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神経回路形成において細胞接着分子を介した多様な反応を生み出すMAPキナーゼの解析

研究課題

研究課題/領域番号 15500226
研究種目

基盤研究(C)

配分区分補助金
応募区分一般
研究分野 神経解剖学・神経病理学
研究機関筑波大学

研究代表者

志賀 隆  筑波大学, 大学院・人間総合科学研究科, 教授 (50178860)

研究期間 (年度) 2003 – 2004
研究課題ステータス 完了 (2004年度)
配分額 *注記
3,700千円 (直接経費: 3,700千円)
2004年度: 1,400千円 (直接経費: 1,400千円)
2003年度: 2,300千円 (直接経費: 2,300千円)
キーワードMAPキナーゼ / ERK / 細胞接着分子 / 脊髄 / 脊髄神経節 / JNK / p38
研究概要

1.ニワトリ胚脊髄後角細胞における一過性のERK燐酸化の解析
活性型ERKと活性型p38のニワトリ胚脊髄および脊髄神経節における発現を特異的抗体を用いた免疫組織化学法により調べた。その結果、ERKとp38は限局した領域にそれぞれの時間的パターンで発現することが明らかになった。特に、脊髄後角では孵卵7〜9日で一過性にERKの燐酸化が起こっていた。そこで、脊髄後角の単独培養、または脊髄後角と脊髄神経節との組み合わせ培養を行い、脊髄後角細胞のERKの燐酸化に脊髄神経節が必要であることを明らかにした。さらにERKの燐酸化を引き起こす脊髄神経節由来因子を明らかにするために、BDNF、NGF、NT3、substanceP、somatostatin、CGRP、またはL-gluatamateの存在下で脊髄後角を培養したところ、BDNFのみがERKの燐酸化を引き起こすことが示された.
2.脊髄神経節に対する軸索反発作用におけるMAPキナーゼの役割の解析
免疫グロブリンスーパーファミリー細胞接着分子に属するaxonin-1/SC2は、軸索束形成を促進すると同時に、脊索または脊髄腹側部由来の拡散性軸索反発因子の受容体の一員として脊髄神経節ニューロンの軸索伸長の抑制に関与する(Masuda et al.,2000;2004)。このようなaxonin-1/SC2を介した多様な反応におけるMAPキナーゼの役割を解析するために、MAPキナーゼ阻害剤存在下で以下の培養を行なった。阻害剤としては、すべてのMAPキナーゼ(JNK,p38,ERK)を阻害するPD-989589、および各MAPキナーゼ特異的な阻害剤(JNKの阻害剤としてCEP-1347、p38の阻害剤としてSB-203580、ERK1/2の阻害剤としてU-0126)を用いた。神経回路形成期である孵卵5〜8日のニワトリ胚から脊髄神経節を剖出し、脊索または脊髄腹側部と組み合わせ培養を行った。また、脊索由来の軸索反発因子の候補であるコンドロイチン硫酸プロテオグリカンを培地に加えて培養した。培養後に、固定し、神経特異的なチューブリン抗体で神経突起を染色し、MAPキナーゼの効果を解析した。その結果、いずれの場合にも各MAPキナーゼ阻害剤の顕著な効果は認められず、軸索反発機構におけるMAPキナーゼの関与は示されなかった。

報告書

(3件)
  • 2004 実績報告書   研究成果報告書概要
  • 2003 実績報告書
  • 研究成果

    (18件)

すべて 2005 2004 2003 その他

すべて 雑誌論文 (14件) 文献書誌 (4件)

  • [雑誌論文] Chemorepulsions and cell adhesion molecules in patterning initial trajectories of sensory axons2005

    • 著者名/発表者名
      Masuda, T., Shiga, T.
    • 雑誌名

      Neurosci.Res. 51

      ページ: 334-347

    • NAID

      10015451571

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2004 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Developmental regulation of activated ERK expression in the spinal cord and dorsal root ganglion of the chick embryo2005

    • 著者名/発表者名
      Kato, T.他
    • 雑誌名

      Neurosci.Res. 52

      ページ: 11-19

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2004 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Chemorepulsions and cell adhesion molecules in patterning initial trajectories of sensory axons.2005

    • 著者名/発表者名
      Masuda, T., Shiga, T.
    • 雑誌名

      Neurosci.Res. 51

      ページ: 334-347

    • NAID

      10015451571

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2004 実績報告書 2004 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Developmental regulation of activated ERK expression in the spinal cord and dorsal root ganglion of the chick embryo.2005

