JNK選択的新規MKPのT細胞分化における役割と腫瘍・感染免疫における意義

• 研究課題/領域番号: 15590334
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 実験病理学
• 研究機関: 鹿児島大学
• 研究代表者: 松口 徹也 鹿児島大学, 大学院・医歯学総合研究科, 教授 (10303629)
• 研究期間 (年度): 2003 – 2004
• 研究課題ステータス: 完了 (2004年度)
• 配分額: 3,500千円 (直接経費: 3,500千円); 2004年度: 1,400千円 (直接経費: 1,400千円); 2003年度: 2,100千円 (直接経費: 2,100千円)
• キーワード: MAPキナーゼ / JNK / T細胞 / フォスファターゼ / サイトカイニン / アレルギー / 転写因子 / トランスジェニックマウス / サイトカイン / MKP-M / Th1 / Th2 / アデノウィルス / CD4

研究概要

JNKに強い基質特異性を示すMAPKフォスターゼであるMKP-Mは、ナイーヴCD4陽性T細胞に少量発現される。In vitroでのTCR刺激による分化実験系において、Th2分化優位の条件下でMKP-Mの発現量が増加し、逆にTh1分化優位の条件下ではその発現はほとんど認められなくなることから、MKP-MのTh1/Th2分化への関与が想定された。昨年度の研究で、アデノウィルスによるMKP-M強発現によって、ナイーヴCD4陽性細胞のTh2分化が著名に誘導されることを示した。引き続き以下の実験を行った。
1)T細胞でのみ活性化されるLck遺伝子のプロモーターを用いたT細胞特異的な野生型および不活性型のMKP-Mトランスジェニックマウスを作成した。不活性型MKP-Mの高い発現を示したマウスでは胸腺内T細胞分化が著しく抑制された。正常のCD4陽性T細胞を認めたトランスジェニックマウス系統からCD4陽性T細胞を磁気ビーズにより単離し、CD3抗体で刺激し、Th1およびTh2分化条件下で培養し、経時的なサイトカイン(IFNγ、IL-4)、および転写因子(T-bet、Maf、GAT-3)の発現レベルの変化を解析したところ、野生型MKP-MトランスジェニックマウスではTh2タイプ優位のT細胞分化が誘導され、逆に不活性型由来のCD4陽性T細胞でTh1分化への偏位が認められた。
2)上記のマウスおよびコントロールマウスの卵白アルブミン感作を行い、抗原特異的な免疫グロブリンサブタイプ、サイトカイン濃度を計測したところ、野生型MKP-MトランスジェニックマウスではTh2タイプ優位の抗原特異的免疫反応が誘導され、逆に不活性型でTh1優位の免疫反応が誘導された。
3)昨年確立したMKP-M遺伝子ヘテロ型欠損ES細胞からキメラマウスを作成した。現在MKP-M遺伝子欠損マウスを確立中である。
4)Th1分化に関連する遺伝子としてIL-12レセプターβ1鎖に注目し、その遺伝子プロモーターの解析を行った。

