研究科, 科学技術振興特任研究員(常勤形態) (90359646)
寺澤 和哉 東京大学, 大学院・理学系研究科, 科学技術振興特任教員(常勤形態)
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| 研究期間 (年度) |
2003 – 2004
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| 研究課題ステータス |
完了 (2004年度)
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| 配分額 *注記 |
8,400千円 (直接経費: 8,400千円)
2004年度: 4,200千円 (直接経費: 4,200千円)
2003年度: 4,200千円 (直接経費: 4,200千円)
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| キーワード | Hsp90 / Cdc37 / 分子シャペロン / プロテアソーム活性化因子 / PA28 |
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| 研究概要 |
(1)Hsp90βの遺伝子を二つノックアウトしたDT40細胞(βnull)のα遺伝子を一つ破壊したところ(以下、α+/-βnull)生育温度である39℃における生育速度が、野生株やβnull株に比べて顕著に低下していた。
(2)α+/-βnull株は43℃における生育に関しても、野生株やβnull株に比べて顕著に低下していた。しかし、熱ショック応答について、熱ショック因子であるHsf3の活性化に伴うリン酸化を調べたところ、α+/-βnull株は野生株と同等のリン酸化及びattenuationによる脱リン酸化が認められ、Hsp70の誘導発現についても遜色なかった。
(3)α遺伝子を一つノックアウトした細胞(α+/-β+/+)を作製し、解析したところ、39℃及び43℃における生育がα+/-βnull株と同程度にまで低下していた。
(4)Cdc37を、Raf-1のキナーゼ領域と共にCos7細胞に発現させ、結合領域を探る実験を行った結果、Cdc37のN領域であるとこれまで報告されていたのとは異なり、Cdc37のM領域に結合することが判明した。
(5)Cdc37はダイマーでHsp90に結合することが報告されていたが、キナーゼ領域が存在しないと、一分子のCdc37しかHsp90(ダイマー)には結合せず、キナーゼ領域(即ち、基質)が存在する場合に限り、Cdc37二分子がキナーゼとHsp90と共に複合体を形成することが分かり、キナーゼ分子の成熟過程におけるHsp90とCdc37の役割を探る上で重要な知見が得られた。
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