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ユビキチン-プロテアソーム系タンパク質複合体の形成制御

研究課題

研究課題/領域番号 15580308
研究種目

基盤研究(C)

配分区分補助金
応募区分一般
研究分野 応用分子細胞生物学
研究機関横浜市立大学

研究代表者

川崎 博史  横浜市立大学, 国際総合科学研究科, 准教授 (70169704)

研究分担者 佐々 英徳  千葉大学, 園芸学部, 准教授 (50295507)
研究期間 (年度) 2003 – 2006
研究課題ステータス 完了 (2006年度)
配分額 *注記
3,300千円 (直接経費: 3,300千円)
2006年度: 600千円 (直接経費: 600千円)
2005年度: 500千円 (直接経費: 500千円)
2004年度: 900千円 (直接経費: 900千円)
2003年度: 1,300千円 (直接経費: 1,300千円)
キーワードタンパク質 / プロテオミクス / 生体機能利用 / プロテアソーム / ユビキチン / タンパク質複合体 / 翻訳後修飾 / 蛋白質 / プロテオーム / 生態機能利用 / TAP法
研究概要

細胞内の主要なタンパク質分解経路であるユビキチン-プロテアソーム系は、細胞周期の制御や植物の自家不和合性の発現など、様々な生理機能の調節に関わっている。本研究では、ユビキチン-プロテアソーム系に関係する新たな複合体を単離して形成制御機構を解析することを目的とした。
イネで発見したプロテアソーム19S調節因子サブユニットの重複遺伝子産物の発現量をイネの様々な組織で調べ、組織による19S調節因子のサブユニット構成が異なることを明らかにした。また、酵母20Sプロテアソームのα7サブユニットに関しては、C末端側に位置するセリン残基のリン酸化部位を決定した。プロテアソームのどのサブユニットが翻訳後修飾をうけているか、ほぼ決定した。プロテアソームサブユニットの転写制御因子であり、プロテアソームの構成成分としても同定されている酵母のRPN4と相互作用するタンパク質を単離、同定した。多くのプロテアソームサブユニットと相互作用することが報告されているBud32に関しても、TAP法で相互作用するタンパク質を単離し同定した。Bud32複合体は、Kae1,Cgi121,Gon7を含む4つのタンパク質から出来ていることが明らかになった。これらのタンパク質はいずれも細胞質にも存在するが、核に局在することが明らかにした。Bud32の欠失二倍体株はこれまでに報告されているように、Bipolar buddingではなくランダムな出芽が起こったが、その他のタンパク質の欠失株では、Bipolar buddingが観察された。一倍体では、すべての欠失株でほぼ正常なAxial buddingが観察された。二倍体株からも、TAP法でBud32複合体の単離を試みた。構成タンパク質は、電気泳動では一倍体とほぼ同じような構成を示した。二倍体でもBud32は、同じ複合体を形成し、その機能を発揮すると考えられた。

報告書

(5件)
  • 2006 実績報告書   研究成果報告書概要
  • 2005 実績報告書
  • 2004 実績報告書
  • 2003 実績報告書
  • 研究成果

    (33件)

すべて 2006 2005 2004 2003 その他

すべて 雑誌論文 (26件) 図書 (4件) 文献書誌 (3件)

  • [雑誌論文] Identification of yeast aspartylaminopeptidase gene by purifying and characterizing its product from yeast cells.2006

    • 著者名/発表者名
      Yokoyama, R.
    • 雑誌名

      FEBS J. 273

      ページ: 192-198

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2006 研究成果報告書概要 2005 実績報告書
  • [雑誌論文] A novel approach and protocol for discovering extremely low-abundance proteins in serum2006

    • 著者名/発表者名
      Tanaka, Y.
    • 雑誌名

      Proteomics 6

      ページ: 4845-4888

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2006 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Proteomic search for potential diagnostic markers and therapeutic targets for ovarian clear cell adenocarcinoma2006