    • 著者名/発表者名
      Kato, T., Ohtani-Kaneko, R., Ono, K., Okado, N., Shiga, T.
    • 雑誌名

      Neurosci.Res. 52

      ページ: 11-19

    • NAID

      10016475814

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2004 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Developmental regulation of activated ERK expression in the spinal cord and dorsal root ganglion of_the chick embryo.2005

    • 著者名/発表者名
      Kato, T 他
    • 雑誌名

      Neurosci.Res. (印刷中)

    • 関連する報告書
      2004 実績報告書
  • [雑誌論文] An immunohistochemical localization of the 5-HT2A receptor in the developing rat cerebellum.2004

    • 著者名/発表者名
      Maeshima, T.他
    • 雑誌名

      Neurosci.Res. 50

      ページ: 411-417

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2004 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] 発生過程における脊髄神経の投射路形成-神経回路形成の研究から軸索再生の研究へ2004

    • 著者名/発表者名
      志賀 隆
    • 雑誌名

      末梢神経 15

      ページ: 39-46

    • NAID

      10017405991

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2004 実績報告書 2004 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Developmental regulation of notochord-derived repulsion for dorsal root ganglion axons2004

    • 著者名/発表者名
      Masuda, T.他
    • 雑誌名

      Mol.Cell.Neurosci. 25

      ページ: 217-227

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2004 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] An immunohistochemical localization of the 5-HT2A receptor in the developing rat cerebellum.2004

    • 著者名/発表者名
      Maeshima, T., Shiga, T., Ito, R., Okado, N.
    • 雑誌名

      Neurosci.Res. 50

      ページ: 411-417

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2004 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Hassei katei ni okeru sekizui sinkei no toushyaro keisei-sinkei kairo keisei no kenkyu karajikusaku saisei no kenkyu e (In Japanese)2004

    • 著者名/発表者名
      Shiga, T.
    • 雑誌名

      Masshyo Sinkei 15

      ページ: 29-46

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2004 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Developmental regulation of notochord-derived repulsion for dorsal root ganglion axons.2004

    • 著者名/発表者名
      Masuda T, Fukamauchi F, Takeda Y, Fujisawa H, Watanabe K, Okado N, Shiga T
    • 雑誌名

      Mol.Cell.Neurosci. 25

      ページ: 217-227

    • NAID

      120006595082

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2004 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] An immunohistochemical localization of the 5-HT2A receptor in the developing rat cerebellum.2004

    • 著者名/発表者名
      Maeshima, T 他
    • 雑誌名

      Neurosci.Res. 50

      ページ: 411-417

    • 関連する報告書
      2004 実績報告書
  • [雑誌論文] Differential non-target-derived repulsive signals play a critical role in shaping initial axonal growth of dorsal root ganglion neurons2003

    • 著者名/発表者名
      Masuda, T.他
    • 雑誌名

      Dev.Biol. 254

      ページ: 289-302

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2004 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Differential non-target-derived repulsive signals play a critical role in shaping initial axonal growth of dorsal root ganglion neurons.2003

    • 著者名/発表者名
      Masuda, T., Tsuji, H., Taniguchi, M., Yagi, T., Tessier-Lavigne, M., Fujisawa, H., Okado, N., Shiga, T.
    • 雑誌名

      Dev.Biol. 254

      ページ: 289-302

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2004 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Masuda T 他: "Differential non-target-derived repulsive signals play a critical rolein shaping initial axonal growth of dorsal root ganglion neuron"Dev.Biol.. 254. 289-302 (2003)

    • 関連する報告書
      2003 実績報告書
  • [文献書誌] Hara Y 他: "PO mRNA expression incerases during gradual nerve dlongation in adult rats"Exp.Neurol.. 184. 428-435 (2003)

    • 関連する報告書
      2003 実績報告書
  • [文献書誌] Kondoh M 他: "Regulation of dendrite formation of Purkinje cells through serotonin 1A and 2A receptors in culture"Neurosci.Res.. 48. 101-109 (2004)

    • 関連する報告書
      2003 実績報告書
  • [文献書誌] Masuda T 他: "Developmental regulation of notochord-derived repulsion for dorsal root ganglion axons"Mol.Cell.Neurosci.. 25. 217-227 (2004)

    • 関連する報告書
      2003 実績報告書

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公開日: 2003-04-01   更新日: 2016-04-21  

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