| 研究課題/領域番号 |
15370023
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| 研究種目 |
基盤研究(B)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
植物生理・分子
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| 研究機関 | 奈良先端科学技術大学院大学 |
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研究代表者 |
橋本 隆 奈良先端科学技術大学院大学, バイオサイエンス研究科, 教授 (80180826)
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| 研究期間 (年度) |
2003 – 2005
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| 研究課題ステータス |
完了 (2005年度)
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| 配分額 *注記 |
14,000千円 (直接経費: 14,000千円)
2005年度: 3,300千円 (直接経費: 3,300千円)
2004年度: 4,400千円 (直接経費: 4,400千円)
2003年度: 6,300千円 (直接経費: 6,300千円)
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| キーワード | MAPキナーゼ / フォスファターゼ / 微小管 / ねじれ / アラビドプシス / 細胞伸張 / 変異株 / 細胞伸長 |
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| 研究概要 |
微小管重合阻害剤プロピザミドに対して高感受性を示すアラビドプシス突然変異株propyzamide hypersensiteive 1-1(phs1-1)を単離し、PHS1がmitogen acitivated protein kinase(MAPK) phosphataseに分類されるタンパク質をコードすることが明らかにした。また、phs1-1ではPHS1 phosphataseのアミノ末端部分のMAPK相互作用領域の保存されたアミノ酸が置換されており、dominant negativeに機能する変異である。
複数のT-DNA挿入株を解析したところ、これらの株ではPHS1タンパク質は蓄積していないにもかかわらず、ホモ植物体は野生型と同様に生育し、形態も全く変化がなかった。さらに、phs1-1のサプレッサー変異株を多数単離したところ、その内の7系統がPHS1遺伝子内の機能喪失型変異であった。これらの結果より、PHS1ヌル変異のホモ個体は顕著な表現型がないことが判明した。おそらく機能が類似する他のphosphataseがPHS1活性の欠損を相補していると考えられる。
上記のサプレッサースクリーニングでは、PHS1遺伝子座とはことなる遺伝子座の変異(extragenic suppressor)も多数得られた。これらのいくつかの系統はチューブリンの変異であることが判明し、残りの変異系統について原因遺伝子を同定すべく、マッピングを行っている。
また、PHS1遺伝子の様式をPHS1ゲノム領域にGUSレポーター遺伝子を挿入した形質転換植物体を用いて解析したところ、PHS1はすべての細胞に発現しているが、伸長が盛んな領域で強い発現がみられた。GFP-PHS1の細胞内局在は主に細胞質であったが、phs1-1変異型タンパク質は細胞質にドット状の凝集した局在を示した。
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