人工的腫瘍抗原分泌細胞を用いた新しい癌免疫療法の開発

• 研究課題/領域番号: 15590353
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 実験病理学
• 研究機関: 札幌医科大学
• 研究代表者: 田村 保明 札幌医科大学, 医学部, 講師 (80322329)
• 研究分担者: 佐藤 昇志 札幌医科大学, 医学部, 教授 (50158937)
• 研究期間 (年度): 2003 – 2004
• 研究課題ステータス: 完了 (2004年度)
• 配分額: 3,300千円 (直接経費: 3,300千円); 2004年度: 1,400千円 (直接経費: 1,400千円); 2003年度: 1,900千円 (直接経費: 1,900千円)
• キーワード: サバイビン / 腫瘍抗原 / 細胞障害性T細胞 / 熱ショック蛋白質 / HLA-A24 / 癌免疫療法 / 細胞傷害性リンパ球 / 樹状細胞

研究概要

本補助金により、遺伝子改変による分泌型のサバイビン導入細胞を作成し、抗原提示細胞、T細胞との共培養による細胞障害性T細胞の誘導能を検討した。
1.分泌型サバイビン遺伝子導入腫瘍細胞の樹立とそのT細胞応答
adenoE3由来のシグナルシークエンスをサバイビン遺伝子のN末端側に導入したplasmidをK562細胞に遺伝し導入し、ssSVN-K562を作成した。培養液中に分泌されるサバイビンは数ngであった。このssSVN-K562をX線照射後、HLA-A2402陽性坦癌患者の樹状細胞およびCD8T細胞と共培養した。その結果、明らかなCD8+CTLの誘導は確認されなかった。これは分泌されるサバイビン量がごく少量であるため、十分なサバイビン由来の抗原が樹状細胞に提示されず、T細胞を活性化できないものと考えられた。
2.熱ショック蛋白質Hspは腫瘍細胞内で抗原ペプチドと結合している。そこでHsp72,Hsc73,ORP150を分泌型とする改変遺伝子を作成し、マウスの腫瘍細胞株に導入した。分泌型Hsp72,およびhsc73を発現した腫瘍は、免疫原性が増強し、腫瘍拒絶あるいは増殖抑制効果を示した。これは、抗体を用いたdepletion assayにより、CD8T細胞によるCTLの効果的な誘導によることが示された。またこれら分泌されたHsp72,Hsp73は腫瘍抗原を結合して分泌されることも示された。さらに樹立された腫瘍細胞に対する治療効果も確認された(論文投稿中)。
3.また臨床応用を目的として、サバイビン陽性のヒト腫瘍細胞株に分泌型Hsp72,Hsp73を導入した細胞株を作成している。この遺伝子導入株とHLA-A2402陽性坦癌患者の樹状細胞およびCD8T細胞およびCD4T細胞と共培養することにより、サバイビンに対するCTL応答およびCD4T細胞応答を誘導しえた。

