| 研究課題/領域番号 |
15590194
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
生理学一般
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| 研究機関 | 明治薬科大学 |
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研究代表者 |
田中 資子 明治薬科大学, 薬学部, 助教授 (80277730)
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| 研究分担者 |
高橋 國太郎 東京大学, 大学院・医学系研究科, 名誉教授 (10010034)
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| 研究期間 (年度) |
2003 – 2004
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| 研究課題ステータス |
完了 (2004年度)
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| 配分額 *注記 |
3,600千円 (直接経費: 3,600千円)
2004年度: 1,000千円 (直接経費: 1,000千円)
2003年度: 2,600千円 (直接経費: 2,600千円)
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| キーワード | 胚性幹細胞モデル / ホヤ分裂抑制2細胞胚 / 全能性分化 / 細胞接着 / 分化誘導制御 / イオンチャネル / 筋細胞型分化 / Ca^<2+>電流 / Ca2+電流 |
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| 研究概要 |
目的:ホヤ2細胞胚半側細胞のような分裂抑制した大型全能性細胞に、8細胞胚各種細胞(a4.2,b4.2,A4.1,B4.1)を接着、あるいは予測誘導物質を作用させることにより、ホヤ幼生の主要かつ基本的分化型である表皮細胞型、筋細胞型、神経細胞型に誘導制御する。また、各分化型に、神経細胞型で明らかにされたように頭側、尾側に特異的なイオンチャネルの発現があれば、その部域特異性も誘導制御することを目的とした。
成果:アカボヤ2細胞胚半側割球AB2を分裂抑止して単一胚細胞(2C細胞)とし、この割球より先行して発生している8細胞胚から分離したa4.2-A4.1胚細胞ペア、a4.2胚細胞ペア、A4.1胚細胞ペア、b4.2胚細胞ペア、B4.1胚細胞ペアを接着させ培養すると、細胞ペアーはそれぞれ単独に培養した場合の分化すなわち頭側神経型、表皮型、不完全尾側神経型、表皮型、筋型あるいは非興奮型に分化した。しかし、全能性と考えられる2C細胞では、単独培養した場合の表皮型分化とは異なり、8細胞由来の胚細胞ペアーの細胞接着による誘導性分化が惹起され、接着した細胞ペアーの種類に依存して頭側神経型、尾側神経型、筋型に分化した。誘導性分化が成立する条件を確立するため、とくに2C細胞および8細胞胚由来の細胞ペアーの接着時点での発生時聞の影響を調べた。その結果、(1)2C細胞は接着時点で7発生時間以内でなくてならない。(2)2C細胞を分離するための胚が、8細胞ペアーを分離するための胚に対して、少なくとも同時に受精されるか、できれば3時間受精を遅らせた場合すなわち接着時点で細胞ペアーより3時間若い場合に、誘導は80%以上成功する。ことがわかった。誘導が成立しないときは、2C細胞はすべて表皮型となった。また、対照としで2個の2C細胞を接着細胞ペアーとして培養すると、100%表皮型細胞になった。
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