| 研究課題/領域番号 |
15390399
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| 研究種目 |
基盤研究(B)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
消化器外科学
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| 研究機関 | 九州大学 |
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研究代表者 |
水元 一博 九州大学, 大学病院, 講師 (90253418)
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| 研究分担者 |
永井 英司 九州大学, 大学病院, 助手 (30264021)
田中 雅夫 九州大学, 大学院・医学研究院, 教授 (30163570)
竹中 繁織 九州工業大学, 工学部物質工学科, 教授 (60188208)
井出 利憲 広島大学, 医歯薬総合研究科, 教授 (60012746)
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| 研究期間 (年度) |
2003 – 2005
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| 研究課題ステータス |
完了 (2005年度)
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| 配分額 *注記 |
14,600千円 (直接経費: 14,600千円)
2005年度: 4,100千円 (直接経費: 4,100千円)
2004年度: 4,000千円 (直接経費: 4,000千円)
2003年度: 6,500千円 (直接経費: 6,500千円)
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| キーワード | 膵癌 / テロメラーゼ / ECAチップ / HPA-TRAP / RAS / p53 / テロメアーゼ |
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| 研究概要 |
本研究では、膵液を用いた膵癌診断を高感度に実施するために、新たなテロメラーゼ活性測定法、新たな遺伝子を標的とする膵液中mRNA定量解析、ならびにECA (Electrochemical array)による電気化学的解析の開発を進めた。
Hybridization Protection Assay (HPA法)とTRAP法を組み合わせたHPA/TRAP法は、超高感度のテロメラーゼ活性測定法であり、4時間という短時間で測定可能であり、我々は膵液解析のためにHPA/TRAP法に改良を加え、臨床診断に極めて有用な測定系を確立した(業績6)。また、現在普及しているReal-time PCRとこのTRAP assayを組み合わせて、さらに迅速で定量性のある手法(real-time TRAP)を確立した。この新規の手法はおよそ1時間で解析可能であり、膵液を検査対象とすると膵癌鑑別に有用であった(業績4)。さらに、膵液サンプルからRNAを抽出し、テロメラーゼの調節サブユニットであるhTERT mRNAの定量解析を初めて実現した。この方法は、特に膵癌とIPMNの鑑別に有用であった(業績1)。さらに他の癌関連遺伝子mRNAの定量解析を行った。MUC1とMUC5ACは、膵癌細胞で高い発現があり、膵液中の解析でも膵癌診断に有用であった(業績3)。S100A6の膵液解析では、膵癌の膵非腫瘍性病変との鑑別に有用であった(業績5)。
ECAによる解析では、膵癌切除組織を用いてRAS遺伝子変異解析を行った。その結果ECAチップは、従来法と同程度の高い変異検出力があり、短時間解析系として有用であった(業績2)。
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