• 研究課題をさがす
  • 研究者をさがす
  • KAKENの使い方
  1. 前のページに戻る

オステオポンチン蛋白多型の機能的差異を規定するドメインの解析

研究課題

研究課題/領域番号 15590346
研究種目

基盤研究(C)

配分区分補助金
応募区分一般
研究分野 実験病理学
研究機関愛媛大学

研究代表者

宮崎 龍彦  愛媛大学, 医学部, 助手 (80239384)

研究分担者 能勢 眞人  愛媛大学, 医学部, 教授 (70030913)
研究期間 (年度) 2003 – 2004
研究課題ステータス 完了 (2004年度)
配分額 *注記
3,600千円 (直接経費: 3,600千円)
2004年度: 800千円 (直接経費: 800千円)
2003年度: 2,800千円 (直接経費: 2,800千円)
キーワードオステオポンチン / 遺伝子多型 / 糸球体腎炎 / MRL / lprマウス / 合成機能蛋白 / 機能解析 / TNF-α / IL-1β / 1prマウス / 蛋白多型 / 無細胞蛋白合成システム / 構造解析 / サイトカイン / 蛋白機能解析 / コンジェニックインブレッド
研究概要

オステオポンチン蛋白多型が膠原病疾患群の発症・進展にどのような機序で関連するかについて明らかにするため、OPN蛋白の多型構造を遺伝子工学的に改変することにより、どのドメインの多型が糸球体腎炎発症・進展に繋がるかを解明、さらにOPN遺伝子座特異的コンジェニックマウス作成により、生体に於けるOPN多型の役割を解析した。
1.OPN蛋白多型の構造解析と結合能差異の解析
(1)MRL/Mp系およびC3H/HeJ系マウス由来のOpn cDNAをもとに、無細胞蛋白合成システムによりMRL型およびC3H型のオステオポンチンを合成し、(2)合成OPNの蛋白性状をSDS-PAGE, Western blotを用いて解析した。
2.機能差異誘導ドメイン同定のための改変合成蛋白の作成・解析
PCR based site directed mutagenesisの手法を用い、C3H型、MRL型のアミノ酸置換を改変した合成蛋白を作成し、これら合成蛋白の性状を解析した。
3.OPN蛋白多型の機能差異誘導ドメインの同定
MRL/Mp-+/+マウスの脾細胞,Mφを採取し、改変合成OPNを加えて短期、mRNAを採取。これをもとにリアルタイムRT-PCRにより、蛋白多型によるサイトカイン発現誘導能の差異を解析し、少なくとも1カ所のアミノ酸置換が機能差を誘導することを見出した。
4.OPN遺伝子座特異的コンジェニックマウスの確立と病態解析
[MRL/lpr×(MRL/lpr×C3H/lpr)F1]-N2マウスをから5番染色体のOpn遺伝子座領域がヘテロ接合型の個体を選別してMRL/lprと戻し交配を13代繰り返し、Opn遺伝子座特異的コンジェニック系マウス(MRL/lpr-Opn^<C3H>)を確立した。また、これらを兄妹交配し、Opn^<MRL/MRL>,Opn^<MRL/C3H>およびOpn-^<C3H/C3H>の病態解析を行ってOpn-<C3H/C3H>において自己免疫性糸球体腎炎が抑制されることを検証し得た。
これらの結果は、Opnの1アミノ酸置換がMRL/lprに於ける糸球体腎炎感受性を規定している可能性を示唆した。

報告書

(3件)
  • 2004 実績報告書   研究成果報告書概要
  • 2003 実績報告書
  • 研究成果

    (24件)

すべて 2005 2004 2003 その他

すべて 雑誌論文 (17件) 図書 (2件) 文献書誌 (5件)

  • [雑誌論文] Accelerating effect of an MRL gene locus on the severity and onset of arthropathy in DBA/1 mice.2005