    • 著者名/発表者名
      Morita, A.
    • 雑誌名

      Proteomics 6

      ページ: 5880-5890

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2006 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Efficient electroblotting of gel-resolved proteins onto diamond-like carbon-coated plate for protein-chip2006

    • 著者名/発表者名
      Ino, Y.
    • 雑誌名

      J. Electrophoresis 50

      ページ: 33-37

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2006 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Identification of yeast aspartylaminopeptidase gene by purifying and characterizing its product from yeast cells2006

    • 著者名/発表者名
      Yokoyama, R.
    • 雑誌名

      FEBS J. 273

      ページ: 192-198

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2006 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Proteomic search for potential diagnostic markers and therapeutic targets for ovarian clear dell adenocarcinoma2006

    • 著者名/発表者名
      Morita, A.
    • 雑誌名

      Proteomics 6

      ページ: 5880-5890

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2006 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Efficient electroblotting og gel-resolved proteins onto daimond-like carbon-coated plate for protein-chip2006

    • 著者名/発表者名
      Ino, Y.
    • 雑誌名

      J.Electrophoresis 50

      ページ: 33-37

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2006 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] A novel approach and protocol for discovering extremely low-abundance proteins in serum2006

    • 著者名/発表者名
      Y.Tanaka
    • 雑誌名

      Proteomics 6

      ページ: 4845-4855

    • 関連する報告書
      2006 実績報告書
  • [雑誌論文] Proteomic search for potential diagnostic markers and therapeutic targets for ovarian clear cell adenocarcinoma2006

    • 著者名/発表者名
      A.Morita
    • 雑誌名

      Proteomics 6

      ページ: 5880-5890

    • 関連する報告書
      2006 実績報告書
  • [雑誌論文] Efficient electroblotting of gel-resolved proteins onto diamond-like carbon-coated plate for protein-chip2006

    • 著者名/発表者名
      Y.Ino
    • 雑誌名

      J. Electrophoresis 50

      ページ: 33-37

    • 関連する報告書
      2006 実績報告書
  • [雑誌論文] プロテオミクスで見えてくる翻訳後修飾の機能2005

    • 著者名/発表者名
      川崎博史
    • 雑誌名

      実験医学 23(7)

      ページ: 1043-1049

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2006 研究成果報告書概要 2004 実績報告書
  • [雑誌論文] Assessment of filter plates for multi-well in-gel digestion of proteins separated by polyacrylamide gel electrophoresis to identify them with LC-ESI/MSMS.2005

    • 著者名/発表者名
      Kameyama, K.
    • 雑誌名

      J Electrophoresis 49

      ページ: 71-75

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2006 研究成果報告書概要 2005 実績報告書
  • [雑誌論文] Functional analysis of posttranslational modification by proteomics2005

    • 著者名/発表者名
      Kawasaki, H.
    • 雑誌名

      Jikkenigaku 23

      ページ: 1043-1049

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2006 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Assesment of filter plates for multi-well in-gel digestion of proteins of proteins separated by polyacrylamide gel electrophoresis to identify them with LC-ESI/MSMS2005

    • 著者名/発表者名
      Kameyama, K.
    • 雑誌名

      J.Electrophoresis 49

      ページ: 71-75

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2006 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Identification of three phosphorylation sites in the α 7 subunit of the yeat 20S proteasome in vivo using mass spectrometry2004

    • 著者名/発表者名
      Iwafune, Y.
    • 雑誌名

      Arch Biochem Biophys. 431

      ページ: 9-15

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2006 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Identification of three phosphorylation sites in the alpha7 subunit of the yeast 20S proteasome in vivo using mass spectrometry2004

    • 著者名/発表者名
      Iwafune, Y.
    • 雑誌名

      Arch.Biochem.Biophys. 431

      ページ: 9-15

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2006 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Parvalbumin2004

    • 著者名/発表者名
      Nakayama, S.
    • 雑誌名

      Handbook of Metalloproteins Vol. 3, JohnWiley & Sons

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2006 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Sample preparation2004

