| 研究課題/領域番号 |
15390024
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| 研究種目 |
基盤研究(B)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
生物系薬学
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| 研究機関 | 武庫川女子大学 |
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研究代表者 |
市川 厚 武庫川女子大学, 薬学部, 教授 (10025695)
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| 研究分担者 |
扇間 昌規 武庫川女子大学, 薬学部, 教授 (90098533)
杉本 幸彦 京都大学, 薬学研究科, 助教授 (80243038)
田中 智之 京都大学, 薬学研究科, 助手 (40303846)
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| 研究期間 (年度) |
2003 – 2004
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| 研究課題ステータス |
完了 (2004年度)
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| 配分額 *注記 |
15,300千円 (直接経費: 15,300千円)
2004年度: 7,400千円 (直接経費: 7,400千円)
2003年度: 7,900千円 (直接経費: 7,900千円)
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| キーワード | マスト細胞 / 細胞接着 / プロスタグランジンE2 / マトリックス / cAMP / Epac / Ca2+ / PGE2 / 細胞外マトリックス / PKA / mastocytoma P-815 / Epac-Rapシグナル / EP4サブタイプ / フィブロネクチン / Ca^<2+> / アレルギー |
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| 研究概要 |
本研究の目的は、マスト細胞が皮膚結合組織や気管支・小腸粘膜組織において細胞外マトリックス(ECM)に接着しているメカニズムを解明するために、マスト細胞の前駆細胞モデル細胞であるmastocytoma P-815 cells(P-815細胞)を用いて、そのECMへの接着に対して、炎症等において局所で産生されているプロスタグランジンE2がどのような役割を果たしているかについて検討することである。研究実施計画に基づき、実験を遂行し、以下の研究成果を得た。
1.P-815細胞は、添加PGE2濃度依存的にECMの一つ、フィブロネクチンへ接着する。この接着反応はPGE2受容体サブタイプのEP4を介して、cAMPをセカンドメッセンジャーとし、PKAの活性化により起こる。このPKAへ依存的な接着反応は、刺激後数時間の潜伏期を経てから発現し、新規タンパク質合成を必要とすることがわかり、該当分子を単離しつつある。
2.PGE2/PKAによりフィブロネクチンと接着したP-815細胞は、PKA非依存的な反応により接着が維持される。この接着は、細胞内Ca2+濃度を低下させるEGTA, BAPTA/AM ester処置、Ca2+チャネルのROCC阻害剤SKF96365で阻害を受けることを発見した。
3.PGE2刺激で接着誘導されるP-815細胞はCaMキナーゼ阻害剤によりフィブロネクチンからの遊離を受ける。接着細胞の細胞内Ca2+濃度は非接着細胞に比して高い。
4.PKA非依存的なシグナルの候補として、Epac(exchange protein directly activated by cAMP)の関与を証明することができた。
以上、本研究の成果により、マスト細胞のPGE2誘導フィブロネクチン接着反応は、初期の接着の惹起期におけるcAMP/PKA反応と後期の接着維持期におけるCa2+/Epac反応から構成されていることが明らかにされた。
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