    • 著者名/発表者名
      Oishi H, Miyazaki T, Mizuki S, Nose M et al.
    • 雑誌名

      Arthritis and Rheumatism 52・3

      ページ: 959-966

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2004 実績報告書 2004 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Implication of allelic polymorphism of osteopontin in the development of lupus nephritis in MRL/lpr mice.2005

    • 著者名/発表者名
      Miyazaki T, Ono M, Qu WM, Nose M et al.
    • 雑誌名

      European Journal of Immunology (in press)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2004 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Accelerating effect of an MRL gene locus on the severity and onset of arthropathy in DBA/1 mice2005

    • 著者名/発表者名
      Oishi H, Miyazaki T, Yamamoto H, Nose M. et al.
    • 雑誌名

      Arthritis Rheum. 52(3)

      ページ: 959-966

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2004 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Implication of allelic polymorphism of osteopontin in the development of lupus nephritis in MRL/lpr mice2005

    • 著者名/発表者名
      Miyyazaki T, Ono M, Endo Y, Nose M. et al.
    • 雑誌名

      Eur J Immunol. (in press)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2004 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Pathological diagnostic manual of collagen diseases2005

    • 著者名/発表者名
      Miyazaki T
    • 雑誌名

      Pathology and Clinical Medicine (Ozaki S., Nose M Ed.) (Bunkodo, Tokyo) (in press)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2004 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Endothelial adhesion molecules in glomerular lesions: association with their severity and diversity in lupus models.2004

    • 著者名/発表者名
      Nakatani K, Fujii H, Ono M, Nose M et al.
    • 雑誌名

      Kidney International 65・4

      ページ: 1290-1300

    • 関連する報告書
      2004 実績報告書
  • [雑誌論文] Nrf2 deficiency improves autoimmune nephritis caused by the fas mutation lpr.2004

    • 著者名/発表者名
      Morito N, Yoh K, Nose M, Takahashi S et al.
    • 雑誌名

      Kidney International 65・5

      ページ: 1703-1713

    • 関連する報告書
      2004 実績報告書
  • [雑誌論文] 動物モデルをどのようにしてヒトの疾患に応用するか2004

    • 著者名/発表者名
      能勢眞人
    • 雑誌名

      Molecular Medicine 41・2

      ページ: 157-162

    • 関連する報告書
      2004 実績報告書
  • [雑誌論文] Genetic basis of tissue-specificity of vasculitis in MRL/lpr mice.2003

    • 著者名/発表者名
      Yamada, A., Miyazaki, T., Ito, M.R., Nose, M.et al.
    • 雑誌名

      Arthritis and Rheumatism 48・5

      ページ: 1445-1451

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2004 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Internalization of antibodies by endothelial cells via fibronectin implicating a novel mechanism in Lupus nephritis.2003

    • 著者名/発表者名
      Fujii, H., Ito, M.R., Miyazaki, T., Nose, M.et al.
    • 雑誌名

      Kidney International 64・5

      ページ: 1662-1670

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2004 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Bone marrow transfer of autoimmune diseases in an MRL strain of mice with a deficit in functional Fas ligand : Dissociation of arteritis from glomerulonephritis2003

    • 著者名/発表者名
      Ito, M.R., Ono, M., Itoh, J., Nose M.
    • 雑誌名

      Pathology.International 53・8

      ページ: 518-524

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2004 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Antagonist of Monocyte Chemoattractant Protein 1 ameliorates the initiation and progression of lupus nephritis and renal vasculitis in MRL/lpr mice.2003

    • 著者名/発表者名
      Hasegawa, H., Ito, M.R., Nose, M.et al.
    • 雑誌名

      Arthritis Rheummatism 48・9

      ページ: 2555-2566

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2004 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Genetic basis of tissue-specificity of vasculitis in MRL/lprmice2003

    • 著者名/発表者名
      Yamada A, Miyazaki T, Nose M. et al.
    • 雑誌名

      Arthritis Rheum. 48(5)

