| 研究課題/領域番号 |
15380126
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| 研究種目 |
基盤研究(B)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
水産学一般
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| 研究機関 | 北海道大学 |
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研究代表者 |
嵯峨 直恆 北海道大学, 大学院・水産科学研究院, 教授 (10231333)
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| 研究分担者 |
安井 肇 北海道大学, 大学院・水産科学研究院, 助教授 (00200494)
水田 浩之 北海道大学, 大学院・水産科学研究院, 助教授 (00250499)
北出 幸広 北海道大学, 大学院・水産科学研究院, 寄附講座教員 (90399999)
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| 研究期間 (年度) |
2003 – 2005
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| 研究課題ステータス |
完了 (2005年度)
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| 配分額 *注記 |
13,700千円 (直接経費: 13,700千円)
2005年度: 3,600千円 (直接経費: 3,600千円)
2004年度: 4,400千円 (直接経費: 4,400千円)
2003年度: 5,700千円 (直接経費: 5,700千円)
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| キーワード | スサビノリ / 海苔ゲノム / EST / 生活環 / 単胞子 / アラントイン |
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| 研究概要 |
本研究により得られた新たな知見等は以下のとおりである。
1.単胞子未形成時よりも単胞子形成時に発現量が増加する遺伝子の探索について
cDNAマクロアレイ法による1次スクリーニングと、RT-PCR法またはノーザン解析による2次スクリーニングを行った結果、代謝に関わる酵素をコードする8個の遺伝子のほか配偶体特異的な発現パタンを示す機能未知の遺伝子が見つかった。上記8遺伝子については、cDNA全長配列を決定し、DDBJへの登録手続きを行った(AB127044-AB127051)。
2.スサビノリ遺伝子の発現解析手法と内部基準の開発について
(1)エロンゲーションファクター1α遺伝子のリボプローブを用いて、配偶体世代の発芽体におけるホールマウントin situハイブリダイゼーション法を開発した。
(2)差次的発現をする遺伝子の発現解析における新たな内部基準(アクチン関連タンパク質4ホモログ)を開発した。本遺伝子の演繹アミノ酸配列中には推定のbipartite型核局在シグナル(NLS)とアクチンモチーフが見つかった。本遺伝子の発現レベルは、生活環の4つの発生段階で有意に変化せず、従来型アクチンよりも低かった。
3.化学物質による単胞子形成誘導法について
10mMのアラントインを含む培地で栄養成長したスサビノリ配偶体を培養することにより発芽能力のある単胞子様細胞が得られることがわかった。また、この処理により本来単胞子を介した無性生殖をしない種(ウップルイノリ)でも同様の細胞が得られることがわかった。
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