| 研究課題/領域番号 |
15209058
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| 研究種目 |
基盤研究(A)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
小児外科学
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| 研究機関 | 広島大学 |
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研究代表者 |
檜山 英三 広島大学, 自然科学研究支援開発センター, 教授 (00218744)
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| 研究分担者 |
高橋 規郎 放射線影響研究所, 遺伝学部, 室長(研究職) (40333546)
檜山 桂子 広島大学, 原爆放射線医科学研究所, 助教授 (60253069)
京 哲 金沢大学, 大学院・医学系研究科, 講師 (50272969)
山岡 裕明 広島大学, 病院・助手 (90311810)
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| 研究期間 (年度) |
2003 – 2004
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| 研究課題ステータス |
完了 (2004年度)
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| 配分額 *注記 |
45,500千円 (直接経費: 35,000千円、間接経費: 10,500千円)
2004年度: 10,530千円 (直接経費: 8,100千円、間接経費: 2,430千円)
2003年度: 34,970千円 (直接経費: 26,900千円、間接経費: 8,070千円)
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| キーワード | 神経芽細胞腫 / マイクロアレイ / CGHアレイ / 悪性度 / カスパーゼ / メチレーション / リスク分類 / オーダーメイド治療 / hTERT / 層別化 |
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| 研究概要 |
神経芽細胞腫検体のうち予後が明らかな322例を対象に検討した。アレイCGH解析では、MYCN増幅や1・3・4・11・14・17番染色体に変化を認め、これらで簡易アレイCGHを作製し検討した結果11qの部分欠失は独立した予後不良因子であった。胎児脳cDNA library由来cDNAアレイ、全ゲノムのオリゴアレイ及びマイクロソート解析で抽出した182遺伝子を対象に、発現解析簡易アレイを作製し解析すると、予後不良例が95%の確率で層別化できた。また、また、hTERTおよびCaspase 8,9のプロモーターのCpG領域のメチル化を識別する簡易アレイを作製し120例で検討したところ、Caspase 8の2箇所のメチル化が予後と有意に相関し、hTERT及びCaspase 9は各々6、5箇所に変動が見られたが、予後と相関はなかった。腫瘍内にheterogeneityのある9例、化学療法後摘出の30例、多発11例,再発例8例、退縮,分化が確認された6例中で、腫瘍部位をマイクロダイセクションし、初回原発巣と比較したところ、遺伝子異常が加わった12例は全て予後不良であったが、多発例、再発例、分化・退縮例は遺伝子変化やメチル化の変動はなく予後良好であった。神経芽腫細胞株12株に、テロメラーゼ阻害剤GRN163やhTERTに対するsiRNAを投与で、5株、7株に活性抑制と細胞死、増殖抑制がみられ、細胞増殖シグナルの発現低下とアポトーシス関連遺伝子の発現上昇を認めた。また、レチノイドにて分化誘導する3株ではMYCN発現の低下とテロメラーゼ活性の消失、アポトーシスと神経分化の関連遺伝子の発現上昇が見られた。
以上から、神経芽細胞腫の腫瘍特性は、簡易発現解析アレイとCGHアレイにて把握可能となった。また、治療への反応性、分化誘導療法の適応などの判別も可能で、有用なツールと考えられた。
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