研究成果

• [雑誌論文] Interleukin-15 induces IL-12 receptor {beta}1 gene expression through PU.1 and IRF3 by targeting chromatin remodeling (2005)
  • 著者名/発表者名: Musikacharoen, T., Oguma, A., Yoshikai, Y., Chiba, N., Masuda, A., Matsuguchi, T.
  • 雑誌名: Blood 105 ページ: 711-720
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Interleukin-15 induces IL-12 receptor {beta}1 gene expression through PU.1 and IRF 3 by targeting chromatin remodeling (2005)
  • 著者名/発表者名: Musikacharoen, T., Oguma, A., Yoshikai, Y., Chiba, N., Masuda, A., Matsuguchi, T.
  • 雑誌名: Blood 105 ページ: 711-720
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] A serine/threonine kinase, Cot/Tp 12, modulates bacterial DNA-induced IL-12 production and Th cell differentiation. (2005)
  • 著者名/発表者名: Sugimoto K, Ohata M, Miyoshi J, Ishizaki H, Tsuboi N, Matsuguchi T. et al.
  • 雑誌名: J.Clin.Invest. 114 ページ: 857-866
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Interleukin-15 induces IL-12 receptor {beta}1 gene expression through PU.1 and IRF 3 by targeting chromatin remodeling (2005)
  • 著者名/発表者名: Musikacharoen, T., Oguma, A., Yosikai, Y., Chiba, N., Masuda, A., Matsuguchi, T.
  • 雑誌名: Blood 105 ページ: 711-720
• [雑誌論文] A serine/threonine kinase, Cot/Tp12, modulates bacterial DNA-induced IL-12 production and Th cell differentiation. (2004)
  • 著者名/発表者名: Sugimoto K, Ohata M, Miyoshi J, Ishizaki H, Tsuboi N, Matsuguchi T.et al.
  • 雑誌名: J.Clin.Invest 114 ページ: 857-866
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Glucocorticoids and tumor necrosis factor alpha cooperatively Regulate toll-like receptor 2 gene expression. (2004)
  • 著者名/発表者名: Hermoso MA, Matsuguchi T, Smoak K, Cidlowski JA
  • 雑誌名: Mol.Cell.Biol. 24 ページ: 4743-4756
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] The interaction between GATA proteins and activator protein-1 promotes the transcription of IL-13 in mast cells. (2004)
  • 著者名/発表者名: Masuda A, Yoshikai Y, Kume H, Matsuguchi T.
  • 雑誌名: J.Immunol. 173 ページ: 5564-5573
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Glucocorticoids and tumor necrosis factor alpha cooperatively regulate toll-like receptor 2 gene expression. (2004)
  • 著者名/発表者名: Hermoso MA, Matsuguchi T, Smoak K, Cidlowski JA
  • 雑誌名: Mol.Cell.Biol. 24 ページ: 4743-4756
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] A serine/threonine kinase, Cot/Tp12, modulates bacterial DNA-induced IL-12 production and Th cell differentiation. (2004)
  • 著者名/発表者名: Sugimoto K, Ohata M, Miyoshi J, Ishizaki H, Tsuboi N, Matsuguchi T, et al.
  • 雑誌名: J.Clin.Invest. 114 ページ: 857-866
• [雑誌論文] JNK-interacting protein 3 associates with Toll-like receptor 4 and is involved in LPS-mediated JNK (2004)
  • 著者名/発表者名: Masuda A, Yoshikai Y, Kume H, Matsuguchi T.
  • 雑誌名: J.Immunol. 173 ページ: 5564-5573
• [文献書誌] Musikacharoen, T., Yoshikai, Y., Matsuguchi, T.: "Histone acetylation and activation of CREB regulate transcriptional activation of MKP-M in LPS-stimulated macrophages."J.Biol.Chem.. 278. 9167-9175 (2003)
• [文献書誌] Matsuguchi, T., Masuda, A., Sugimoto, K., Nagai, Y., Yoshikai, Y.: "JNK-interacting protein 3 associates with Toll-like receptor 4 and is involved in LPS-mediated JNK activation."EMBO J.. 22. 4455-4464 (2003)
• [文献書誌] Hiromatsu, T., Matsuguchi, T., Shimizu, H.Yajima, T.et al.: "NKT cells stimulated with a ligand for TLR2 at least partly contribute to liver injury caused by Escherichia coil infection in mice. 33 2511-2519"Eur.J.Immunol.. 33. 2511-2519 (2003)
• [文献書誌] Matsuguchi, T., Takagi, A., Matsuzaki, T., Nagaoka, M.et al.: "Lipoteichoic Acid of Lactobacillus Elicits Strong TNFα-inducing Activivty on Macrophages through Toll-like Receptor 2."Clin Diagn Lab Immunol.. 10. 259-266 (2003)
• [文献書誌] Hiromatsu, T., Yajima, T., Matsuguchi, T., Nishimura, H.et al.: "Overexpression of IL-15 protects against Escherichia coli-induced shock accompanied by inhibition of TNF-α-induced apoptosis."J.Infectious Disease.. 187. 1442-1451 (2003)
• [文献書誌] Kikuchi, T., Yoshikai, Y., Miyoshi, J., Matsuguchi, T.et al.: "Cot/Tpl2 is essential for RANKL induction by lipid A in osteoblasts."J.Dental Res.. 82. 546-550 (2003)