ジーンターゲティングによる新規癌抑制遺伝子の機能解析

• 研究課題/領域番号: 15590335
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 実験病理学
• 研究機関: 滋賀医科大学
• 研究代表者: 井上 寛一 滋賀医科大学, 医学部, 助教授 (30176440)
• 研究分担者: 原口 清輝 滋賀医科大学, 医学部, 助手 (10324576)
• 研究期間 (年度): 2003 – 2004
• 研究課題ステータス: 完了 (2004年度)
• 配分額: 3,600千円 (直接経費: 3,600千円); 2004年度: 1,700千円 (直接経費: 1,700千円); 2003年度: 1,900千円 (直接経費: 1,900千円)
• キーワード: 癌抑制遺伝子 / アポトーシス / ノックアウトマウス / Drs

研究概要

我々がv-src癌遺伝子による細胞癌化を抑制する活性を持つ遺伝子として分離したDrsはSushiモチーフと膜貫通ドメインを持つ新しいタイプの癌抑制遺伝子である。我々はDrsによる癌化抑制機構と癌発生におけるこの遺伝子の役割を解析し以下の成果を得た。
1.Drsが小胞体においてアポトーシス誘導蛋白ASYと結合し、種々のヒト癌細胞株にCaspase-12,-9,-3の活性化を介するアポトーシスを誘導することを見いだした。
2.Drs遺伝子ノックアウトマウスを作製することに成功した。ホモのDrsKOマウス(46匹)は生後8-12ヶ月で、その約25%にリンパ腫、肺癌、肝癌、肉腫などの悪性腫瘍が発生したが、Wild-typeマウス(23匹)では12ヶ月までに腫瘍発生は認められなかった。
3.DrsKOマウスの肺癌から樹立した癌細胞株LC-T1にレトロウイルスベクターによってDrsを再導入すると、ヌードマウスでの造腫瘍能が顕著に抑制された。このときDrsを再導入した癌細胞による腫瘍ではCaspase-3の活性化を伴うアポトーシスが亢進していた。
4.DrsKOマウス由来胎児繊維芽細胞(MEF)はラパマイシンやデキサメタゾンなどの薬剤によるアポトーシスに耐性を示した。
5.DrsKO MEFではグルコース飢餓条件下でアポトーシスを起こすことから、Drs誘導アポトーシスとmTORシグナル経路との関連が示唆された。
これらの結果からDrsはアポトーシス誘導を介して癌化抑制に関与していることが明らかになってきた。今後、DrsKOマウスおよびKO細胞を用いて、Drsによる新規アポトーシス経路の生理的役割と発癌制御の分子機構をさらに詳細に解明してゆきたい。

