肝再生医療に向けたオーバル細胞の発生・分化の解析

• 研究課題/領域番号: 15590356
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 実験病理学
• 研究機関: 兵庫医科大学
• 研究代表者: 辻村 亨 兵庫医科大学, 医学部, 助教授 (20227408)
• 研究期間 (年度): 2003 – 2004
• 研究課題ステータス: 完了 (2004年度)
• 配分額: 3,600千円 (直接経費: 3,600千円); 2004年度: 1,400千円 (直接経費: 1,400千円); 2003年度: 2,200千円 (直接経費: 2,200千円)
• キーワード: オーバル細胞 / 肝再生 / オンコスタチンM / Dlk / 肝幹細胞 / 肝前駆細胞 / 肝芽細胞 / microarray / チロシンアミノトランスフェラーゼ / トリプトファンオキシゲナーゼ

研究概要

2-アセチルアミノフルオレン/部分肝切除(AAF/PH)モデルを施行してオーバル細胞の発生を促したF344ラットの肝臓では、オンコスタチンM(OSM)の発現はサイトケラチン19(CK19)により同定されたオーバル細胞とED2により同定されたクッパー細胞に認められた。一方、OSMの受容体(OSMR)の発現はCK19を指標として同定されたオーバル細胞に強く検出された。293T細胞にラットのOSMのcDNAをトランスフェクションして得られた培養上清でオーバル細胞株(OC15-5)を処理すると、OC15-5の増殖は抑制され、形態的に肝細胞様細胞へ変化し、肝細胞に特異的な酵素であるチロシンアミノトランスフェラーゼやトリプトファンオキシゲナーゼの発現が誘導された。OSMはオーバル細胞を肝細胞へ分化誘導すると考えられ、OSMはオーバル細胞による肝再生において重要な役割を果たしている可能性がある。
Dlk(delta-like leucine zipper kinase)は肝芽細胞に発現する膜蛋白である。AAF/PHモデルを施行してオーバル細胞の発生を促したF344ラットの肝臓では、Dlkの発現はCK19を指標として同定されたオーバル細胞に強く検出された。しかし、その頻度は全てのCK19^+オーバル細胞の約20%であり、Dlkを発現していないCK19^+オーバル細胞も多数存在した。Dlk^-オーバル細胞はグリソン鞘周囲に存在するのに対して、Dlk^+オーバル細胞はグリソン鞘周囲から離れて成熟肝細胞に接するように存在した。また、Dlk^+オーバル細胞の増殖能はDlk^-オーバル細胞に比べて低かった。以上の結果より、オーバル細胞は肝幹細胞に近い未熟な細胞から肝細胞に近い成熟した細胞を包括するヘテロ集合体と考えられ、Dlk^+オーバル細胞はDlk^-オーバル細胞から肝細胞への成熟期にある細胞である可能性が示唆された。