      ページ: 1445-1451

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2004 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Internalization of antibodies by endothelial cells via fibronectin implicating a novel mechanism in Lupus nephritis2003

    • 著者名/発表者名
      Fujii H, Nakatani K, Miyazaki T, Lockwood M, Nose M et al.
    • 雑誌名

      Kidney Int. 64(5)

      ページ: 1662-1670

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2004 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Bone marrow transfer of autoimmune diseases in an MRL strain of mice with a deficit in functional Fas ligand : Dissociation of arteritis from glomerulonephritis2003

    • 著者名/発表者名
      Ito MR, Ono M, Itoh J, Nose M
    • 雑誌名

      Pathol Int. 53(8)

      ページ: 518-524

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2004 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Antagonist of Monocyte Chemoattractant Protein 1 meliorates the initiation and progression of lupus nephritis and renal vasculitis in MRL/lpr mice.2003

    • 著者名/発表者名
      Hasegawa H, Kohno M, Sasaki M, Ito MR, Miyazaki J, Yoshie 0, Nose M, Fujita S et al.
    • 雑誌名

      Arthritis Rheum. 48(9)

      ページ: 2555-2566

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2004 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Implication of allelic polymorphism of osteopontin in the development of lupus nephritis in MRL/lpr mice.

    • 著者名/発表者名
      Miyazaki T, Ono M, Qu WM, Nose M et al.
    • 雑誌名

      European Journal of Immunology (in press)

    • 関連する報告書
      2004 実績報告書
  • [図書] 病理と臨床 23巻臨時増刊号 膠原病の病理診断マニュアル2005

    • 著者名/発表者名
      宮崎龍彦, 大西誠(分担執筆)
    • 出版者
      文光堂(東京)(in press)
    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2004 研究成果報告書概要
  • [図書] 病理と臨床23巻臨時増刊号膠原病の病理診断マニュアル2005

    • 著者名/発表者名
      宮崎龍彦, 大西誠(分担執筆)
    • 出版者
      (in press)
    • 関連する報告書
      2004 実績報告書
  • [文献書誌] Yamada, A., Miyazaki, T., Ito, M.R., Nose, M., et al.: "Genetic basis of tissue-specificity of vasculitis in MRL/lpr mice"Arthritis and Rheumatism. 48・5. 1445-1451 (2003)

    • 関連する報告書
      2003 実績報告書
  • [文献書誌] Fujii, H., Ito, M.R., Miyazaki, T., Nose, M.et al.: "Internalization of antibodies by endothelial cell s via fibronectin implicating a novel mechanism in Lupus nephritis"Kidney International. 64・5. 1662-1670 (2003)

    • 関連する報告書
      2003 実績報告書
  • [文献書誌] Ito, M.R., Ono, M., Itoh, J., Nose M.: "Bone marrow transfer of autoimmune diseases in an MRL strain of mice with a deficit in functional Fas ligand : Dissociation of arteritis from glomerulonephritis"Pathology International. 53・8. 518-524 (2003)

    • 関連する報告書
      2003 実績報告書
  • [文献書誌] Hasegawa, H., Ito, M.R., Nose, M., et al.: "Antagonist of Monocyte Chemoattractant Protein 1 ameliorates the initiation and progression of lupus nephritis and renal vasculitis in MRL/lpr mice"Arthritis and Rheumatism. 48・9. 2555-2566 (2003)

    • 関連する報告書
      2003 実績報告書
  • [文献書誌] 能勢眞人: "【血管炎研究がめざす新たな展開】血管炎のゲノミクス"医学のあゆみ. 206・2. 140-142 (2003)

    • 関連する報告書
      2003 実績報告書

URL: 

公開日: 2003-04-01   更新日: 2016-04-21  

サービス概要 検索マニュアル よくある質問 お知らせ 利用規程 科研費による研究の帰属

Powered by NII kakenhi