研究成果

• [雑誌論文] Rb1cc1 is critical for myoblast differentiation through Rb1 regulation. (2005)
  • 著者名/発表者名: Watanabe, R. et al.
  • 雑誌名: Virchows Arch. 446(in press)
• [雑誌論文] Periostin is down-regulated in high grade human bladder cancers and Suppresses in vitro cell invasineness and in vivo metastasis of cancer cells. (2005)
  • 著者名/発表者名: Kim, C.J.et al.
  • 雑誌名: Int.J. Cancer (in press)
• [雑誌論文] Specific gene silencing in the pre-implantation stage mouse embryo by a siRNA expression vector system (2004)
  • 著者名/発表者名: Haraguchi, S.et al.
  • 雑誌名: Mol.Reprod.Dev 68 ページ: 17-24
  • NAID: 10012348758
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] A novel apoptotic pathway induced by the drs tumor suppressor gene (2004)
  • 著者名/発表者名: Tambe, Y.et al.
  • 雑誌名: Oncogene 23 ページ: 2977-2987
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Loss of c-abl facilitates anchorage-independent growth of p53- and RB-deficient primary mouse embryonic fibroblasts (2004)
  • 著者名/発表者名: Suzuki, J.et al.
  • 雑誌名: Oncogene 23 ページ: 8527-8534
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Specific gene silencing in the pre-implantation stage mouse embryo by an siRNA expression vector system. (2004)
  • 著者名/発表者名: Haraguchi, S., Saga, Y, Naito, K., Inoue, H., Seto, A.
  • 雑誌名: Mol.Reprod.Dev. 68 ページ: 17-24
  • NAID: 10012348758
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] A novel apoptotic pathway induced by the drs tumor suppressor gene. (2004)
  • 著者名/発表者名: Tambe, Y., Isono, T..Haraguchi, S., Yoshioka-Yamashita, A, Yutsudo, M.,, Inoue.H.
  • 雑誌名: Oncogene 23 ページ: 2977-2987
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Loss of c-abl facilitates anchorage-independent growth of p53-and RB-deficient primary mouse embryonic fibroblasts. (2004)
  • 著者名/発表者名: Suzuki, J., Sukezane, T., Akagi, T., Georgescu, M.M., Ohtani, M., Inoue, H., Jat, P.S., Goff, S.P., Hanafusa, H., Shishido, Y.
  • 雑誌名: Oncogene 23 ページ: 8527-8534
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] A novel apoptotic pathway induced by the drs tumor suppressor gene. (2004)
  • 著者名/発表者名: Tambe, Y. et al.
  • 雑誌名: Oncogene 23 ページ: 2977-2987
• [雑誌論文] Specific gene silencing in the pre-implantation stage mouse embryo by an siRNA expression vector system. (2004)
  • 著者名/発表者名: Haraguchi, S et al.
  • 雑誌名: Mol.Reprod.Dev. 68 ページ: 17-24
  • NAID: 10012348758
• [雑誌論文] Loss of c-abl facilitates anchorage-independent growth of p53- and RB-deficient primary mouse embryonic fibroblast. (2004)
  • 著者名/発表者名: Suzuki, J. et al.
  • 雑誌名: Oncogene 23 ページ: 8527-8534
• [雑誌論文] Pro-apoptotic ASY/Nogo-B protein associates with ASYIP (2003)
  • 著者名/発表者名: Oi, B.et al.
  • 雑誌名: J.Cell.Physiol. 196 ページ: 312-318
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Down-regulation of drs mRNA in human prostate carcinomas (2003)
  • 著者名/発表者名: Kim, C.J.et al.
  • 雑誌名: Human Pathology 34 ページ: 654-657
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Expression of Epstein-Barr virus in thyroid carcinoma correlates with tumor progression (2003)
  • 著者名/発表者名: Shimakage, M.et al.
  • 雑誌名: Human Pathology 34 ページ: 1170-1177
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Conserved role of nanos proteins in germ cell development (2003)
  • 著者名/発表者名: Tusda, M.et al.
  • 雑誌名: Science 301 ページ: 1239-1241
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Nanos 1 : a mouse nanos gene expressed in the central nerves system is dispensable for normal development (2003)
  • 著者名/発表者名: Haraguchi, S.et al.
  • 雑誌名: Mech.Dev. 120 ページ: 721-731
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Pro-apoptotic ASY/Nogo-B protein associates with ASYIP. (2003)
  • 著者名/発表者名: Qi, B., Qi, Y., Watari, A., Yoshioka, N., Inoue, H., Minemoto, Y., Yamashita, K., Sasagawa, T., Yutsudo, M.
  • 雑誌名: J.Cell.Physiol. 196 ページ: 312-318
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Down-regulation of drs mRNA in human prostate carcinomas. (2003)
  • 著者名/発表者名: Kim, C.J., Shimakage, M., Kushima, R., Mukaisho, K., Shinka, T., Okada, Y., Inoue.H.
  • 雑誌名: Human Pathology 34 ページ: 654-657
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Expression of Epstein-Barr virus in thyroid carcinoma correlates with tumor progression. (2003)
  • 著者名/発表者名: Shimakage, M., Kawahara, K., Sasagawa, T., Inoue, H., Yutsudo, M., Yoshida, M., Yanoma, S.
  • 雑誌名: Human Pathology 34 ページ: 1170-1177
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Conserved role of nanos proteins in germ cell development. (2003)
  • 著者名/発表者名: Tsuda, M., Sasaoka, Y., Kiso, M., Abe, K., Haraguchi, S., Kobayashi, S., Saga, Y.
  • 雑誌名: Science 301 ページ: 1239-1241
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] nanos1 : a mouse nanos gene expressed in the central nervous system is dispensable for normal development. (2003)
  • 著者名/発表者名: Haraguchi, S., Tsuda, M., Kitajima, S., Sasaoka, Y, Nomura-Kitabayashid, A., Kurokawa, K., Saga, Y.
  • 雑誌名: Mech.Dev. 120 ページ: 721-731
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Rb1cc1 is critical for myoblast differentiation through Rb1 regulation
  • 著者名/発表者名: Watanabe, R.et al.
  • 雑誌名: Virchows Arch. 446(In press)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Periostin is down-regulated in high grade human bladder cancers and suppresses in vitro cell invasiveness and in vivo metastasis of cancer cells
  • 著者名/発表者名: Kim, C.J.et al.
  • 雑誌名: Int.J.Cancer (In press)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Rb1cc1 is critical for myoblast differentiation through Rb1 regulation.
  • 著者名/発表者名: Watanabe, R., Chano, T., Inoue, H., Isono, T., Koiwai, O., Okabe, H.
  • 雑誌名: Virchows Arch. 446(in press)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Periostin is down-regulated in high grade human bladder cancers and suppresses in vitro cell invasiveness and in vivo metastasis of cancer cells.
  • 著者名/発表者名: Kim, C.J., Yoshioka, N., Tambe, Y., Kushima, R., Okada, Y., Inoue, H.
  • 雑誌名: Int.J.Cancer (in press)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [図書] 生物薬科学実験講座6、細胞の増殖と成長因子、III 培養細胞の利用 「腫瘍ウイルスによる癌化に関する変異株」 (2005)
  • 著者名/発表者名: 井上寛一(共著)
  • 出版者: 広川書店
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Qi, B.et al.: "Pro-apoptotic ASY/Nogo-B protein associates with ASYIP"J. Cell. Physiol. 196. 312-318 (2003)
• [文献書誌] Kim, C.J.et al.: "Down-regulation of drs mRNA in human prostate carcinomas"Human Pathology. 34. 654-657 (2003)
• [文献書誌] Shimakage, M. et al.: "Expression of Epstein-Barr virus in thyroid carcinoma correlates with tumor progression"Human Pathology. 34. 1170-1177 (2003)
• [文献書誌] Haraguchi, S. et al.: "nanos1 : a mouse nanos gene expressed in the central nervous system is dispensable for normal development"Mech. Dev.. 120. 721-731 (2003)
• [文献書誌] Tsuda, M. et al.: "Conserved role of nanos proteins in germ cell development"Science. 301. 1239-1241 (2003)
• [文献書誌] Tambe, Y. et al.: "A novel apoptotic pathway induced by the drs tumor suppressor gene"Oncogene. 23. 2977-2987 (2004)
• [文献書誌] Haraguchi, S. et al.: "Specific gene silencing in the pre-implantation stage mouse embryo by an si RNA expression vector system"Mol. Reprod. Dev.. in press.