研究成果

• [雑誌論文] Oncostatin M inhibits proliferation of rat oval cells, OC15-5, inducing differentiation into hepatocytes (2005)
  • 著者名/発表者名: Okaya A et al.
  • 雑誌名: Am J Pathol 166 ページ: 709-719
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Oncostatin M inhibits proliferation of rat oval cells, OC15-5, inducing differentiation into hepatocytes. (2005)
  • 著者名/発表者名: Okaya A, Kitanaka J, Kitanaka N, Satake M, Kim Y, Terada K, Sugiyama T, Takemura M, Fujimoto J, Terada N, Miyajima A, Tsujimura T.
  • 雑誌名: Am J Pathol 166 ページ: 709-719
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] The origin of biliary ductular cells that appear in the spleen after transplantation of hepatocytes (2004)
  • 著者名/発表者名: Fukuda K et al.
  • 雑誌名: Cell Transplant 13 ページ: 27-33
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Inhibition by interleukin-18 of the growth of Dunn osteosarcoma cells (2004)
  • 著者名/発表者名: Okamoto T et al.
  • 雑誌名: J Interferon Cytokine Res 24 ページ: 161-167
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Localization of osteopontin at calcification sites of cholesteatoma : possible role as a regulator of deposition of calcium phosphate in the middle ear (2004)
  • 著者名/発表者名: Makiishi-Shimobayashi C et al.
  • 雑誌名: Auris Nasus Larynx 31 ページ: 3-9
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Expression of Dlk/Pref-1 defines a subpopulation in the oval cell compartment of rat liver (2004)
  • 著者名/発表者名: Tanimizu N et al.
  • 雑誌名: Gene Expr Patterns 5 ページ: 209-218
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Inhibition by interleukin-18 of the growth of Dunn osteosarcoma cells. (2004)
  • 著者名/発表者名: Okamoto T, Yamada N, Tsujimura T, Sugihara A, Nishizawa Y, Ueda H, Kashiwamura S, Tsutsui H, Futani H, Maruo S, Okamura H, Terada N.
  • 雑誌名: J Interferon Cytokine Res 24 ページ: 161-167
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] The origin of biliary ductular cells that appear in the spleen after transplantation of hepatocytes. (2004)
  • 著者名/発表者名: Fukuda K, Sugihara A, Nakasho K, Tsujimura T, Yamada N, Okaya A, Sakagami M, Terada N.
  • 雑誌名: Cell Transplant 13 ページ: 27-33
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Localization of osteopontin at calcification sites of cholesteatoma : possible role as a regulator of deposition of calcium phosphate in the middle ear. (2004)
  • 著者名/発表者名: Makiishi-Shimobayashi C, Tsujimura T, Iwasaki T, Kakihana M, Shimano K, Terada N, Sakagami M.
  • 雑誌名: Auris Nasus Larynx 31 ページ: 3-9
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Expression of Dlk/Pref-1 defines a subpopulation in the oval cell compartment of rat liver. (2004)
  • 著者名/発表者名: Tanimizu N, Tsujimura T, Kohro T, Kodama T, Nakamura K, Miyajima A.
  • 雑誌名: Gene Expr Patterns 5 ページ: 209-218
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Necessity of tyrosine 719 and phosphatidylinositol 3'-kinase-mediated signal pathway in constitutive activation and oncogenic potential of c-kit receptor tyrosine kinase with the D814V mutation (2003)
  • 著者名/発表者名: Hashimoto K et al.
  • 雑誌名: Blood 101 ページ: 1094-1102
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] TAB2 is essential for prevention of apoptosis in fetal liver but not for IL-1 signaling (2003)
  • 著者名/発表者名: Sanjo H et al.
  • 雑誌名: Mol Cell Biol 23 ページ: 1231-1238
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Mouse uterine epithelial apoptosis is associated with expression of mitochondrial voltage-dependent anion channels, release of cytochrome C from mitochondria, and the ratio of bax to bcl-2 or bcl-x (2003)
  • 著者名/発表者名: Takagi-Morishita Y et al.
  • 雑誌名: Biol Reprod 68 ページ: 1178-1184
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Isolation of hepatoblasts based on the expression of Dlk/Pref-1 (2003)
  • 著者名/発表者名: Tanimizu N et al.
  • 雑誌名: J Cell Sci 116 ページ: 1775-1786