研究成果

• [雑誌論文] Aberrant expression and potency as a cancer immunotherapy target of IAP family, Livin/ML-IAP in Lung Cancer. (2005)
  • 著者名/発表者名: Hariu, H.
  • 雑誌名: Clin.Cancer Res. 11 ページ: 1000-1009
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] A potent immunogenic general cancer vaccine that targets survivin, an inhibitor of apoptosis proteins. (2005)
  • 著者名/発表者名: Idenoue, S.
  • 雑誌名: Clin Cancer Res. 11 ページ: 1474-1482
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Aberrant expression and potency as a cancer immunotherapy target of IAP family, Livin/ML-IAP in Lung Cancer (2005)
  • 著者名/発表者名: Harlu, H., Hirohashi, Y., Torigoe, T., Tamura, Y., Aketa, K., Kitamura, H., Idenoue, S., Hariu, M., Kamiguchi, K., Mano, Y., Kanaseki, T., Tsukahara, T., Shijubo, N., Sato, N.
  • 雑誌名: Clin. Cancer Res. 11 ページ: 1000-1009
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] A potent immunogenic general cancer vaccine that targets survivin, an inhibitor of apoptosis proteins (2005)
  • 著者名/発表者名: Idenoue, S., Hirohashi, Y., Torigoe, T., Sato, Y., Tamura, Y., Hariu, H., Yamamoto, M., Kurotaki, T., Tsuruma, T., Asanuma, H., Kanaseki, T., Ikeda, H., Kashiwagi, K., Okazaki, M., Sasaki, K., Sato, T., Ohmura, T., Hata, F., Yamaguchi, K., Hirata, K., Sato, N.
  • 雑誌名: Clin. Cancer Res. 11 ページ: 1474-82
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Phase I clinical study of anti-apoptosis protein, survivin-derived peptide vaccine therapy for patients with advanced or recurrent colorectal cancer. (2004)
  • 著者名/発表者名: Tsuruma, T.
  • 雑誌名: J.Translational Med. 2 ページ: 19-29
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Tumor-derived heat shock protein70-pulsed dendritic cells elicit tumor-specific cytotoxic T lymphocytes (CTLs) and tumor immunity. (2004)
  • 著者名/発表者名: Ueda, G.
  • 雑誌名: Cancer Science 95 ページ: 248-253
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Phase I clinical study of anti-apoptosis protein, survivin-derived peptide vaccine therapy for patients with advanced or recurrent colorectal cancer (2004)
  • 著者名/発表者名: Tsuruma, T., Hata, F., Torigoe, T., Furuhata, T., Idenoue, S., Kurotaki, T., Yamamoto, M., Yagihashi, A., Ohmura, T., Yamaguchi, K., Katsuramaki, T., Yasoshima, T., Sasaki, K., Mizushima, Y., Minamida, H., Kimura, H., Akiyama, M., Hirohashi, Y., Asanuma, H., Tamura, Y., Shimozawa, K., Sato, N., Hirata, K.
  • 雑誌名: J. Translational Med. 2 ページ: 19-29
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Tumor-derived heat shock protein70-pulsed dendritic cells elicit tumor-specific cytotoxic T lymphocytes (CTLs) and tumor immunity (2004)
  • 著者名/発表者名: Ueda, G., Tamura, Y., Hirai, I., Kamigichi, K., Ichimiya, S., Torigoe, T., Hiratsuka, H., Sunakawa, H., Sato, N.
  • 雑誌名: Cancer Sci. 95 ページ: 248-253
  • NAID: 10013721926
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [図書] Annual Review免疫2005;熱ショック蛋白質(HSP)-ペプチド複合体による新しいMHCクラスI抗原提示経路 (2004)
  • 著者名/発表者名: 田村保明
  • 総ページ数: 8
  • 出版者: 中外医学社
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Ueda, G., Tamura, Y.et al.: "Tumor-derived Heat Shock Protein70-pulsed Dendritic Cells Elicit Tumor-specific Cytotoxic T Lymphocytes (CTLs) and Tumor Immunity."Cancer Science. 95. 248-253 (2004)
• [文献書誌] Tamura, Y., Sato, N.: "Heat Shock Proteins : Chaperoning of innate and adaptive immunities."Jpn.J.Hyperthermic Oncol.. 19. 131-138 (2003)
• [文献書誌] Kojima, T., Tamura, Y., et al.: "Granulocyte-macrophage colony-stimulating factor gene-transduced tumor cells combined with tumor-derived gp96 inhibit tumor growth in mice."Hum.Gene Ther.. 14. 715-728 (2003)
• [文献書誌] Kashiwagi, K., Tamura, Y., et al.: "Analysis of a Shared Pancreatic Cancer Antigen Recognized by an HLA-A^*2601-Restricted Cytotoxic T-Lymphocyte Clone."Pancreas. 26. E81-E88 (2003)
• [文献書誌] 田村 保明: "免疫2004 HSPによる自然免疫-獲得免疫のリンクと癌ワクチン"中外医学社. 9 (2004)