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クロマチン構造変換因子SWI/SNFによる幹細胞の自己複製制御

研究課題

研究課題/領域番号 15039209
研究種目

特定領域研究

配分区分補助金
審査区分 生物系
研究機関東京大学

研究代表者

箕口 滋  東京大学, 医科学研究所, 助手 (60322757)

研究分担者 伊庭 英夫  東京大学, 医科学研究所, 教授 (60111449)
研究期間 (年度) 2003 – 2004
研究課題ステータス 完了 (2004年度)
配分額 *注記
4,400千円 (直接経費: 4,400千円)
2004年度: 2,200千円 (直接経費: 2,200千円)
2003年度: 2,200千円 (直接経費: 2,200千円)
キーワード多能性幹細胞 / ES細胞 / MSCV / MLV / レトロウイルスベクター / DNAメチル化 / 自己複製 / 原始外胚葉 / 細胞分化 / クロマチン / SWI / SNF複合体 / Brm遺伝子 / BRG1遺伝子
研究概要

本研究では多能性や可塑性など幹細胞の柔軟な性質を支える分子基盤を解明するために、そこにおける遺伝子制御の特異性を明らかにすることを目指している。ここでは特にマウス白血病ウイルス由来のMLVベクターがマウスES細胞やEC細胞など未分化な幹細胞において不活性化される現象に着目してその分子機構の解明を試みている。MLVベクターを改変したMSCVベクターはES細胞において発現が許容されるが、長期間培養中に漸次発現が失われることが知られている。本年度は、このMSCVにおける発現抑制機構の詳細な解析を行い、レトロウイルスベクターの幹細胞におけるエピジェネティカルな制御について探究した。Cell Sorterを用いた発現解析に依り、ES細胞におけるMSCVの発現抑制は、発現強度が徐々に低下することによって引き起こされているのではなく、All-or-Noneに発現を突然消失していることを確認した。次に、発現抑制の原因となる分子機構の探索を行った。Bisulfite Sequence法やGenomic Southern法によってProvirus DNAのCpGメチル化が発現の抑制と極めて高い相関があることを見い出した。また、Provirus領域のヒストン修飾の関与も検討した。ヒストンH3・H4のリジン及びアルギニン残基特異的アセチル化及びメチル化修飾抗体を数多く用いてProvirusのLTR領域のクロマチン免疫沈降実験を行ったが、試みた全ての抗体について発現抑制との間に強い関連性を見い出すことは出来なかった。また、重感染実験を行い同一細胞内の異なるprovirusの発現抑制は互いに独立であることを見い出した。このことからpromoter-specificな転写抑制がMSCVの幹細胞における発現抑制の原因であることが示唆された。以上の結果から本年度は、Provirus DNAのメチル化がMSCVの発現抑制に中心的な役割を果たしていることを示すことが出来たと考えられる。

報告書

(2件)
  • 2004 実績報告書
  • 2003 実績報告書
  • 研究成果

    (8件)

すべて 2005 2004 その他

すべて 雑誌論文 (2件) 文献書誌 (6件)

  • [雑誌論文] The Brm gene suppressed at the post-transcriptional level in various human cell lines is induced btransient HDAC inhibitor treatment, which exhibits anti-oncogenic potential.2005

    • 著者名/発表者名
      Yamamichi, N. et al.
    • 雑誌名

      Oncogene (発表予定)

    • 関連する報告書
      2004 実績報告書
  • [雑誌論文] Bruton's tyrosine kinase (Btk) enhances transcriptional co-activation activity of BAM11, a Btk-associated molecule of a subunit of SWI/SNF complexes.2004

    • 著者名/発表者名
      Hirano, M. et al.
    • 雑誌名

      Int.Immunol. 16・5

      ページ: 747-757

    • 関連する報告書
      2004 実績報告書
  • [文献書誌] Minoguchi, S. et al.: "Differential control of the NIMA-related kinases, Nek6 and Nek7, by serum stimulation."Biochem Biophys Res Commun.. 301. 899-906 (2003)

    • 関連する報告書
      2003 実績報告書
  • [文献書誌] Minoguchi, M. et al.: "STAP-2/BKS, an adaptor/docking protein, modulates STAT3 activation in acute-phase response through its YXXQ motif."J Biol Chem.. 278. 11182-11189 (2004)

    • 関連する報告書
      2003 実績報告書
  • [文献書誌] Joo, A.et al.: "STAT3 and MITF cooperatively induce cellular transformation through upregulation of c-fos expression."Oncogene. 23. 726-734 (2003)

    • 関連する報告書
      2003 実績報告書
  • [文献書誌] Yamamichi-Nishina, M. et al.: "SW13 cells can transition between two distinct subtypes by switching expression of BRG1 and Brm genes at the post-transcriptional level,"J Biol Chem.. 278. 7422-7430 (2003)

    • 関連する報告書
      2003 実績報告書
  • [文献書誌] Iba, H.et al.: "SWI/SNF chromatin remodelling complex and retroviral gene silencing."Rev Abed Virol.. 13. 99-110 (2003)

    • 関連する報告書
      2003 実績報告書
  • [文献書誌] Shimizu, Y. et al.: "Kinetics of v-src-induced epithelial-mesenchymal transition in developing glandular stomach."Oncogene. 22. 884-893 (2003)

    • 関連する報告書
      2003 実績報告書

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公開日: 2003-04-01   更新日: 2018-03-28  

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