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Role of c-kit receptor tyrosine kinase-mediated signal transduction in proliferation of bile epithelial cells in young rats after ligation of bile duct : A study using Ws/Ws c-kit mutant rats (2003)
  • 著者名/発表者名: Satake M et al.
  • 雑誌名: J Hypatol 39 ページ: 86-92
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Hepatic oval cells have the side population phenotype defined by expression of ATP-binding cassette transporter ABCG2/BCRP1 (2003)
  • 著者名/発表者名: Shimano K et al.
  • 雑誌名: Am J Pathol 163 ページ: 3-9
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Necessity of tyrosine 719 and phosphatidylinositol 3'-kinase-mediated signal pathway in constitutive activation and oncogenic potential of c-kit receptor tyrosine kinase with the D814V mutation. (2003)
  • 著者名/発表者名: Hashimoto K, Matsumura I, Tsujimura T, Kim D-K, Ogihara H, Ikeda H, Ueda S, Mizuki M, Sugawara H, Shibayama H, Kitamura Y, Kanakura Y.
  • 雑誌名: Blood 101 ページ: 1094-1102
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] TAB2 is essential for prevention of apoptosis in fetal liver but not for IL-1 signaling. (2003)
  • 著者名/発表者名: Sanjo H, Takeda K, Tsujimura T, Ninomiya-Tsuji J, Matsumoto K, Akira S.
  • 雑誌名: Mol Cell Biol 23 ページ: 1231-1238
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Mouse uterine epithelial apoptosis is associated with expression of mitochondrial voltage-dependent anion channels, release of cytochrome C from mitochondria, and the ratio of bax to bcl-2 or bcl-x. (2003)
  • 著者名/発表者名: Takagi-Morishita Y, Yamada N, Sugihara A, Iwasaki T, Tsujimura T, Terada N.
  • 雑誌名: Biol Reprod 68 ページ: 1178-1184
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Isolation of hepatoblasts based on the expression of Dlk/Pref-1. (2003)
  • 著者名/発表者名: Tanimizu N, Nishikawa M, Saito H, Tsujimura T, Miyajima A.
  • 雑誌名: J Cell Sci 116 ページ: 1775-1786
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Role of c-kit receptor tyrosine kinase-mediated signal transduction in proliferation of bile epithelial cells in young rats after ligation of bile duct : A study using Ws/Ws c-kit mutant rats. (2003)
  • 著者名/発表者名: Satake M, Shimano K, Yamamoto T, Okaya A, Iwasaki T, Kakihana M, Fujimoto J, Terada N, Tsujimura T.
  • 雑誌名: J Hepatol 39 ページ: 86-92
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Hepatic oval cells have the side population phenotype defined by expression of ATP-binding cassette transporter ABCG2/BCRP1. (2003)
  • 著者名/発表者名: Shimano K, Satake M, Okaya A, Kitanaka J, Kitanaka N, Takemura M, Sakagami M, Terada N, Tsujimura T.
  • 雑誌名: Am J Pathol 163 ページ: 3-9
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Hashimoto K et al.: "Necessity of tyrosine 719 and phosphatidylinositol 3'-kinase-mediated signal pathway in constitutive activation and oncogenic potential of c-kit receptor tyrosine kinase with the D814V mutation"Blood. 101. 1094-1102 (2003)
• [文献書誌] Sanjo H et al.: "TAB2 is essential for prevention of apoptosis in fetal liver but not for IL-1 signaling"Mol Cell Biol. 23. 1231-1238 (2003)
• [文献書誌] Takagi-Morishita Y et al.: "Mouse uterine epithelial apoptosis is associated with expression of mitochondrial voltage-dependent anion channels, release of cytochrome C from mitochondria, and the ratio of bax to bcl-2 or bcl-x"Biol Reprod. 68. 1178-1184 (2003)
• [文献書誌] Tanimizu N et al.: "Isolation of hepatoblasts based on the expression of Dlk/Pref-1"J Cell Sci. 116. 1775-1786 (2003)
• [文献書誌] Satake M et al.: "Role of c-kit receptor tyrosine kinase-mediated signal transduction in proliferation of bile epithelial cells in young rats after ligation of bile duct : A study using Ws/Ws c-kit mutant rats"J Hepatol. 39. 86-92 (2003)
• [文献書誌] Shimano K et al.: "Hepatic oval cells have the side population phenotype defined by expression of ATP-binding cassette transporter ABCG2/BCRP1"Am J Pathol. 163. 3-9 (2003)