T細胞の分化および活性化におけるRac1の機能の解明

• 研究課題/領域番号: 15590440
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 免疫学
• 研究機関: 山口大学
• 研究代表者: 鈴木 春巳 山口大学, 医学部, 助教授 (70235985)
• 研究期間 (年度): 2003 – 2004
• 研究課題ステータス: 完了 (2004年度)
• 配分額: 3,100千円 (直接経費: 3,100千円); 2004年度: 1,200千円 (直接経費: 1,200千円); 2003年度: 1,900千円 (直接経費: 1,900千円)
• キーワード: Rac / T細胞分化 / bcl-2 / 正の選択 / アポトーシス / Pax5 / プロB細胞 / シグナル伝達 / bc1-2 / アクチン / Rac1 / T細胞 / 分化 / 胸腺

研究概要

Rac1はRhoファミリーに属するsmall GTPaseであり、アクチン繊維の再構成に重要であることがよく知られている。Rac1の恒常活性型変異トランスジェニックマウスでは正の選択が負の選択へと変換することが報告されているが、ノックアウトマウスを始めとした機能喪失変異についてはまだ報告されていない。我々はT細胞分化におけるRac1の機能を解明する目的で、ドミナントネガティブ型変異Rac1遺伝子(Rac1-N17)のT細胞分化に対する効果を検討した。
T細胞分化に対する影響は、放射線照射マウスに移入することによりT細胞分化を再構築することができるPax5欠損プロB細胞を用いた実験系を利用した。Rac1-N17とGFPの融合タンパク遺伝子をレトロウイルスベクターに組み込んでPax5欠損プロB細胞に発現させ、RAG2欠損(CD45.1)マウスに移入することにより胸腺を再構築した。Rac1-N17遺伝子を強発現している胸腺細胞はCD4CD8ダブルポジティブ段階までは多数存在しているが、CD4およびCD8-SP細胞は著しく減少していた。Rac1変異遺伝子導入DP細胞においてはTCR刺激によるERKの活性化、CD69の発現は阻害されていないが、アクチン再構成が強く阻害され、さらにアポトーシスが著しく増大していることが明らかとなった。以上のことから、Rac1はDNからDPへの分化には必要ないが、正の選択には重要であり、その作用機序としてはアクチンの再構成のみならず、抗アポトーシス作用においても重要な働きをしていることが示された。

研究成果

• [雑誌論文] Impaired IgG production in mice deficient for heat shock transcription factor 1 (2004)
  • 著者名/発表者名: Sachie Inoue et al.
  • 雑誌名: J.Biol.Chem. 279 ページ: 38701-38709
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Impaired IgG production in mice deficient for heat shock transcription factor 1 (2004)
  • 著者名/発表者名: Sachiye Inouye, Hanae Izu, Eiichi Takaki, Harumi Suzuki, Mutsunori Shiral, Yoshifumi Yokota, Hitoshi Ichikawa, Mitsuaki Fujimoto, Akira Nakai
  • 雑誌名: J.Biol.Chem. 279 ページ: 38701-38709
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Impaired IgG production in mice deficient for heat shock transcription factor 1 (2004)
  • 著者名/発表者名: Sachiye Inouye et al.
  • 雑誌名: J.Biol.Chem. 279 ページ: 38701-38709
• [雑誌論文] PI3K and Btk differentially regulate B cell antigen receptor-mediated signal transduction (2003)
  • 著者名/発表者名: Harumi Suzuki et al.
  • 雑誌名: Nature Immunol. 4 ページ: 280-286
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Functional phenotype of phosphoinositide 3-kinase p85a null platelets characterized by impaired response to GP VI stimulation (2003)
  • 著者名/発表者名: Naohide Watanabe et al.
  • 雑誌名: Blood 102 ページ: 541-548
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Functional phenotype of phosphoinositide 3-kinase p85a null platelets characterized by an impaired response to GP VI stimulation (2003)
  • 著者名/発表者名: Naohide Watanabe, Hideaki Nakajima, Hidenori Suzuki, Atsushi Oda, Yumiko Matsubara, Masaaki Moroi, Takashi Kadowaki, Harumi Suzuki, Shigeo Koyasu, Yasuo Ikeda, Makoto Handa
  • 雑誌名: Blood 102 ページ: 541-548
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] PI3K and Btk differentially regulate B cell antigen receptor-mediated signal transduction (2003)
  • 著者名/発表者名: Harumi Suzuki, Satoshi Matsuda, Yasuo Terauchi, Mari Fujiwara, Toshiaki Ohteki, Tomoichiro Asano, Timothy W.Behrens, Taku Kouro, Kiyoshi Takatsu, Takashi Kadowaki, Shigeo Koyasu
  • 雑誌名: Nature Immunol. 4 ページ: 280-286
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Harumi Suzuki et al.: "PI3K and Btk differentially regulate B cell antigen receptor-mediated signal transduction"Nature Immunol.. 4. 280-286 (2003)
• [文献書誌] Naohide Watanabe et al.: "Functional phenotype of phosphoinositide 3-kinase p85a null platelets characterized by an impaired response to GP VI stimulation"Blood. 102. 541-548 (2003)