| 研究課題/領域番号 |
15390505
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| 研究種目 |
基盤研究(B)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
産婦人科学
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| 研究機関 | 大阪大学 |
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研究代表者 |
木村 正 大阪大学, 医学系研究科, 助手 (90240845)
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| 研究分担者 |
古山 将康 大阪大学, 医学系研究科, 助教授 (00183351)
下屋 浩一郎 大阪大学, 医学系研究科, 助手 (40291950)
筒井 建紀 大阪大学, 医学系研究科, 助手 (00294075)
荻田 和秀 大阪大学, 医学系研究科, 助手 (80379247)
金田 安史 大阪大学, 医学系研究科, 教授 (10177537)
辻江 智子 大阪大学, 医学系研究科, 助手 (50362695)
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| 研究期間 (年度) |
2003 – 2004
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| 研究課題ステータス |
完了 (2004年度)
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| 配分額 *注記 |
12,000千円 (直接経費: 12,000千円)
2004年度: 4,900千円 (直接経費: 4,900千円)
2003年度: 7,100千円 (直接経費: 7,100千円)
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| キーワード | 子宮内膜 / 着床 / 遺伝子導入 / HVJ-Eベクター / NF KappaB / 一過性強制発現 / デコイ / NFKappaB / 生体内一過性遺伝子導入・発現系 / NFkappaβ |
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| 研究概要 |
我々は、まず生体内に高い効率で遺伝子を導入するための試行錯誤を行い、ゼンダイウィルスを不活化しその外殻に外来遺伝子を導入するHVJ-Eベクターが、マウス妊娠子宮内膜に最も高い効率で一過性に遺伝子を導入しうることを報告した(Mol Hum Reprod 2003:9;603)。続いて、着床期に子宮内膜で増加、減少する物質を調べ、多機能転写因子であるNF kappaBが着床期、子宮内膜上皮で活性化されていることを発見、報告した(Am J Reprod Immunol 2004:51;16)。しかし、NF kappaBシステムのノックアウトマウスの報告によると、胎性致死、あるいは正常表現型となり、NF kappaBの着床における生理的意義は不明であった。そこでNF kappaBの活性化をおさえるI NF kappaB alphaのドミナントネガティブ変異体cDNAをマウス着床期子宮内膜に一過性強制発現させた。すると、NF kappaB活性は対照の半分以下に抑制され、エバンスブルーによる着床部位の判定、その後の胎児発育、分娩日は1日遅れながら正常に経過し、新生児にも何ら影響を与えなかった(BBRC 2004:321;886)。さらに我々は二本鎖DNAデコイをNF kappaB結合コンセンサス配列に対し作成し、このデコイも同様に子宮内膜に導入すると着床を1日遅延させることを確認した(未発表)。これからの研究成果は不妊治療時の最大の問題である着床不全の病態を解析する基礎的知見となる。子宮腔内に安定して遺伝子を胎児に悪影響を及ぼすことなく導入できる本システムは将来の遺伝子治療の有用な手技となりうる。
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