| 研究概要 |
本研究では,新規マイクロキャリアとして,ポリ(γ-メチルL-グルタメート)(PMLG)球状粒子にリガンドとしてジアミノエタン(DAE)を化学修飾したPMLG-DAE粒子,架橋ポリ(ε-リジン)(PL)球状粒子および種々のポリカチオン固定化セルロース粒子を細胞増殖用マイクロキャリアとして調製し、通常の細胞培養法を用いて、各々の粒子の付着依存性細胞(マウスL-細胞)に対する細胞増殖能の評価を行った。
1)PMLG-DAE球状粒子上での培養日数に対する細胞増殖率は,アミノ基導入量の低い粒子(0.2および0.5meq/g)において細胞増殖性が高かった。逆にPL球状粒子ではアミノ基含有量の高い粒子(3.7および4.6meq/g)において高い細胞増殖性が見られた。これは細胞増殖性が粒子表面のアミノ基含有量ではなく,アミノ基を含めたマイクロキャリアの表面のpKaも影響しており,その値が培養培地のpH(7.5〜7.7)により近いほど、細胞増殖性も向上すると推測された。
2)ポリカチオン固定化セルロース粒子を細胞増殖用マイクロキャリアとして用いた場合、粒子の帯電アミノ基量は細胞増殖率との相関性が非常に高く、指標として重要であることがわかった。マイクロキャリアの帯電アミノ基量が0.02〜0.05meq/wet-mlで細胞の増殖率は最大値を示し、帯電アミノ基量が過剰量存在する場合では、細胞増殖率は極端に低下することがわかった。
3)種々のカチオン性高分子粒子を細胞増殖用マイクロキャリアとして用いる場合、ポリカチオンの表面構造、化学構造およびpKaの違いにより実際の粒子表面の帯電アミノ基量が異なった。このことが細胞の増殖性に強く反映されることが明らかになった。
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