    • 著者名/発表者名
      Kawasaki, H.
    • 雑誌名

      Genomics, proteomics no sintennkai(NTS)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2006 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Sequnce determination2004

    • 著者名/発表者名
      Hirano, H.
    • 雑誌名

      Genomics, proteomics no sintennkai(NTS)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2006 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Identification of three phosphorylation sites in the α7 subunit of the yeat 20S proteasome in vivo using mass spectrometry2004

    • 著者名/発表者名
      Iwafune, Y.
    • 雑誌名

      Arch Biochem Biophys 431

      ページ: 9-15

    • 関連する報告書
      2004 実績報告書
  • [雑誌論文] Mass spectrometric analysis of expression of ATPase subunits encoded by duplicated genes in the 19S regulatory particle of rice 20S proteasome2003

    • 著者名/発表者名
      Shibahara, T.
    • 雑誌名

      Arch. Biochem. Biophys. 421

      ページ: 34-41

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2006 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] 翻訳後修飾の解析2003

    • 著者名/発表者名
      川崎博史
    • 雑誌名

      臨床検査 47(11)

      ページ: 1233-1240

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2006 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] 26Sプロテアソームサブユニットの翻訳後修飾2003

    • 著者名/発表者名
      岩船裕子
    • 雑誌名

      生物物理化学 47(4)

      ページ: 143-149

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2006 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Mass spectrometric analysis of expression of ATPase subunits encoded by duplicated genes in the 19S regulatory partilce of rice 20S proteasome2003

    • 著者名/発表者名
      Shibahara, T.
    • 雑誌名

      Arch.Biochem.Biophys. 421

      ページ: 34-41

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2006 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Analysis of posttranslational modifactions2003

    • 著者名/発表者名
      Kawasaki, H.
    • 雑誌名

      Rinshokensa 47

      ページ: 1233-1240

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2006 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Posttranslational modifications of the subunits of 20S proteasome2003

    • 著者名/発表者名
      Iwafune, Y.
    • 雑誌名

      Seibutubuturikagaku 47

      ページ: 143-149

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2006 研究成果報告書概要
  • [図書] Parvalbumin. Handbook of Metalloproteins. Vol. 32004

    • 著者名/発表者名
      Nakayama, S.
    • 出版者
      John Wiley & Sons, Ltd
    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2006 研究成果報告書概要
  • [図書] 試料前処理法,ゲノミクス・プロテオミクスの新展開2004

    • 著者名/発表者名
      川崎博史
    • 出版者
      エヌ・ティー・エス
    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2006 研究成果報告書概要 2004 実績報告書
  • [図書] 一次構造決定,ゲノミクス・プロテオミクスの新展開2004

    • 著者名/発表者名
      平野久
    • 出版者
      エヌ・ティー・エス
    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2006 研究成果報告書概要 2004 実績報告書
  • [図書] Parvalbumin., Handbook of Metalloproteins.Vol.32004

    • 著者名/発表者名
      Nakayama, S.
    • 総ページ数
      8
    • 出版者
      John Wiley & Sons, Ltd
    • 関連する報告書
      2004 実績報告書
  • [文献書誌] Shibahara, T.: "Mass spectrometric analysis of expression of ATPase subunits encoded by duplicated genes in the 19S regulatory particle of rice 26S proteasome"Arch.Biochem.Biophys.. 421. 34-41 (2003)

    • 関連する報告書
      2003 実績報告書
  • [文献書誌] 川崎博史: "翻訳後修飾の解析"臨床検査. 47(11). 1233-1240 (2003)

    • 関連する報告書
      2003 実績報告書
  • [文献書誌] 岩船裕子: "26Sプロテアソームサブユニットの翻訳後修飾"生物物理化学. 47(4). 143-149 (2003)

    • 関連する報告書
      2003 実績報告書

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公開日: 2003-04-01   更新日: 2016-04-21  

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